气相色谱法测定间硝基苯甲醛中的有关物质

2019-09-25刘云峰李海岛徐飞鹏

山东化工 2019年17期

刘云峰，李海岛，李正，徐飞鹏，蔡芳

(江苏吉贝尔药业股份有限公司，江苏镇江 212009)

尼群地平为二氢吡啶类药物，化学名为2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-1,4-二氢-3,5-吡啶二甲酸甲酯乙酯，为钙通道阻滞剂，临床上主治原发性高血压、继发性高血压及冠心病。其合成路线为两步合成反应，起始原料以间硝基苯甲醛与乙酰乙酸乙酯进行Knoevenagel缩合反应得中间体A，中间体A与β-氨基巴豆酸甲酯进行分子内环合反应得到尼群地平产品[1]。起始物料的质量好坏直接关系到最终产品的纯度，由于间硝基苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛属于同分异构体，间硝基苯甲醛合成过程中可能带入少量的苯甲醛或多硝基苯甲醛，为控制起始物料间硝基苯甲醛的质量，我们参考相关文献[2-4]，采用GC法控制间硝基苯甲醛的有关物质，获得了较理想的效果。

1 仪器和试药

1.1 仪器

Agilent GC 7890A安捷伦气相色谱仪，FID检测器，Sartorius BP211D型电子天平。

1.2 试药

丙酮为稀释液，批号：20150917，分析纯，国药集团化学试剂有限公司。苯甲醛，批号：QB-642500， qcchemical；邻硝基苯甲醛，批号：PCL_#_Ni097， PCL；对硝基苯甲醛，批号：PCL_#_Ni098， PCL；3,5二硝基苯甲醛，批号：QC-B260400， qcchemical。间硝基苯甲醛，批号：20170305，20170306,20170307，武汉远成共创科技有限公司。

2 实验内容

2.1 色谱条件

以HP-1毛细管柱，25 m×0.32 mm×0.52 μm为色谱柱，FID检测器，起始柱温120℃，维持14 min，以每分钟60℃的速率升温至180℃，维持6 min；检测器温度为240℃，进样口温度为240℃；载气为高纯氮气，流速约20 mL/min，分流比20∶1。

2.2 专属性试验

2.2.1 间硝基苯甲醛定位溶液的配制

取间硝基苯甲醛约12.5 mg，精密称定，至50 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 苯甲醛定位溶液的配制

取苯甲醛约12.5 mg，精密称定，至50 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 邻硝基苯甲醛定位溶液的配制

取邻硝基苯甲醛约12.5 mg，精密称定，至50 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.4 对硝基苯甲醛定位溶液的配制

取对硝基苯甲醛约12.5 mg，精密称定，至50 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.5 3,5-二硝基苯甲醛定位溶液的配制

取3,5-二硝基苯甲醛约12.5 mg，精密称定，至50 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.6 混合定位溶液的配制

精密吸取上述五种定位溶液各1 mL，至10 mL容量瓶内，用稀释液定容至刻度，摇匀，即得。

2.2.7 系统适用性溶液的配制

精密称取间硝基苯甲醛约0.5 g，精密吸取杂质母液储备液2.5 mL，置同一10 mL量瓶中，丙酮稀释至刻度，备用。

2.2.8 样品溶液的配制

精密称取间硝基苯甲醛约0.5 g，置10 mL量瓶中，丙酮稀释至刻度，备用。

2.2.9 专属性实验

按照方法建立系统适用性，分别注入空白溶剂、各已知物质定位溶液、混合定位溶液、样品溶液各进1针，空白溶剂见图1，各已知物质出峰顺序见图2，样品溶液见图3，各物质间分离度大于1.5，空白溶剂无干扰，专属性实验符合要求。

图1 空白溶剂

出峰顺序依次为苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、间硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛图2 各已知物质出峰顺序

图3 间硝基苯甲醛样品溶液

2.3 线性

间硝基苯甲醛、苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛在10～500 μg/mL范围内的线性方程分别为A=0.5129C-1.9130；A=0.7608C-0.4422；A=0.5308C-2.5812；A=0.5230C-2.4269；A=0.4881C-2.3307；相关系数(R2)分别为0.9997、0.9999、0.9998、0.9996、0.9990。苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛相对于间硝基苯甲醛的校正因子分别为0.67、0.97、0.98、1.05。

2.4 检测限和定量限

将线性中10 μg/mL的溶液继续用丙酮稀释，依法进样，按信噪比S/N=3计算，间硝基苯甲醛、苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛的检测限分别为5、3、5、5、5 ng；按信噪比S/N=10计算，间硝基苯甲醛、苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛的定量限分别为20、12、20、20、20 ng。

2.5 精密度试验

按方法配制间硝基苯甲醛样品溶液和0.1%自身对照品溶液，平行配置6份。同一批次平行配制6份样品溶液的色谱图中相关杂质的保留时间一致，检出杂质的个数、大小一致，总杂平均含量为0.17%，低于0.5%，6份样品总杂含量的RSD为2.6%，小于5.0%，精密度试验良好。

2.6 准确度

准确度在杂质限度溶液浓度的80%、100%、120%三个水平考察，每个浓度平行配制3份供试品溶液。苯甲醛回收率在101.44%～104.04%之间；邻硝基苯甲醛回收率在100.88%～107.07%之间；对硝基苯甲醛回收率在102.93%～109.92%之间；3，5-二硝基苯甲醛回收率在103.51%～108.86%之间。苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3，5-二硝基苯甲醛的9个回收率数据的RSD分别为1.06%、1.73%、1.82%、2.72%。

2.7 溶液的稳定性

用系统适用性溶液作为供试品溶液，在室温下分别于0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、18 h进样测定，考察各时间点杂质的增长情况。在18 h内，0.1% 已知杂质(苯甲醛、邻硝基苯甲醛、对硝基苯甲醛、3,5-二硝基苯甲醛)的7份溶液RSD分别为0.64%、0.67%、1.78%、2.03%，因此0.1% 已知杂质溶液在18 h内是稳定的。供试品溶液中，间硝基苯甲醛在18 h内未产生新杂质且主峰峰面积RSD为0.65%，表明供试品溶液在18 h内是稳定的。