GC-MS法检测苦木叶和皮的挥发性成分

王静妮 邓延秋 唐红珍 黄惠 张振伟

【摘 要】目的： 检测苦木叶和皮的挥发油成分并进行比较分析。方法：采用水蒸气蒸馏（SD）法提取苦木叶和皮的挥发油成分，利用气相色谱-质谱（GC-MS）联用仪对其化学成分进行检测。通过质谱数据库（NiST08），结合人工谱图解析，查对有关文献数据，从基峰、相对丰度等方面进行比较，确定苦木叶和皮的挥发性成分，并采用峰面积归一法确定各组分相对含量。结果：苦木叶中鉴定出24种化学成分，苦木皮中鉴定出23种化学成分，其中11种为两者共同的成分。结论：苦木叶和皮来自苦木不同组织，其含有的挥发性化学成分种类不尽同，含量相差也较大，在苦木资源的进一步研究开发时应区分对待。

【关键词】 苦木叶;苦木皮;挥发油;气质联用

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2019）17-0035-04

Abstract： Objective To analyze and compare the volatile oil components in the leaves and barks of picrasma quassioides. Methods The volatile oil samples of picrasma quassioides in the leaves and barks were prepared by steam distillation （SD）， and the constituents were qualitatively analyzed by GC-MS. The volatile components were determined on the basis of mass spectrometry database （NiST08） and the analysis of the spectrogram compared with the base peak and relative abundance while checking with related literature data. The content of each peak was detected by

the normalization method of peak area. Results 24 and 23 kinds of chemical components were detected from the leaves and barks of picrasma quassioides， respectively. Conclusions The chemical composition and content were different in the leaves and barks which should be noted in the further research and development of picrasma quassioides （D. Don） Benn.

Key words：picrasma quassiodes （D. Don） Benn; Leaves; Barks; Volatile Oil; GC-MS

苦木（picrasma quassioides （D.Don） Benn）為苦木科苦木属植物，以苦味著称，固有“苦树”“苦胆”之名，主要分布在我国黄河流域以南各省区，其中以广东和广西的资源比较丰富，喜生长在山坡，山谷较潮湿处[1]。《中国药典》2015版收载的苦木药材为苦木的干燥枝与叶，具有清热祛湿、解毒消肿之功效，用于风热感冒、咽喉肿痛、温热泻痢、湿疹、毒蛇咬伤等[2]。苦木叶和苦木皮来自苦木不同的组织，首先从生长特点来看，苦木树皮呈灰黑色，幼枝灰绿色，无毛，具明显的黄色皮孔。苦木叶为单数羽状复叶，小叶卵状长椭圆形或卵状披针形，近无柄;先端锐尖，基部偏斜或稍圆，边缘具纯齿;两面通常绿色，有的下表面淡紫红色，沿中脉有柔毛。

苦木的化学成分复杂，目前国内外对其化学成分的报道有铁屎米酮类生物碱、咔巴啉类生物碱、苦木苦味素、甘遂型三萜、酚苷、酚酸、苯丙素、二氢黄酮苷类等化合物。现代药理研究表明，苦木具有抗菌消炎，解热，降压，对心脏的影响，增加局部血流量，降低转氨酶，抗癌，抗蛇毒，抗疟等广泛的生物活性[3-6]。

一直以来对苦木化学成分的研究主要集中在苦木茎和粗枝，对苦木叶和皮的研究鲜有报道[7-8]。为填补苦木叶和苦木皮化学成分研究的空白，项目采用水蒸气蒸馏（SD）法提取苦木叶和皮中的挥发油成分，利用气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术对其化学成分进行检测分析[9]，为进一步研究和开发苦木资源，扩大药源提供研究基础。

1 仪器和材料

1.1 仪器 Agilent 7890A-5975C 型气相色谱-质谱联用仪（美国 Agilent 公司）;DHG-9240A型电热鼓风恒温干燥箱（上海精密试验设备有限公司）;DF-20台式连续投料粉碎机（温岭市林大机械有限公司）;ME204E/02型电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）。

1.2 材料 苦木药材（图A、图B）采购于广西贵港市覃塘山区，经广西中医药大学谭勇教授鉴定为正品苦木picrasma quassioides （D.Don） Benn，无水乙醚（天津大茂化学试剂有限公司），无水硫酸钠（天津大茂化学试剂有限公司）。

2 GC-MS检测苦木叶和皮的挥发油成分

2.1 实验参数及分析条件 石英毛细管柱HP-5ms （30 m × 25 μm × 0.25 μm）;载气为高纯He（99.995%）;进样口温度250 ℃;进样量1 μL;分流比20 ∶1。程序升温：70～250 ℃，初始温度70 ℃（保留1 min），以10 ℃/min速率升温至250 ℃（保留1 min）。电离方式为EI，能量70 eV，离子源温度230 ℃，电子倍增1.933 kV，扫描质量范围m/z 33～800。

2.2 苦木挥发油的提取 按照《中国药典》2015版第四部附录通则2204中挥发油测定法的甲法[10]，取经粉碎的苦木叶和苦木皮各50 g，分别加1000 mL蒸馏水，蒸馏5 h至收集器中油量不再增加后停止加热，放置1 h。用乙醚将挥发油从测定装置中转移出来，加入无水硫酸钠除去残余水分，经0.45 μm 微孔滤膜过滤后，用得到淡黄色薄荷香气味透明液体，收集冷藏备用。

2.3 挥发油成分检测 按上述实验参数及条件，使用气相色谱质谱联用仪分别对苦木叶和皮的挥发油进行检测分析，采用安捷伦GC-MS化学工作站数据处理系统，以峰面积归一法测得挥发性物质各组分相对含量，苦木叶和苦木皮提取的挥发油总离子流图分别见图1、图2。对总离子流图中各峰经质谱数据库（NiST08），配合人工谱图解析，与谱库的数据匹配度（SI）均达到90%以上，并查对有关数据文献，从基峰、相对丰度等方面进行比较，最终鉴定了苦木叶和皮的挥发性成分见表3。

3 结果及分析

从苦木叶中检测出24种挥发性成分，主要为烷烃类，其中二十四烷的含量最高（14.01%），十九烷次之（13.24%）。含量较多的非烷烃类有石竹素（5.45%）、油酸酰胺（4.25%）、棕櫚酸（2.73%）、环氧化蛇麻烯Ⅱ（2.02%）、β-石竹烯（2.00%）、α-石竹烯（1.40%），β-榄香烯（1.32%）等，其他成分如对乙烯基愈创木酚、反式-橙花叔醇、桉油烯醇、雪松醇、17-三十五烷酮、硬脂酰胺等含量都在1%以下。

从苦木皮中检测出23种挥发性成分，与苦木叶类似，含量最高的成分为烷烃类，其他非烷烃类成分如棕榈酸（12.47%）、γ-三烯生育酚（6.58%）含量也较多，而壬醛、α-蒎烯、荜澄茄油烯、月桂酸、石竹素、雪松醇、肉豆蔻酸、西柏烷、9， 10-亚甲基油酸甲酯等挥发性成分的含量都在1%以下。

研究运用采用水蒸气蒸馏的方法，获取苦木叶和皮中的挥发油，再用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析，采用峰面积归一法确定各组分相对含量，从苦木叶和苦木皮中分别鉴定了24种和23种挥发性成分，除了常见的烷烃类成分外，苦木叶中还检测到具有显著抗癌活性作用β-榄香烯成分。此外，苦木叶和皮中同时检测到桉油烯醇、石竹素、雪松醇、植酮、棕榈酸、十六烷、17-三十五烷酮、二十六碳烯等11种共同成分，但这些成分在两者中含量有所相同，如棕榈酸在苦木皮中含量达到12.47%，但苦木叶中只有2.73%，石竹素在苦木的叶中含有5.45%，但是在苦木皮中仅含有0.88%。在实验中受到实验条件的影响，例如水蒸气蒸馏中，损失了部分的产品，这也可能影响实验结果;在产品的保存过程中也会对实验数据有一定影响。

总之，一直以来，苦木化学成分的研究主要集中在苦木茎和枝等方面，故对其叶和皮不同的挥发性成分分析，为苦木的相关研究提供了有力的空间和研究思路，为扩大药源研究，进一步开发利用苦木药用资源提供了一定的研究基础和参考。

参考文献

[1]中科院《中国植物志》编辑委员会. 中国植物志[M]. 北京： 科学出版社， 1997， 43（3）： 7-8.

[2]国家药典委员会. 中华人民共和国药典（一部）[S].北京： 中国医药科技出版社， 2015： 200.

[3]赵文娜， 张新新， 谢人明. 苦木化学成分和药理作用研究进展[J]. 中药材， 2011， 34（7）： 1149-1152.

[4]祝晨蔯， 邓贵华， 林朝展. 苦木化学成分研究[J]. 天然产物研究与开发， 2010（24）： 476-478.

[5]陈猛， 范华英， 戴胜军. 苦木生物碱的化学研究[J]. 中草药， 2007， 38（6）： 807-810.

[6]谷华， 王梅， 王志阳. 苦木的现代药理与临床应用[J]. 中医研究， 2001 （5）： 55-56.

[7]Liu C， Cheng R R， Han Z Z， et al. A new ionone derivative from the leaves of picrasma quassioides[J]. J Asian Nat Prod Res， 2019， 21（7）： 652-658.

[8]Liu C， Cheng R R， Yang L， et al. Inhibition of CYP450 enzymes by quassinoids from Picrasma quassioides leaves[J]. Phytochem Lett， 2019（30）：138-142.

[9]何永辉， 刘佳佳， 杨栋梁. GC/MS测定马尾松树皮中的挥发油成分[J]. 广东化工， 2007， 34（2）： 62-67.

[10]国家药典委员会. 中华人民共和国药典（四部）[S]. 北京： 中国医药科技出版社， 2015： 203.

（收稿日期：2019-06-24 编辑：刘 斌）