35%氟吡菌酰胺·戊唑醇悬浮剂的高效液相色谱分析

2019-12-18赵成林王佛娇程小会陈丽金

现代农药 2019年6期

赵成林，王佛娇，程小会，陈丽金，江林

（广州市农业科学研究院，广州 511462）

氟吡菌酰胺为拜耳公司研发的琥珀酸脱氢酶抑制剂，属于吡啶乙基苯酰胺类，用于防治蔬菜、水果等作物的白粉病等病害[1-2]。戊唑醇为三唑类杀菌剂，主要用于防治禾谷类作物的锈病、白粉病等病害[3]。目前，关于氟吡菌酰胺的分析研究较少，主要是气相法和气相-质谱联用法[4-5]，关于戊唑醇的分析研究方法主要有气相色谱法和液相色谱法[6-8]，两者复配为混剂的液相色谱同条件分析方法未见报道。

本文建立同一液相色谱条件下同时检测35%氟吡菌酰胺·戊唑醇悬浮剂中的氟吡菌酰胺、戊唑醇的分析方法，具有较高的准确度和精密度，是一种较为实用的分析方法。

1 材料与方法

1.1 试剂

氟吡菌酰胺标准品（99%），Dr.Ehrenstorfer公司；戊唑醇标准品（99.3%），沈阳化工研究院；超纯水；甲醇（色谱纯）；35%氟吡菌酰胺·戊唑醇悬浮剂，拜耳股份公司。

1.2 仪器

高效液相色谱仪：Agilent 1260（具有可变波长紫外检测器）；色谱柱：Eclipse XDB-C18不锈钢柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；超声波清洗机。

1.3 液相色谱条件

流动相：甲醇与水的体积比为70∶30；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；检测波长：220 nm；进样体积：10 μL；保留时间：氟吡菌酰胺约为4.81 min，戊唑醇约为7.82 min。氟吡菌酰胺和戊唑醇标样及样品的高效液相色谱图见图1、图2。

图1 氟吡菌酰胺和戊唑醇标样高效液相色谱图

图2 35%氟吡菌酰胺·戊唑醇悬浮剂高效液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标准溶液的配制

称取氟吡菌酰胺和戊唑醇标样各0.01 g（精确至0.000 2 g），置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超声溶解后摇匀备用。

1.4.2 样品溶液的配制

称取含氟吡菌酰胺和戊唑醇各0.057 g（精确至0.000 2 g）的试样，置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，超声溶解后过膜备用。

1.4.3 测定

按上述色谱条件，连续进不少于5针标样溶液，当相邻2针的相对响应值变化小于1.5%时，按照标样溶液、样品溶液、样品溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.4.4 计算

将测得的2针试样溶液及其前后2针标样溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面积分别进行平均。试样中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的质量分数w（%）按式（1）计算。

式中：A1为标样溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面积的平均值，mAU·s；A2为试样溶液中氟吡菌酰胺（戊唑醇）峰面积的平均值，mAU·s；m1为氟吡菌酰胺（戊唑醇）标样的质量，g；m2为试样的质量，g；P为标样中氟吡菌酰胺（戊唑醇）的质量分数，%。

2 结果与分析

2.1 波长的选择优化

笔者利用紫外可见分光光度计对氟吡菌酰胺标准溶液进行最大波长检测，发现在220 nm处有最大吸收，经液相色谱上机试验，确定220 nm为氟吡菌酰胺的检测波长。经参考现行国家标准以及其他研究文献，确定戊唑醇的检测波长为220 nm，此波长下，两个目标物都有很好的响应，无杂质干扰。

2.2 色谱条件的选择

选择C18短柱，以甲醇-水作为流动相，选择甲醇与水的体积比为50∶50、60∶40、70∶30、80∶20等4种情形下对两个目标分别进行试验比较，发现当甲醇与水的比例为70∶30时，氟吡菌酰胺和戊唑醇分离效果理想，出峰时间适中，峰形对称，能够满足检测要求。

2.3 分析方法的线性相关性测定

准确吸取“1.4.1”中标样溶液1.0 mL置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容成标样溶液A，再从标样溶液A中吸取0.1、0.5、1.0、5.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，将两次配制的标样溶液用于液相色谱分析。在上述色谱条件下，测得其相应的峰面积，以氟吡菌酰胺（戊唑醇）的浓度为横坐标，氟吡菌酰胺（戊唑醇）的峰面积为纵坐标，绘制线性关系曲线，线性方程分别为y=17.461x-8.787 8，y=21.678x-12.674，相关系数均为0.999 3。