信前胡化学成分的研究

2020-01-14涂林锋肖春荣张睿增刘定平罗永明

中成药 2020年1期

涂林锋，肖春荣，张睿增，刘定平，罗永明

（江西中医药大学药学院，江西南昌 330004）

信前胡是前胡的主流商品药材来源，主产于江西上饶，以根条粗壮、柔软、皮黑肉黄、气香味浓等特点著称，是著名道地药材之一，为伞形科植物白花前胡Peucedanum praeruptorumDunn，药用部位为干燥根，具有降气化痰、散风清热之功效，用于痰热喘满、咳痰黄稠、风热咳嗽痰多，是中医临床呼吸系统疾病的主要用药之一。但由于信前胡野生资源日渐减少，目前市场上流通的药材以安徽产的宁前胡，以及浙江、福建产白花前胡为主。前期研究表明，信前胡与其他产地前胡的化学成分有较大差异，前者以含有白花前胡甲素等吡喃香豆素类化合物为主，而后者以白花前胡乙素为主［1］。药理研究表明，白花前胡甲素不仅具有舒张肠管平滑肌、钙拮抗作用，而且还对心肌细胞有多种作用［2-6］，显示出广阔的开发应用前景。因此，为了配合信前胡的仿野生栽培研究，挖掘这一传统特产药材资源，本实验对其正丁醇部位的化学成分进行研究，得到8 个香豆素和1 个酯类化合物，其中化合物1～2、9 为首次从该植物中分离得到。

1 材料

AVANCE ⅢHD 600 MHz 型核磁共振波谱仪（瑞士Bruker 公司）；Triple TOF5600＋型高分辨飞行时间质谱联用仪（美国AB Sciex 公司）；Waters 2695-2998 型高效液相色谱仪、Waters 515 制备型液相色谱仪（美国Waters 公司）；YMC-Pack ODSA 半制备色谱柱（250 mm×10 mm，5 μm，日本YMC 公司）；中压制备液相色谱仪（瑞士Buchi 公司）；ODS 反相色谱填料（50 μm，日本YMC 公司）；AB-104N 型分析天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）。GF254薄层硅胶板（青岛海洋化工厂）。色谱甲醇（上海星可生化有限公司）；其他试剂均为分析纯（西陇科学股份有限公司）；娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。

白花前胡采收于江西上饶，经江西中医药大学药学院张金莲教授鉴定为伞形科前胡属植物白花前胡Peucedanum praeruptorumDunn的根，标本（20170109）保存于江西中医药大学药学院中药化学科研室。

2 提取与分离

干燥的前胡根切段、粉碎得粗粉，采用冷浸提取法，料液比为1∶4，分别用95%乙醇冷浸提取3次，70%、50%乙醇各1 次，每次1 周（其间每天搅拌3 次），抽滤，合并提取液，减压浓缩至膏状，得白花前胡总浸膏3 656.6 g。将总浸膏分散于水中制成混悬液，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别减压浓缩后得相应部位1 200、61、25、135.2 g。正丁醇部位浸膏经D101大孔树脂分离（梯度依次为水，20%、40%、60%、95%乙醇）得到组分P1～P5。P1 组分（25.1 g）经中压制备，甲醇-水（20%、30%、40%）洗脱，TLC 检测合并相同组分，凝胶色谱分离，HPLC 制备得化合物4～7；P2 组分（12 g）经中压制备，甲醇-水（20%、30%、40%）洗脱，TLC 检测合并相同组分，凝胶色谱分离，HPLC 制备得化合物2～3、8；P4 组分（2.1 g）经MCI，乙醇-水（10%、30%、50%）洗脱，TLC 检测合并相同组分，HPLC 制备得化合物1、9。

3 结构鉴定

化合物1：淡黄色针状结晶（甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：409.123 4［M＋Na］＋，分子式C21H22O7。1H-NMR（600 MHz，methanol-d4）δ：7.88（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.56（1H，d，J＝8.7 Hz，H-5），6.88（1H，d，J＝8.7 Hz，H-6），6.57（1H，d，J＝4.8 Hz，H-4′），6.27（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），6.22（1H，m，-C＝CH），5.41（1H，d，J＝4.8 Hz，H-3′），2.08（3H，s，-COCH3），1.96（3H，dd，J＝7.3，1.7 Hz，＝CHCH3），1.88（3H，t，J＝1.7 Hz，-CH3），1.49（3H，s，2′-CH3），1.46（3H，s，2′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，methanol-d4）δ：171.8（-COCH3，-C＝O），167.9（-COC＝CH，-C＝O），162.2（C-2），158.2（C-7），155.3（C-9），145.8（C-4），141.0（＝CHCH3，＝CH），131.2（C-5），128.4（＝CCH3，＝C），115.8（C-6），114.2（C-3），113.7（C-10），108.2（C-8），78.9（C-2′），71.6（C-3′），62.5（C-4′），25.4（2′-CH3），23.1（2′-CH3），20.9（＝CHCH3，-CH3），20.8（-COCH3，-CH3），16.2（＝CCH3，-CH3）。以上数据与文献［7］基本一致，故鉴定为（3′S，4′S）-3′-acetoxy-4′-angeloyloxy-3′，4′-dihydroseselin。

化合物2：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：383.044 1［M＋K-2H］－，347.018 9［M＋H］＋，分子式C18H18O7。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.97（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.58（1H，d，J＝8.6 Hz，H-5），6.81（1H，d，J＝8.6 Hz，H-6），6.34（1H，d，J＝4.8 Hz，H-4′），6.27（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.39（1H，d，J＝4.8 Hz，H-3′），2.00（6H，s，-COCH3×2），1.41（3H，s，2′-CH3），1.33（3H，s，2′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：20.8（-COCH3×2，-CH3），24.1（2′-CH3），24.3（2′-CH3），61.6（C-4′），72.1（C-3′），79.0（C-2′），107.2（C-8），112.1（C-10），112.3（C-3），113.9（C-6），129.5（C-5），144.6（C-4），153.5（C-9），156.5（C-7），159.7（C-2），169.2（-COCH3×2，-C＝O）。以上数据与文献［8］基本一致，故鉴定为trans-3′，4′-diacetylkhellacton。

化合物3：白色无定型粉末（甲醇）。紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：449.139 5［M＋K］＋，425.144 4［M-H］－，分子式 C20H26O10。1HNMR（600 MHz，methanol-d4）δ：7.84（1H，d，J＝9.6 Hz，H-4），7.36（1H，d，J＝8.9 Hz，H-5），6.83（1H，d，J＝8.9 Hz，H-6），6.19（1H，d，J＝9.6 Hz，H-3），4.16（1H，d，J＝5.8 Hz，G-1），4.06（1H，dd，J＝7.4，5.8 Hz，H-2′），3.76（1H，dd，J＝12.2，2.9 Hz，G-6b），3.60（dd，J＝11.5，5.2 Hz，1H，G-6a），3.25（1H，dd，J＝9.3，3.2 Hz，G-4），3.18（1H，dd，J＝9.2，3.0 Hz，G-3），3.16（1H，dd，J＝14.9，3.1 Hz，H-1′b），3.14（1H，dd，J＝14.4，3.0 Hz，H-1′a），3.13（1H，dd，J＝9.2，4.8 Hz，G-2），3.10（1H，m，G-5），1.32（3H，d，J＝3.4 Hz，3′-CH3），1.23（3H，d，J＝3.4 Hz，3′-CH3）；13CNMR（150 MHz，methanol-d4）δ：24.7（3′-CH3），26.2（3′-CH3），26.3（C-1′），62.7（G-6），71.6（G-4），74.1（C-3′），75.1（G-2），77.9（G-3），78.1（G-5），86.1（C-2′），103.7（G-1），112.4（C-3），113.7（C-10），113.8（C-6），114.6（C-8），128.6（C-5），146.6（C-4），155.6（C-9），160.8（C-7），163.8（C-2）。以上数据与文献［9］基本一致，故鉴定为praeroside Ⅵ。

化合物4：黄色针晶（氯仿-甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：193.049 3［M＋H］＋，191.036 4［M-H］－，分子式C10H8O4。1HNMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：10.33（1H，s，-OH），7.91（1H，d，J＝9.4 Hz，H-4），7.21（1H，s，H-5），6.78（1H，s，H-8），6.21（1H，d，J＝9.4 Hz，H-3），3.81（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：56.0（-OCH3），102.8（C-8），109.6（C-5），110.6（C-10），111.7（C-3），144.6（C-4），145.3（C-6），149.5（C-9），151.2（C-7），160.8（C-2）。以上数据与文献［9］基本一致，故鉴定为scopoletin。

化合物5：淡黄色针晶（氯仿-甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：163.039 0［M ＋ H］＋，161.063 7［M-H］－，分子式C9H6O3。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：10.64（1H，s，-OH），7.92（1H，d，J＝9.4 Hz，H-4），7.52（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5），6.78（1H，dd，J＝8.4，2.2 Hz，H-6），6.71（1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.19（1H，d，J＝9.4 Hz，H-3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：102.2（C-8），111.3（C-10），111.4（C-6），113.2（C-3），129.7（C-5），144.6（C-4），155.5（C-7），160.5（C-9），161.4（C-2）。以上数据与文献［10］基本一致，故鉴定为umbelliferone。

化合物6：白色粉末（甲醇），紫外灯365 nm下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：447.125 6［M＋Na］＋，分子式 C20H24O10。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.91（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.18（1H，s，H-5），6.22（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），5.30（1H，d，J＝7.5 Hz，G-1），4.69（1H，t，J＝8.7 Hz，H-2′），1.20（3H，s，4′-CH3），1.14（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：25.3（C-4′-CH3），26.0（C-4′-CH3），29.0（C-3′），60.7（G-6），69.8（G-4），70.1（C-4′），73.9（G-2），76.9（G-3），77.4（G-5），91.5（C-2′），101.5（G-1），111.5（C-3），113.0（C-10），117.5（C-5），126.8（C-6），127.1（C-8），145.0（C-4），146.0（C-9），152.8（C-7），160.3（C-2）。以上数据与文献［11］基本一致，故鉴定为rutarin。

化合物7：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：423.129 8［MH］－，463.099 8［M ＋K］＋，分子式C20H24O10。1HNMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.89（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），6.98（1H，s，H-5），6.19（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.79（1H，t，J＝8.9 Hz，H-2′），4.44（1H，d，J＝7.8 Hz，G-1），1.27（3H，s，4′-CH3），1.24（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：21.9（4′-CH3），23.4（4′-CH3），29.8（C-3′），60.8（G-6），70.0（G-4），73.6（G-2），76.5（G-3），76.9（G-5），77.0（C-4′），89.9（C-2′），97.4（G-1），111.1（C-3），113.1（C-10），114.1（C-5），125.6（C-6），128.4（C-8），143.9（C-4），145.3（C-9），151.3（C-7），160.5（C-2）。以上数据与文献［11］基本一致，故鉴定为isorutarin。

化合物8：白色粉末（氯仿-甲醇），紫外灯365 nm 下呈蓝色斑点。HR-ESI-MSm／z：261.076 8［MH］－，263.091 0［M＋H］＋，285.073 0［M＋Na］＋，分子式C14H14O5。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.87（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），6.97（1H，s，H-5），6.17（1H，d，J＝9.5 Hz，H-3），4.66（1H，t，J＝8.6 Hz，H-2′），3.17（2H，m，H-3′），1.14（3H，s，4′-CH3），1.13（3H，s，4′-CH3）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：24.9（4′-CH3），26.1（4′-CH3），29.7（C-3′），70.3（C-4′），90.8（C-2′），111.1（C-2），113.1（C-10），114.2（C-5），125.6（C-6），128.4（C-8），144.0（C-9），145.4（C-4），151.6（C-7），160.7（C-2）。以上数据与文献［12］基本一致，故鉴定为rutaretin。

化合物9：黄色油状物（氯仿）。ESI-MSm／z：279.2［M＋H］＋，分子式C16H22O4。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：7.71（2H，dd，J＝5.7，3.3 Hz，H-2，5），7.53（2H，dd，J＝5.7，3.3 Hz，H-3，4），4.30（4H，t，J＝6.7 Hz，-OCH2），1.72（2H，dq，J＝9.1，6.8 Hz，-CH2），1.44（4H，m，-CH2），0.96（6H，t，J＝7.4 Hz，-CH3）；13C-NMR（150 MHz，CDCl3）δ：13.9（2-CH3），19.3（2-CH2），30.7（2-CH2），65.7（2-OCH2），129.0（C-3，6），131.1（C-4，5），132.5（C-1，2），167.9（2-COO）。以上数据与文献［13］基本一致，故鉴定为dibutyl phthalate。