标本溶血对葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的影响

陈启华 曹冰 赵洋

作者单位：100843 北京，中国人民解放军空军司令部门诊部检验科

临床实际工作中经常遇到静脉血标本送检时已溶血或因操作过程中标本处置不当导致溶血的现象，一般情况下会建议临床重新采血，但对于不配合的儿童或某些特殊患者，重新抽血的难度较大，因此实际工作中有时也会使用不合格的溶血标本进行某些生化项目的检测。血糖（blood glucose，Glu）测定作为血液生化检查的常见检测项目，是许多疾病临床必查项目之一［1］，而标本溶血则会对Glu 检测结果的准确性产生一定影响。本研究探讨采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（glucose oxidase peroxide enzyme，GOD-POD 法）测定Glu 时标本溶血对测定结果的影响及干扰机制，更好地指导临床工作，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 采集本院门诊部同一天就诊的30 例成年患者的空腹静脉血，排除乳糜、黄疸等血清标本。

1.2 仪器与试剂 Glu 测定使用北京首医临床医学科技有限公司提供的Glu 检测试剂盒（批号：20190702），有效期至2021 年1 月1 日，方法采用卫生部临检中心推荐的GOD-POD 法，使用东芝TBA-40FR 全自动生化分析仪；血红蛋白（hemoglobin，Hb）测定使用希森美康XS-800i 全血细胞分析仪，试剂均为仪器原装配套产品；一次性真空分离胶采血管由湖南浏阳市三力医用科技发展有限公司提供，有效期至2020 年11 月30 日。

1.3 检测方法 于7：30—8：30 使用一次性真空分离胶采血管采集门诊患者空腹静脉血，每个患者采集2 管，每管各3 mL，分别编号A 管、B 管。使A 管血液自然凝固作为非溶血组标本；用力震荡B 管血液，人为造成标本溶血，使用全血细胞分析仪检测Hb，确定其血清中Hb 测定浓度为1～4 g/L作为溶血组标本。将全部样本分离血清，采用GOD-POD 法检测60 份标本的Glu 值，每份样本重复检测5 次，取平均值进行对比。

1.4 统计学方法 应用SPSS 17.0 统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

溶血组Glu 测定值明显低于非溶血组（P＜0.05），说明标本溶血后血清Glu 测定值明显降低。见表1。

表1 两组血液标本的Glu 测定值比较（）

表1 两组血液标本的Glu 测定值比较（）

3 讨论

GOD-POD 法作为卫生部临检中心Glu 测定的推荐方法［2］，其可靠性已得到临床广泛认可，准确度和精密度也能满足临床要求，但由于该方法POD 的特异性不够高，干扰过氧化反应的物质可使Glu 测定值出现较大偏差。

本研究显示，溶血标本Glu 测定值较非溶血标本明显降低，与相关文献报道结果一致［3-5］，说明标本溶血后红细胞释放的物质可干扰Glu 测定，使Glu 测定值的准确性和可靠性出现较大偏差，不利于临床医师对疾病的诊断和治疗。

有研究表明，标本溶血致Glu 测定值偏低有许多方面原因，包括：①红细胞内外葡萄糖浓度差异引起。由于红细胞的自由水含量少于血液中自由水含量，故红细胞中所溶解的葡萄糖少于血清，红细胞内的葡萄糖浓度低于血清葡萄糖浓度，红细胞破坏时血清葡萄糖浓度被稀释，使得Glu 测定值偏低。② 红细胞破裂后释放的Hb 可抑制呈色反应（通过与H2O2竞争色素原受体），干扰正常Glu 测定，产生较大误差，尤其是终点法影响更大［6-7］。杨建平等［8］认为，正常红细胞的葡萄糖代谢路径中含有还原型辅酶Ⅰ（NADH）和还原型辅酶Ⅱ（NADPH），红细胞破裂后上述两种还原性物质释放入血清，干扰Glu 测定，使得Glu 测定值偏低。根据GODPOD 法Glu 测定原理，我们认为标本溶血后血清被稀释以及红细胞破裂后释放的还原性辅酶中和了反应过程中部分中间产物H2O2，使得反应的最终产物醌式染料的浓度降低，两方面影响因素综合导致Glu 测定值偏低。

综上所述，采用GOD-POD 法进行Glu 测定时，标本溶血会使检测结果明显偏低。临床工作者在日常工作中应规范管理标本的采集、运送、分离和检测过程，发现标本溶血后应主动联系临床重新采血，若条件不允许，应在报告上注明标本存在的瑕疵，以便临床医师恰当评估报告价值。