干化学法与全自动血球仪检测血红蛋白的结果比较分析

2019-09-25李丹

质量安全与检验检测 2019年4期

李丹

（生一（苏州）生物科技有限公司江苏苏州 215000）

1 前言

血红蛋白偏低常与贫血或出血性疾病密切相关，血红蛋白浓度不合理上升会产生血细胞增多症。对儿童而言，不管是入园检测还是入学检测都是评估是否出现贫血的重要内容。常用的血红蛋白检测方式包括干化学法和全自动血球仪检测，但两种方式在数值评定上存在差异，严重制约后续诊疗[1]。本文对干化学法与全自动血球仪检测血红蛋白的结果进行了比较分析。

2 资料与方法

2.1 一般资料

选取生一（苏州）生物科技有限公司体检中心2016 年6 月—2018 年6 月进行体检50 名儿童作为研究对象，根据不同检测方式将研究对象分为观察组和对照组，每组25 名。对照组男性12 名，女性13 名，年龄6~12 岁，平均年龄（8.02+2.34）岁；观察组男性14 名，女性11 名，平均年龄7~14岁，年龄（9.05+1.23）岁。两组儿童身体状况良好，比较两组儿童年龄、性别等基本资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.2 方法

对照组采用干化学法测量，取儿童末梢血10 μL，将其放置在试纸中央，待试纸条加样区充满血液后，其在反应膜上扩散迅速，红细胞被溶解，将血红蛋白充分释放后转化为高铁血红蛋白。利用血红蛋白分析仪在525 nm 波长处检测反应终点的颜色值和血红蛋白浓度的反射系数进行计算。

观察组采用全自动血球仪测量，保证儿童手掌温暖，护理人员轻柔地按摩其无名指或中指指尖。首检部位应用医用酒精消毒，使用无菌纱布擦干，并充分消毒指尖。将采血针装好且扎针深度通过采血笔调整后，进行采样。当样本量为15 μL 时，采血量为最佳。此时将血滴于检测试条上的测试孔。将橡胶气囊套在采血管上。确认将检测试纸条从检测纸包装中拿出，且保证检测试纸无破损，将最后一滴血滴注在检测试纸上；加注样本采用移液枪进行。加注样本时避免测试孔与枪头接触，使用密封好的试纸条，将检测试纸条插入全自动血球仪托架上，试纸孔朝上，当正确插入检测试纸条后，使用全自动血球仪进行检测，检测仪会以灯闪烁为标示告知准备样本检测，需在120 s 缓冲时间内将血样滴入。使用全自动血球仪时，在检测试纸条插入后，将其放置在平稳的工作台上，禁止将血液直接黏附在血液分析仪上，仪器上必须一直插着检测试纸条，测试孔禁止用手指接触，血液不可过量滴加，检测试纸完全盖满即可，不允许在检测试纸上重复滴加血液，不可重复实验。

2.3 标准与指标

2.3.1 判断标准

分析比较两种检查血红蛋白浓度、红细胞指标浓度。

2.3.2 干化学法性能指标

（1）外观。检测试纸条应光洁无毛刺，正面的加样区应洁净无污点。

（2）物理性状。试纸条宽度：（15.0±0.5）mm。

（3）准确性。血红蛋白区间为40～100 g/L，绝对偏差不可超过10 g/L；血红蛋白区间为101～200 g/L，相对偏差不可超过10%；线性为40～200 g/L，相关系数r 值不可低于0.98。

（4）重复性。血红蛋白区间为40～100 g/L，检验结果的标准差（SD）不可超过8 g/L；血红蛋白区间为101～200 g/L，检测结果的变异系数（CV）不可超过8%。

（5）批间差。 3 批血红蛋白检测试纸条的批间差不可超过15%。

（6）稳定性。按说明书的储存条件储存，原包装存放的检测试纸条有效期为12 个月；取到效期后1 个月内的产品，检测结果应符合要求。

2.4 统计学处理

采用SPSS21.0 软件统计所有数据，计数资料采用均数±标准差（±s）表示，t 检验，计数资料用百分率（%）表示，χ2检验，P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

3 结果

全自动血球分析仪法检测血红蛋白浓度、红细胞压积结果明显优于干化学法测定结果，差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

表1 两种方式检测血红蛋白浓度、红细胞压积结果比较（±s）

注：t 为t 检验中成对样本的样本值；P 为χ2 检验中假设为真时的概率。

组别样本数血红蛋白浓度（g/L）红细胞压积（%）全自动血球分析仪干化学法25 25 t P 119.64+31.23 108.34+29.13 7.313＜0.05 38.23+8.32 30.23+3.21 9.032＜0.05

4 讨论

本次实验研究结果显示，全自动血球分析仪法检测血红蛋白浓度、红细胞压积结果明显优于干化学法测定结果，差异具有统计学意义（P＜0.05）。分析其结果可能是：（1）干化学法采集的末梢血可能未在试纸条中央，导致检查结果误差；同时计算公式难以精准测量，导致数值偏小[2]。（2）两种检测方式存在差异，干化学法是通过公式计算得出，而全自动血球分析仪是通过血红蛋白分析仪的光学检测头可自动检测膜上反射光的强度与血红蛋白浓度成反比得出。血红蛋白分析仪会在30 s 内计算并显示总血红蛋白的浓度并得出结果，因此，测量血红蛋白准确性更高。（3）血红蛋白分析仪进样为单通道，不适合大样本检测，血液采集后应立即检测，久置标本会影响实验结果。（4）相关研究显示，干化学法检测结果准确度较全自动血球分析仪低，可能是高血浆体渗透压引发的，高水平的血浆蛋白和血脂可能导致血红蛋白指标异常增高，而多项疾病影响的高白细胞血症可能造成检测结果偏差。