肇庆地区无偿献血人群人类嗜T淋巴细胞病毒筛查情况及分析

梁剑锋　廖扬勋　陆倩文　余文潮　廖子慧　黄钜明　倪文丽

[摘要]目的 了解人类嗜T淋巴细胞病毒（HTLV）在肇庆市无偿献血人群中的感染情况。方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对2016年3月14日～2018年12月20日肇庆市中心血站献血的全部献血者112 742例做抗-HTLV-Ⅰ/Ⅱ筛检，对筛检中发现的反应性（S/CO≥1）标本送广州血液中心先用化学发光法，再用核酸试验（PCR）或免疫印迹（WB）检测确认并确定HTLV亚型。结果 用ELISA方法共检测出67例HTLV-Ⅰ/Ⅱ阳性，初筛阳性率为0.06%，将67例标本送广州血液中心确证，结果均为阴性。阳性组的光密度（OD）值为0.449，阴性组的OD值为0.328，两组的OD值比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 从目前检测结果来看，暂未发现肇庆市无偿献血人群中HTLV感染阳性。

[关键词]人类嗜T淋巴细胞病毒;无偿献血人群;感染

[中图分类号] R511          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2019）10（c）-0135-03

[Abstract] Objective To investigate the infection of human T-lymphocytic leukemia virus （HTLV） in blood donors in Zhaoqing. Methods Screening of 112 742 voluntary blood donation samples were collected， from March 14， 2016 to December 20， 2018 in Zhaoqing Central Blood Station. All the samples were performed anti-HTLV-Ⅰ/Ⅱ by ELISA. The positive samples （S/CO≥1） found in screening procedure were sent to Guangzhou Blood Center were screened by chemiluminescence then were further verified by polymerase chain reaction （PCR） and Western blot （WB）. Results A total of 67 HTLV-Ⅰ/Ⅱ positive cases were detected by ELISA. The positive rate of primary screening was 0.06%. The 67 samples were sent to Guangzhou Blood Center for confirmation and the results were negative. The OD value of positive group was 0.449， while that of negative group was 0.328. There was no significant difference in OD value between the two groups （P>0.05）. Conclusion According to the current test results， we find no positive HTLV infection in the voluntary blood donors in Zhaoqing.

[Key words] Human T-cell lymphotropic virus; Voluntary unpaid blood donors; Infection

人類嗜T淋巴细胞病毒（HTLV）是20世纪80年代初发现的第一个人类逆转录病毒，主要有Ⅰ型（HTLV-Ⅰ）和Ⅱ型（HTLV-Ⅱ）之分。其中HTLV-Ⅰ在加勒比海地区、南美东北部、日本西南部以及非洲的某些地区呈地方性流行。HTLV-Ⅱ在美国黑人、印第安人及欧洲等静脉吸毒者中流行。HTLV的传播方式类似HIV，可通过输血、性接触、共用针头、胎盘和哺乳等途径传播。我国是HTLV低流行地区，福建、广东、广西和浙江等沿海地区的流行率会高于其他内陆地区。绝大部分的HTLV感染者是长期无症状的，HTLV-Ⅰ可引起T淋巴细胞白血病/淋巴瘤、热带痉挛性截瘫/HTLV-Ⅰ相关性脊髓病等[1]，是一种慢性进行性神经系统紊乱。此外，HTLV-Ⅰ感染还与其他多种疾病有关，如葡萄膜炎（眼色素层炎）、慢性炎症性关节炎、感染性皮炎、Sjogren综合症、多发性肌炎、支气管肺病、口腔病变（阿菲他口炎、口唇疱疹和非尖锐湿疣）等。HTLV-Ⅱ感染除能引起神经系统疾病外，还可能与血细胞白血病有关。为了解肇庆市无偿献血人群HTLV感染情况，肇庆市中心血站对抽取的112 742份无偿献血者标本采用ELISA法检测HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体，并统计分析，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

肇庆市中心血站2016年3月14日～2018年12月20日共112 742例无偿献血者，皆符合GB18467-2011版《献血者健康检查要求》。采用EDTA-K2抗凝的真空采血管留取5 ml血液标本用作ELISA检测。本研究经本血站医学伦理委员会审核批准。

1.2试剂与仪器

HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体检测试剂盒（北京万泰生物药业股份有限公司，批号为T20180403B、T20180302B等），试剂均在有效期内使用，TECAN全自动加样器处理系统（FREEDOM EVO，瑞士TECAN公司），全自动酶免分析系统（BEP，德国西门子公司），SUNRISE酶标仪（TECAN，瑞士TECAN公司）。

1.3方法

酶联免疫吸附试验（ELISA）法，试剂由北京万泰生物药业股份有限公司提供。临界值（Cut-off）=阴性对照孔均值+0.18。标本光密度（OD）值与Cut-off的比值（S/CO）≥1.0为阳性，<1为阴性。献血后采集的血样，经血站进行HTLV抗体检测，若初次检测为阳性，再取原标本及其辫子进行双孔复查，若均为阴性，则判定为阴性;若至少一孔为阳性，进一步送广州血液中心进行确认实验。确认实验包括两个方面：先用化学发光法对标本进行检测，若为阴性即为阴性，若为阳性进一步检测，一是检测白细胞中是否含有HTLV的核酸，二是用免疫印迹方法检测血浆中HTLV抗原，这两种方法有一种为阳性的，即为HTLV阳性。所有操作均严格按照试剂盒说明书要求进行（图1）。

1.4统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验，不符合正态分布的改用中位数表示，两组间比较采用非参数检验（秩和检验），以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 ELISA检测结果

11 242份献血者标本共筛查出抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ67份标本的OD值分布如图2，筛查阳性反应率为0.06%。

2.2初筛反应性标本的确证结果

所有初筛反应性的标本进一步做化学发光实验，经化学发光法检测为阳性的再进行确证实验。经化学发光确认为阳性的有9份标本，这9份标本的人口学资料如表1，进一步做确证后，9份标本结果都为阴性。

2.3流行病学调查

67份初筛反应性的献血者中有61例均为广东籍人士，只有6例为外来人士，多次献血者为32例，首次献血的为35例，男42例，女25例，将这67份初筛反应性的标本分成化学发光阳性（9份，其OD值为0.449）和阴性（58份，其OD值为0.328）两组，两者比较，差异无统计学意义（Z=1.729，P=0.089）。

3讨论

HTLV广泛分布于全世界，其主要传播途径包括输血传播、性传播和母婴传播。美国的HTLV筛查感染率为0.025%，但考虑到危害性，美国从1988年开始把HTLV-Ⅰ列入常规筛查项目。加勒比海地区为高流行区，HTLV抗体阳性率高达2%～12%。日本是HTLV-Ⅰ的高流行区域，1984年即开始在献血者中筛查HTLV-Ⅰ并持续至今[2]，日本不同地区的感染率0.66%～1.02%[3]。台湾地区也把HTLV列入了常规筛查项目，HTLV-Ⅰ的流行率为0.5%～0.9%。欧洲的人群整体感染率较低，仅个别国家有少数感染者。英国的感染率为0.001%～0.55%[4]，法国为0.002%～0.035%。英国和法国把HTLV列为筛查项目。挪威在1998年筛查了33 000例献血者发现了1例HTLV-Ⅱ阳性，并于2000年开始全面筛查，但是至2006年未再发现阳性，于2007年停止了HTLV筛查。芬兰也于2008年停止了HTLV篩查。虽然我国是HTLV低流行地区，但已有部分地区报道献血者中存在HTLV无症状感染者，有报道显示在福建、广东、广西和浙江等沿海地区的流行率会高于其他地区。2014年林铁辉等[5]报道了福建莆田地区无偿献血人群HTLV感染情况，确认阳性率为0.101%。漳州市无偿献血人群确认阳性率为0.005%[6];苏州市无偿献血人群确认阳性率为0.0039%[7];而合肥、洛阳、重庆、天津市等内陆地区经确认均无HTLV阳性献血者[8-11]，本市目前没有发现HTLV阳性献血者，肇庆市远离沿海地区，为HTLV低流行地区或非流行区域。但我省的广州地区献血者HTLV的确认阳性率为0.02%[12]，佛山地区的确认阳性率为0.003%[13]，中山确认阳性率为0.0024%[14]，肇庆与广州、佛山、中山等地处珠三角地区，交通方便人口流动频繁，也不能掉以轻心。广东省要求2016年3月1日前全省开展献血者HTLV筛查检测。肇庆地区112 742份献血者标本中检出抗HTLV-Ⅰ/Ⅱ6反应性标本67份，后经广州血液中心确认后，有9份为化学发光阳性，但经核酸确认均为阴性，初筛阳性率为0.06%，67例HTLV-Ⅰ/Ⅱ有6份抗体初筛结果呈阳性，确证结果呈阴性的献血者，仍存在传播HTLV的风险，无症状HTLV病毒携带者成为固定献血者反复献血，经血液传播HTLV病毒风险将被数倍放大，将对血液安全和受血者的健康产生严重危害，因此有效预防HTLV经血液传播的方法是及时发现HTLV感染的献血者，并采取措施阻止其献血，切断HTLV传播途径，建议肇庆地区常规开展检测HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗体。另外文献报道滤除白细胞的血液制品可大幅降低感染HTLV的风险[15]。

综上所述，肇庆市为HTLV低流行区或非流行区域，但结合国家和省的相关检测要求，常规开展HTLV-Ⅰ/Ⅱ型抗体的检测，可有效预防或减少HTLV-Ⅰ/Ⅱ经输血传播，保证血液质量安全，另外常规对血液制品进行滤白处理。

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（收稿日期：2019-01-18  本文编辑：崔建中）