生化免疫检验中化学发光免疫测定技术的应用及临床价值探讨

傅美丽

东海县人民医院检验科，江苏东海 222300

甲亢是头颈部常见的疾病，其发生可能与内分泌、自身免疫、遗传因素有关，患者往往存在机体中糖、脂肪或蛋白质等代谢异常而诱发一系列的生化免疫指标改变[1]。目前，临床上对于甲亢的诊断主要还是通过甲状腺生化免疫指标、核素扫描、B超检查等等，这其中，生化免疫指标检验的价值较高[2]。化学发光免疫测定(CLIA)、放射免疫分析法(RIA)是甲亢生化免疫检验的两种常见方式，随着CLIA技术的发展和应用，其在生化免疫检验中发挥了重要的作用，该文以CLIA法为例展开研究[3]。该次研究以2016年12月—2018年12月该院检验科检验的 70例甲亢患者标本为例，观察CLIA法在甲亢生化免疫检验中的临床应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选择该时间段内该院70例甲亢患者和70名健康志愿者的生化免疫检验资料进行分析。其中甲亢组70例患者中，男性36例、女性34例；患者年龄在34～75岁，平均年龄(54.24±20.07)岁。对照组70名志愿者中，男性40名，女性 30名，患者年龄在 34～75岁，平均(55.08±20.15)岁。纳入标准：①甲亢组患者均由临床证实为甲亢；②临床资料全面；③签署知情同意书。排除标准：①资料不全或标本污染者；②存在血液系统疾病者；③不同意参与研究者。该次研究上报该院伦理委员会，并获得批准同意，利用统计学软件对两组受检者基本资料进行统计分析，结果得到差异无统计学意义（P＞0.05），可比较。

1.2 方法

两组均取清晨空腹静脉血3 mL，采用促凝管采血，以CLIA法测定，采用贝克曼库尔勒UNICEL DXI 800化学发光检测仪，以3 500 r/min下离心10 min，获取血浆冷冻保存，进行甲状腺各项功能检测，包括血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺球蛋白水平(Tg)、促甲状腺激素(TSH)水平，试剂盒由贝克曼库尔勒公司提供，参照说明书操作。

1.3 观察指标

对比两组患者的 FT3、FT4、Tg、TSH 等指标结果，FT3 ＞6.47 pmol/L、FT4＞16.0 pmol/L、Tg＞40 ng/mL、TSH ＜4.91 μIU/mL者诊断为甲亢，对比两种方法诊断结果。

1.4 统计方法

应用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计量资料用（±s）表示，组间比较行t检验，计数资料用[n(%)]表示，组间比较行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检者 FT3、FT4、Tg、TSH 水平对比

甲亢组FT3、FT4、Tg水平明显高于对照组，但TSH水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两种方法生化免疫指标检验结果（±s）

表1 两种方法生化免疫指标检验结果（±s）

组别 FT4(pmol/L)FT3(pmol/L) Tg(ng/mL) TSH(μIU/mL)甲亢组(n=70)20.07±2.318.98±1.7247.47±3.620.41±0.18对照组(n=70)8.32±1.144.52±1.5224.62±4.323.74±0.61 t值6.8184.0338.4718.921 P值0.0000.0000.0000.000

2.2 CLIA甲亢检出情况

甲亢组经CLIA检出阳性68例，漏诊2例，阳性检出率97.14%，漏诊率2.86%；对照组均未检出阳性。

3 讨论

甲状腺功能亢进顾名思义就是指甲状腺功能异常的一种疾病，甲状腺激素是促进新陈代谢、机体氧化还原反应的重要激素，甲状腺功能异常时，甲状腺分泌的T3、T4、FT3、FT4、TSH、Tg等指标就会有一定的变化。原则上，甲亢患者因性甲状腺激素水平测定，检测甲状腺激素水平可判断患者是否存在甲状腺疾病，也可用于检测患者是否存在某些脏器机能出现问题的情况；同时，检测促甲状腺激素受体抗体水平也具有检测甲状腺激素相同的功能，更可为发现和治疗疾病提供依据。Tg、FT3、FT4、TSH等生化免疫指标检验不仅能反映甲状腺功能，更能帮助判断甲状腺疾病类型[4]。

首先，FT3属于甲状腺素生理活性部分，当甲状腺功能紊乱时，可联合FT4、TSH等指标一起测定，对甲状腺功能是否正常、亢进或低下有重要意义；FT4是体外试验的灵敏指标之一，与T3、T4在血液中保持相对恒定，一般FT4升高时表示患者可能出现甲状腺重度、甲亢、甲状腺受体不应症，降低时可能表示患者可能存在甲减、低蛋白血症等等[5]。TSH是腺垂体分泌的促进甲状腺生长和维持其机能的激素，其分泌一方面受下丘脑分泌的TRH的促进行影响，也受T3、T4反馈性的抑制性影响，TSH增高是可能表示患者存在甲减、桥本病，降低时可能表示患者存在甲亢、垂体性甲功低下[6]。Tg是甲状腺滤泡上皮细胞分泌（TFEC）的大分子糖蛋白，由甲状腺细胞合成、释放进入TFEC，也可由TSH、碘缺乏和刺激性免疫球蛋白因素刺激产生。正常情况下，Tg在机体中的水平较低，但当机存在部分甲状腺病变时，因病变引起Tg合成和分泌异常[7]。

对于上述甲状腺各项生化免疫指标的检测方法，临床上常见的包括放射免疫分析法、酶免分析法、化学发光免疫分析法、时间分辨荧光免疫分析法，而其中放射免疫分析法和化学发光免疫分析法是最常见的两种方法。放射免疫分析法利用同位素标记的与未标记的抗原同抗体发生竞争性抑制反应，反应分离后分别测量放射性而求得未标记抗原的量[8]。其优势在于灵敏度高、特异性好，精密度高，对仪器和设备的要求不高，因而被广泛使用，但因检测过程容易产生放射性污染，检验结果也受放射性元素衰减影响，手工操作也容易影响精确度。化学发光免疫分析法的原理是利用具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于检测抗原、半抗原、抗体等物质。化学发光免疫分析法的优势在于灵敏度高，线性范围宽，仪器设备简单，操作方便，稳定性好，因此结果范围波动较小[9]。

该次研究结果显示，甲亢组患者FT3(8.98±1.72)pmol/L、FT4(20.07±2.31)pmol/L、Tg(47.47±3.62)ng/mL 等指标检出水平高于对照组的 (4.52±1.52)pmol/L、(8.32±1.14)pmol/L、(24.62±4.32)ng/mL，但甲亢组患者 TSH(0.41±0.18)μIU/mL显著低于对照组(3.74±0.61)μIU/mL（t=4.033、6.818、8.471、8.921，P＜0.05）。甲亢组经CLIA检出阳性68例，漏诊2例，阳性检出率97.14%，漏诊率为2.86%；对照组均未检出阳性。这也显然说明，化学发光免疫法在生化免疫检验中有较高的利用价值，在灵敏度、特异性及与抗体的亲和力、有效期、数量级、稳定性上有显著优势。这与肖美莲[10]的研究结果有一致之处，肖美莲学者针对50例甲状腺肿瘤、50例甲亢、50例其他甲状腺疾病患者和50名健康人员均检测FT3、FT4、Tg、TSH等指标。结果显示，存在甲状腺疾病的患者的Tg、FT3、FT4、TSH各项指标平均为(9.25±1.82)pmol/L、(22.31±2.31)pmol/L、(50.44±4.62)ng/mL、(0.40±0.17)μIU/mL， 健康人员的 Tg、FT3、FT4、TSH 各项指标平均为 (4.45±1.42)pmol/L、(8.29±1.12)pmol/L、(24.68±4.16)ng/mL、(3.94±0.70)μIU/mL， 两组检测指标有差异有统计学意义（P＜0.05），且甲亢组化学发光免疫分析检测法灵敏度和特异性均为100%，甲状腺肿瘤及其他甲状腺疾病的灵敏度在85%～95%之间。这也显然说明，化学发光免疫可有效的对甲状腺疾病进行检测，可为临床诊断提供准确数据，应在临床检验中推广应用。

综上所述，利用化学发光免疫法可测定FT3、FT4、TSH、Tg等指标可帮助临床诊断甲亢。