肠道菌群在妊娠期糖尿病患者体内分布特点及与炎症因子的关系

柳栾美 张天如 郭金霞

洛阳北方企业集团有限公司职工医院妇产科，河南省洛阳市 471000

肠道正常菌群与黏膜表面共同组成了天然屏障，在消化吸收、调节免疫功能、阻止致病菌侵入等多方面发挥重要作用[1]。肠球菌和肠杆菌是最常见的肠道致病菌，威胁消化系统正常生理功能；乳杆菌和双歧杆菌为肠道益生菌，可抑制肠道内致病菌增殖，降低肠道内pH，调节微生态环境；梭杆菌和拟杆菌与肠道黏膜正常生理结构和功能密切相关，且结构改变与糖尿病等代谢性疾病明显相关[2]。近年来，肠道菌群在代谢性疾病中的调控作用已成为研究热点，但研究对象多为2型糖尿病患者，关于妊娠期糖尿病的报道较少见。本文分析了妊娠期糖尿病患者肠道重要菌群的分布特点及与炎症因子的相关性，旨在为妊娠期糖尿病的防治提供参考。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2016年6月—2018年5月间在我院定期产检并诊断为妊娠期糖尿病的患者110例以及妊娠期糖耐量正常者110例。入选标准：(1)本市常住居民，饮食为洛阳地区普通饮食；(2)孕前未患糖尿病或糖耐量异常。排除标准：(1)合并高血压、消化道疾病等慢性病者；(2)长期服用抗生素或胃肠道菌群调节药的患者。妊娠期糖尿病组患者年龄21～39岁，平均年龄(26.52±3.90)岁；孕周18～32周，平均孕周(25.82±3.25)周；孕次1～3次，平均孕次(1.21±0.23)次。妊娠期糖耐量正常组孕妇年龄20～39岁，平均年龄(25.82±4.16)岁；孕周17～32周，平均孕周(25.34±2.96)周；孕次1～3次，平均孕次(1.29±0.31)次。另取同年龄段在本院健康体检的女性100例为正常对照组，年龄20～40岁，平均年龄(26.60±3.15)岁。妊娠期糖尿病组与妊娠期糖耐量正常组年龄、孕周、孕次之间差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 肠道菌群检测：取1g晨起排出的粪便采用灭菌稀释液按1∶10比例稀释，再按相同的方法连续10倍稀释至10-8，混合均匀。分别取不同稀释度的粪便混悬液100μl，接种到不同培养基上，肠球菌、肠杆菌等需氧培养24h，双歧杆菌、拟杆菌、乳杆菌等厌氧培养48h。对菌群进行定性和定量分析，其中定性分析为培养后计数各培养基中的菌落数，在10-3稀释度的培养液中未检出菌落为阴性；定量分析为通过菌落形态、生化反应、镜检等鉴定并计数菌落，得出相同稀释度的平均菌落数，计算出各标本中的菌含量。

1.2.2 炎症因子检测：收集受试者空腹肘静脉血，2 000r/min离心10min，取上层血清，Elisa法检测IL-6、TNF-α水平，试剂盒购于上海伊奥生物科技有限公司；免疫荧光法检测CRP水平，试剂盒购于广州健仑生物科技有限公司。

2 结果

2.1 各组肠道菌群菌落数比较 妊娠期糖尿病组肠球菌、肠杆菌、拟杆菌的菌落数明显高于妊娠期糖耐量正常组，乳杆菌、双歧杆菌的菌落数明显低于妊娠期糖耐量正常组，差异有统计学意义(P<0.05)。梭杆菌的菌落数在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组肠道菌群菌落数比较

注：与正常对照组相比，aP<0.05；与妊娠期糖耐量正常组相比，bP<0.05。

2.2 各组炎症因子水平比较 妊娠期糖尿病组IL-6、TNF-α、CRP水平明显高于妊娠期糖耐量正常组和正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。IL-6、TNF-α、CRP水平在妊娠期糖耐量正常组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 各组炎症因子水平比较

注：与正常对照组相比，aP<0.05；与妊娠期糖耐量正常组相比，bP<0.05。

2.3 相关性分析 Spearman分析结果显示，肠球菌与IL-6、TNF-α呈正相关；肠杆菌与IL-6、TNF-α、CRP呈正相关；乳杆菌、双歧杆菌和拟杆菌与IL-6、TNF-α呈负相关。见表3。

3 讨论

妊娠期糖尿病是孕期最常见的并发症之一，近年来发病率逐渐升高，严重影响母婴健康[3]。当多种因素引发益生菌数量下降，致病菌数量增加时，肠道内微生态环境破坏导致菌群失调，循环系统中内毒素水平上升，产生慢性炎症以及糖尿病、脂肪肝等代谢性疾病[4]。本研究显示，妊娠期致病

表3 肠道菌群与炎症因子的相关性分析

注：aP<0.05。

菌数量明显高于正常对照组，益生菌数量明显低于正常对照组，且妊娠期糖尿病患者上述改变更明显。

本研究中妊娠期糖尿病组炎症因子水平明显高于妊娠期糖耐量正常组；相关性分析显示，肠球菌与IL-6、TNF-α呈正相关；肠杆菌与IL-6、TNF-α、CRP呈正相关；乳杆菌、双歧杆菌和拟杆菌与IL-6、TNF-α呈负相关。有研究显示，孕期女性肠道菌群组成和数量随孕周的延长逐渐接近硬化性改变患者的肠道菌群水平，可能与炎症反应有关[5]。胰岛素抵抗是妊娠期糖尿病的病理基础，炎症因子水平增加是胰岛素抵抗的直接结果之一。妊娠期糖尿病患者代谢产物增加，改变了肠道的厌氧环境和pH水平，而益生菌多属于专性厌氧菌，对肠道内环境改变的敏感性最强。可推测，妊娠期糖尿病患

者体内糖代谢异常会导致乳杆菌、双歧杆菌明显减少，可能引发炎症因子水平升高，加重胰岛素抵抗，形成恶性循环，加重病情发展。