GRP78、CHOP和 Beclin-1与持续性房颤患者左心耳的关系

刘金鹏，张二伟,张格庆,白梦媛,费 瑜

(吉林大学第二医院 心内科,吉林 长春130041)

左心耳(LAA)是从左心房起始的指状延伸，具有缓解心房压力和分泌心房肽等作用[1,2]。有研究显示，复杂的LAA结构和功能与持续性房颤(PeAF)病理过程有关[3-6]，但也有不同的报道[7]，为此，本文对PeAF患者LAA结构功能进行检测，并探讨GRP78、 CHOP和 Beclin-1与LAA结构和功能关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象

依据《心房颤动:目前的认识和治疗的建议-2018》[8]和《赫尔辛基宣言》，选择2017年1月-2018年4月我院行食道超声心动图(TEE)的阵发性AF(PAF)和PeAF患者，前者27例，男15例，女12例，年龄63.56±11.29岁，后者18例，男12例，女6例，年龄69.72±10.59岁。两组患者经询问病史、体格检查、有关实验室、常规心电图及心脏超声等检查后比较一般资料，结果具有可比性。恶性肿瘤，内分泌性及自身免疫性疾病，严重的心、肝、肾功能不全，感染性疾病，肺纤维化，急性心梗，心肌病，风心病，严重高血压未控制(血压≥160/100 mmHg)，近期(1个月内)重大手术史等均排除本研究范围之外。

1.2 实验方法

用彩色多普勒超声仪(Philips iE33，荷兰)在LAA的长轴切面测量如下指标。

1.2.1LAA的形态结构 在LAA最大舒张状态时：①测量左心房与 LAA壁交界点至LAA与左上肺静脉交界点的距离，即LAA开口的宽度(LAAW)；②测量LAAW中点至LAA颈部的距离，即LAA长度(LAAL)。

1.2.2LAA的功能 将取样线与LAA长轴角度调到最小，在AF节律下使用脉冲多普勒：①测量LAA血流频谱中的最大正向流速，即LAA排空速度(LAA-EV);②测量LAA血流频谱中的最大负向流速，即LAA充盈速度(LAA-FV)。

1.2.3采集所有患者肘静脉血，将5 ml的血液以3 000 r/min 离心，10 min后收取上清，-80℃保存待测。葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和 Beclin-1 的水平采用ELISA检测。试剂盒购于塔尔德生物技术有限公司。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 PeAF患者血浆GRP78、 CHOP和Beclin-1水平与左心耳结构功能的变化

与PAF组比较，PeAF组血浆 GRP78、CHOP 和 Beclin-1 的水平以及LAAW、LAAL均明显升高，而LAA-EV、LAA-FV均明显降低(P<0.05)(见表1)。

表1 PeAF患者血浆GRP78、CHOP和Beclin-1水平与左心耳结构功能的变化

*P<0.05，与 PAF组相比

2.2 相关分析

LAAW和LAAL分别与血浆GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明显正相关(r=0.571，r=0.592；r=0.498，r=0.439；r=0.419，r=0.500，均P<0.05)；LAA-EV和LAA-FV分别与血浆GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明显负相关(r=-0.599，r=-0.480；r=-0.421，r=-0.438；r=-0.487，r=-0.526，均P<0.05)。

3 讨论

近年研究发现,LAA口部主要是由富含弹性纤维的胶原层组成，其内有少量散杂的心肌细胞，但没有血管成分。它是多条优势传导通路如Bachmann束、Marshal韧带等交汇处,成为潜在的折返性心律失常的关键传导区，因此它是房性心律失常产生和维持的重要部位[9]。有研究发现 PeAF患者LAAW明显大于PAF患者，舒张期 LAA-EV明显小于非PeAF患者[3,4]。还有研究发现,随着AF病程的延长，心房与心室也会发生相应变化，如左心房内径、左心室内径、 LAAW、 LAAL增大，左心室射血分数、LAA-EF、LAA-EV、LAA-FV降低等[5]。本研究结果与文献报道大致相符，进一步证明PeAF患者存在LAA结构和功能异常。

以往的研究显示AF心房肌组织和心耳组织中有GRP78、CHOP、 GRP94和Beclin-1表达，它们与心房内径增大呈正相关[10-12]，但近年来有关PeAF与LAA形态结构和功能的关系越来越受到人们重视。Kishima H回顾性研究了225名患者(PeAF76例，PAF70例，对照组79例)，并用超声心动图和计算机断层扫描研究LAA形态与其重塑的关系，结果发现PeAF的发生与非鸡翼型LAA的高发病率相关，它的重塑可导致LAA形态学改变[13]。本研究发现PeAF患者血浆 GRP78、CHOP 和 Beclin-1的水平升高，且与LAAW、LAAL、LAA-EV和LAA-FV密切相关，提示GRP78、CHOP 和 Beclin-1影响了PeAF 患者LAA结构和功能。GRP78和CHOP是一种与内质网膜上启动未折叠蛋白反应跨膜蛋白相结合的结合蛋白，在内质网应激时，它们与跨膜蛋白分离，并启动未折叠蛋白反应，同时激活一系列细胞凋亡信号途径，导致细胞凋亡，因而它是内质网应激的标志性蛋白。Beclin-1是细胞发生自噬的一种关键蛋白，作为一种调控自噬和凋亡之间平衡的重要连接分子，它的升高不仅预示细胞发生自噬，而且预示着细胞凋亡发生。PeAF患者发生的内质网应激在引起心房细胞凋亡的同时，可诱导细胞自噬，这种自噬是一种适应性反应，对维持基本的细胞代谢中起着重要作用，当严重的内质网应激不能被自噬所逆转，过度自噬将再一次启动细胞凋亡途径，加重心房细胞凋亡，这种内质网应激和自噬相互影响相互作用，改变了PeAF患者LAA 结构，并影响了它的功能，而功能改变可促进结构重构，结果导致PeAF的发生和持续。

引起PeAF患者内质网应激和自噬变化的确切因素还不十分清楚，结合文献我们推测可能是与下列因素有关：①LAA解剖特点和血流动力学引起LAA压力过高，当LAA入口明显增宽,并呈球形或半球形改变不能缓解压力时，过高的压力迫使心房细胞能量代谢障碍和钙超载，它们可以引起内质网应激[14]，进而诱发自噬。②过高压力可刺激LAA压力感受器，促进神经内分泌物质释放，如利钠肽，肾素血管紧张素系统等，它们可引起内质网应激[6,11,15]，进而诱发自噬。③LAA压力过高可使机体发生氧化应激[16]和炎症反应，进而激活内质网应激，造成LAA组织损伤，同时诱导机体发生自噬。

综上所述，本研究进一步证明了LAA结构功能异常与PeAF有关，发现内质网应激和自噬是LAA结构功能改变的原因之一。但本研究还存在收集的病例数较少以及未对内质网应激和自噬导致PeAF患者LAA结构功能改变的具体信号通路进行研究的不足。因此，相关内容有待于进一步深入研究。