I群4型禽腺病毒卵黄抗体接种鸡后在体内消长规律的研究

腺病毒是全球家禽和野禽常见的传染病原之一。多数腺病毒可在健康禽体内存在并复制，不表现临床症状或临床症状非常轻微，但可成为混合感染时的条件性病原；腺病毒有时也可作为原发性病原，引起禽类的多种病症。

腺病毒可分为A、B、C、D、E5个种12个血清型，我国主要流行A、B、C三种基因型，共6个血清型（火鸡1型、1型、4型、5型、8a/b型），但是近期在豫南、皖北、苏北、鲁西北和胶东地区流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/b型，造成鸡群的死亡率较高，发病急，有蔓延的趋势。安卡拉病（心包积水-肝炎综合征 ）就是由Ⅰ群腺病毒、血清4型引起来的。该病多发于肉鸡，近期也开始感染817和麻鸡，以及产蛋鸡的育成鸡，并且育成鸡发病死亡率还非常高。Ⅰ群禽腺病毒的12个血清型交叉保护性较差，所以在防控上必须选用与流行株匹配的疫苗株和卵黄抗体才能有效遏制疫情的蔓延。

由于目前对I群4型禽腺病毒卵黄抗体在本动物体内的代谢规律还缺少系统研究，影响了该卵黄抗体在临床上的正确使用。为此，本研究采用I群4型禽腺病毒卵黄抗体注射SPF鸡，并监测鸡注射抗体后不同时间点的血清抗体阳性转换率，通过研究抗体在动物体内的代谢规律，以期为正确使用I群4型禽腺病毒卵黄抗体防治心包积水-肝炎综合征提供理论依据。

一、材料

1.I群4型禽腺病毒卵黄抗体：批号201701、201702、201703，琼扩效价均不低于1 ∶4，由哈药集团生物疫苗有限公司制备。

2.I群4型禽腺病毒检验用强毒：批号FAV-HYQS-03-2，病毒含量107.38TCID50/0.1mL，规格为2.0mL/瓶，由哈药集团生物疫苗有限公司制备、鉴定、保管和供应。

3.I群4型禽腺病毒琼扩抗原：批号FAV-HY-K-01，效价不低于1 ∶2，规格为2.0mL/瓶，由哈药集团生物疫苗有限公司制备、鉴定、保管和供应。

4.I群4型禽腺病毒阳性血清：批号FAV-HY-Y-01，效价不低于1 ∶64，规格为2.0mL/瓶，由哈药集团生物疫苗有限公司制备、鉴定、保管和供应。

5.I群4型禽腺病毒阴性血清：批号HY-Y-01，规格为2.0mL/瓶，由哈药集团生物疫苗有限公司制备、鉴定、保管和供应。

6.SPF鸡：21和42日龄，由哈药集团生物疫苗有限公司五常SPF鸡场提供。

二、方法

1.血清抗体阳性转化标准的确定。取实验室试制的201501批抗体肌肉注射21日和42日龄SPF鸡各80只，每只1.0mL。在抗体注射后16、24、48、72、96、120、144和168h，分别从抗体试验组鸡中随机抽取10只，分别采血、分离血清。采用琼扩试验（见规程附注2）进行I群4型禽腺病毒抗体效价测定，并将采血后的鸡肌肉注射I群4型禽腺病毒强毒，每只0.1mL（含106.0TCID50）；同时每个时间点取同批次同日龄SPF鸡各10只，不注射抗体，作为攻毒对照鸡；另选取10只SPF鸡作为健康对照。

2.抗体注射鸡体内消长规律试验。每批抗体肌肉注射21日和42日龄SPF鸡各90只，每只1.0ml；取同批次同日龄SPF鸡各10只，不注射任何药品作为健康对照。在抗体注射后16、24、48、72、96、120、144、168和192h，分别从抗体试验组鸡中随机抽取10只，分别采血、分离血清。采用琼扩试验（见规程附注2）进行I群4型禽腺病毒抗体效价测定。共计进行3批抗体试验。

三、结果

1.血清抗体阳性转化标准的确定结果（见表1～2）

从表1～2结果可以看出，卵黄抗体注射的21日和42日龄SPF鸡，在注射后16～168h，血清中I群4型禽腺病毒抗体效价为1 ∶1～1 ∶4，当血清抗体琼扩效价不低于1 ∶2时，能保护鸡抵御I群4型禽腺病毒强毒的攻击。各抽检时间点攻毒对照组鸡均90%～100%发病，剖检试验鸡，死亡和发病鸡均呈典型的心包积液及肝脏肿大和坏死的病理变化。健康对照组血清在试验过程中I群4型禽腺病毒抗体效价均为0，且全部健活。

表1 抗体注射21日龄鸡血清中I群4型禽腺病毒抗体阳性转化标准的确定结果

表2 抗体注射42日龄鸡血清中I群4型禽腺病毒抗体阳性转化标准的确定结果

2.抗体注射鸡体内消长规律试验（见表3～4）

从表3结果可以看出，卵黄抗体注射的21日龄SPF鸡，在注射后16h血清中I群4型禽腺病毒抗体血清阳转率为60%，24～144h血清阳转率为90%～100%，168～192h血清阳转率为60%～80%；健康对照组血清在试验过程中I群4型禽腺病毒抗体效价均为0。

表3 抗体注射21日龄鸡不同时间血清中I群4型禽腺病毒抗体效价及阳转率测定结果

表4 抗体注射42日龄鸡不同时间血清中I群4型禽腺病毒抗体效价及阳转率测定结果

（续表）

从表4结果可以看出，卵黄抗体注射的42日龄SPF鸡，在注射后16h血清中I群4型禽腺病毒抗体血清阳转率为50%～60%，24～144h血清阳转率为90%～100%，168～192h血清阳转率为60%～80%；健康对照组血清在试验过程中I群4型禽腺病毒抗体效价均为0。

综上表1～4试验结果可以看出，21日龄和42日龄鸡注射抗体后，I群4型禽腺病毒血清抗体均为不低于1:2时，对鸡具有保护作用，即血清抗体阳性转化标准应确定为血清抗体效价不低于1:2。

四、结论

1.抗体注射鸡后，当血清抗体的琼扩效价不低于1:2时，抗体对鸡具有较好的保护效果，可作为血清抗体阳性转化的抗体效价临界值。

2.卵黄抗体注射SPF鸡，24h后可循环全身达到峰值，并稳定在峰值持续一段时间至120h，其间血清I群4型禽腺病毒抗体阳性转化率为100%；注射后144～168h血清抗体效价下降，但仍然维持在一定水平，血清I群4型禽腺病毒抗体阳性转化率为80%～90%，192h血清I群4型禽腺病毒抗体阳性转化率为60%～80%。

3.由抗体的消长规律得出，卵黄抗体的有效保护时间为6d，但为保证卵黄抗体的临床使用效果，将抗体的被动免疫保护期确定为5d。