肝细胞肝癌患者血清microRNA-224水平变化观察

沈张平 季沈杰（通讯作者）

（启东市人民医院检验科 江苏 启东 226200）

我国是肝癌的高发国家，近年来发病率呈上升趋势。启东的肝癌发病也居高不下，根据流行病分析，主要为乙肝病毒等因素导致。由于肝癌早期诊断困难，临床发现时多为中晚期，错过了最佳的治疗时机。为此，如何更好地提高肝细胞肝癌的诊断效率，为肝癌防治提供充足的时间，是肝细胞肝癌诊断治疗的重要研究方向。本文以院2017年1月—2018年12月收治的20例肝细胞肿瘤患者作为研究对象，现将研究结果作如下具体阐述。

1.资料与方法

1.1 一般资料

本文研究资料来源于我院2017年1月—2018年12月收治的20例肝细胞癌患者。其中，男14例，女6例，年龄38～76岁，平均年龄（51.2±7.6）岁。患者经术后病理检查确诊为肝细胞癌。将这20例患者作为HCC组。为研究所需，选择20例健康人群作为对比研究对象，作为NC组。其中男16例，女4例。两组患者在年龄、性别等方面无显著差异。

1.2 检测方法

（1）血清标本采集。患者入院后，保持一天空腹状态下抽取静脉血3ml，并进行血浆分离，保存至-80℃冰箱之中；（2）RNA提取。提取过程主要包括组织miRNA提取和血浆总RNA提取；（3）miRNA逆转录和荧光定量PCR。吸取5μl总RNA按照miRcute miRNA cDNA第一链合成试剂盒说明书步骤进行miRNA逆转录。qRT-PCR选用miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒，进行miRNA定量检测。

1.3 统计学方法

2.结果

2.1 microR-224在NC组和HCC组患者血清的表达量比较

HCC组患者的microR-224的表达量明显高于NC组患者。经组间比较，差异具有统计学意义（P＜0.01），见表1。

表1 miRNA在NC组和HCC组患者血清的表达量比较（±s）

表1 miRNA在NC组和HCC组患者血清的表达量比较（±s）

组别nmicroRNA-224 NC组201.00±0.24 HCC组203.65±1.04 P-＜0.01

2.2 HCC患者临床病理特征与microRNA表达量的关系

HCC患者的临床病理特征与microRNA表达量的关系具体表现为：microRNA表达量与AFP呈正相关，即P＜0.05；microRNA表达量与肿瘤大小、TNM分期无相关性，即P＞0.05，见表2。

表2 HCC患者临床病理特征与microRNA表达量的关系（±s）

表2 HCC患者临床病理特征与microRNA表达量的关系（±s）

临床病理特征nmicroRNA-224P肿瘤大小（cm）≤3123.54±0.72＞0.05＞383.78±0.24 AFP（ng/ml）≤20142.18±0.61＜0.05＞2064.35±0.83 TNM分期Ⅰ～Ⅱ93.18±0.84＞0.05Ⅲ～Ⅳ113.92±0.23

2.3 microRNA表达对HCC诊断的敏感性及特异性

经工作特征曲线分析发现，microRNA最佳的表达量为3.25，灵敏度、特异度分别为82.2%和92.8%；AUC为0.935。

3.讨论

肝癌是常见的恶性肿瘤，早期诊断困难，患者往往发现时已是中晚期，错过了最佳治疗时机。在对HCC病例的临床研究中发现，microRNA-224在肝细胞肝癌的表达中，表现出较高的特异性和灵敏性，对于肝细胞肝癌的诊断提供了重要的判断依据。由于microRNA结构、系列及表达方式的多样化，这就导致不同肿瘤的microRNA表达具有差异性，这就为microRNA应用于肝细胞肝癌的诊断提供了新的判断依据。

本文数据显示，肝癌患者（HCC）的microR-224的表达量显著更高于健康人群（NC）（P＜0.05）。这说明，通过microR-224的表达量可以为肝细胞肝癌的诊断提供一定判断依据。在进一步研究中得出，HCC患者microRNA表达量与AFP呈正相关（P＜0.05），而与肿瘤大小、TNM分期无相关性（P＜0.05）。这说明，microRNA表达量只是提示肝癌的存在，对于肝癌的大小及TNM分期无判断意义。在microRNA表达对HCC诊断的敏感性及特异性的分析中，microRNA最佳的表达量为3.25，灵敏度、特异度分别为82.2%和92.8%；AUC为0.935。这说明，HCC患者microRNA表达的特异性高，在临床诊断中具有重要价值。

综上所述，肝细胞肝癌患者血清microRNA-224表达特异性、灵敏度高，可作为肝细胞肝癌的诊断依据。