不同规格的河川沙塘鳢夏花生长及生理生化研究

迟美丽 贾永义 王雨辰

摘要：为深入了解不同規格河川沙塘鳢幼鱼的生长状态、减少沙塘鳢夏花在鱼虾混养池塘内种间和种内残食，通过在车间内建立模拟池塘的生态系统，测定了不同规格沙塘鳢夏花在养殖37 d后生长及生理生化指标的变化情况。结果表明，试验中沙塘鳢鱼苗总存活率为83%，中鱼组的体质量变异系数与其他2组相比增加明显。小鱼组的特定生长率最快，且小鱼组的超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性、雌二醇（E2）含量、睾酮（T）含量、生长激素（GH）含量和甲状腺激素（T4）含量都显著高于中鱼组和大鱼组。另外，小鱼组存在50%的小规格鱼不能很好地捕食青虾的现象。综合幼鱼存活率、生长状态和产量，建议初始放养时沙塘鳢体长在32 mm以上且沙塘鳢体质量/青虾体质量的平均值在2.6以上。

关键词：河川沙塘鳢;鱼虾混养;生长差异;氧化还原酶;激素

中图分类号： S965.199  文献标志码： A  文章编号：1002-1302（2019）07-0179-04

河川沙塘鳢（Odontobutis potamophila）隶属于鲈形目（Perciformes）沙塘鳢科（Odontobutidae）沙塘鳢属（Odontobutis），俗称土布鱼、虎头鲨、虎头呆子等，为淡水底栖巢穴产卵型肉食性鱼类，该鱼肉质细嫩、营养丰富，是深受广大消费者喜欢的名贵鱼类。但随生态环境的恶化和过度捕捞，天然资源量不断下降。因此，急须通过开展种质保存及选育技术研究来改善其资源衰退的现状。近年来，浙江省淡水水产研究所沙塘鳢团队与很多学者都开展了河川沙塘鳢的繁殖方法研究[1-3]，通过不断优化，该团队已攻克沙塘鳢大批量繁育过程中诸如孵化时间长、受精卵易发霉等瓶颈，每年可以为养殖户提供大量优质的沙塘鳢苗种。但在大规格苗种的池塘培育过程中发现，幼鱼存在自残率高、生长差异显著以及回捕率低等情况，进而影响了大规格夏花的产量。室内短期精细培育可以提高幼鱼期的存活率，但目前报道的沙塘鳢夏花主要培育方式为外塘大规模养殖[4-6]，未见有对其幼鱼进行室内较高密度养殖的报道。

已有学者对沙塘鳢的形态学和繁殖力、不同群体多样性以及早期发育学等领域进行过研究[7-9]，但很少研究鱼体内氧化还原酶、繁殖相关激素以及生长相关激素含量的综合变化。另外，沙塘鳢和青虾套养是当前沙塘鳢的主要养殖模式，效益较高[10]，但是放养时沙塘鳢夏花和青虾的规格、放养时间、放养密度都没有明确的标准，导致沙塘鳢和青虾种间和种内的残食现象明显。因此，本研究的目的是通过在车间内建立模拟池塘的生态系统，深入了解池塘内沙塘鳢幼鱼的生长状态，通过氧化还原酶、繁殖相关激素以及生长相关激素含量的变化，从而对放养时沙塘鳢夏花和青虾的规格进行控制，减少沙塘鳢和青虾种间和种内的残食，为池塘放养提供参考，进而提高综合养殖效益。

1 材料与方法

1.1 试验条件

试验于2016年8月23日至9月28日进行，养殖时间 37 d。在浙江省淡水水产研究所综合试验基地的车间内玻璃钢养殖池内开展试验，养殖池规格为190 cm×160 cm×100 cm，配备有充氧和给排水系统，养殖用水为多次净化的池塘水，溶解氧含量>6 mg/L，氨氮<0.1 mg/L，亚硝态氮<0.01 mg/L，pH值在7～8之间。

1.2 沙塘鳢幼鱼放养

2016年8月12日，从夏花培育池塘内选择体质健壮沙塘鳢幼鱼500尾左右，经过10 d的暂养后，于8月23日逐一进行体长和体质量的测量，根据幼鱼体长分为3组，分别为大鱼组（体长35～45 mm）、中鱼组（体长30～35 mm）和小鱼组（体长25～30 mm），每组设置2个平行。在保证单位水体内体质量一致（22.2±1.48） g/m3的前提下，选取了30尾大鱼苗（体长平均41 mm，体质量平均1.62 g）、62尾中等鱼苗（体长平均32 mm，体质量平均0.75 g）和87尾小鱼苗（体长平均26.67 mm，体质量平均0.47 g）。水深保持在60 cm左右。

1.3 饵料虾的放养

于试验开始当日捕捞约1万尾小青虾（体长平均 25.17 mm，体质量平均为0.29 g）作为后备饵料虾，试验开始时分别投喂200 g的小青虾于每个养殖池内，在试验结束后每个养殖池内测量20尾虾的体长、头胸甲长和体质量，以了解饵料虾在试验阶段的生长状态。

1.4 模拟池塘生态的建立

在养殖池内加入过滤的池塘水后，加入富含小球藻和轮虫的藻液，由于沙塘鳢和青虾白天均喜欢在阴暗处活动，因此在水面上种植水花生、水浮莲和浮萍等水生植物，另外每个池子内放入10个长24.0 cm、直径9.5 cm的圆柱状塑料管，作为沙塘鳢的栖息场所。

1.5 饲养管理和采样

每日观察虾的数量和状态，保证沙塘鳢有足够的饵料供应。每天捞出多余的浮萍，使水面覆盖面积在50%～60%。为合理控制水质，每2 d投喂青虾饲料1次，每周检测水质1次，每3 d换水1/3并进行吸污处理。养殖37 d后采样，测量所有鱼的体长、体质量，计算特定生长率SGR[SGR=100%×（lnm末-lnm初）/t（养殖天数）]和变异系数[CV=（标准差/平均值）×100%]，每组采集6尾幼鱼用于生理生化指标检测。

1.6 生理生化指标的测定

准确称取全鱼组织质量后，按质量（g） ∶ 体积（mL）=1 ∶ 9 的比例加入9倍的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2 500 r/min，离心10 min，取上清液进行后续分析。采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定每个样品超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性、睾酮（T）含量、雌二醇（E2）含量、生长激素（GH）含量和甲状腺素（T4）的含量。

1.7 数据统计与分析

采用SPSS 13.0软件中的A-NOVA对所获得的数据集进行方差分析，采用Duncans法进行多重比较，数据采用“平均值±标准差”表示，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 总体生长情况分析

试验开始，投入的沙塘鳢358尾，总质量为243 g，平均体质量0.71 g，平均体长30.81 mm，试验结束时共298尾鱼，总质量为957.02 g，平均体质量为3.21 g，平均体长为 48.23 mm。总存活率为83%，其中大鱼组、中鱼组和小鱼组的存活率分别为80%、87.1%和81.6%。总体的特定生长率为4.07%，其中大鱼组、中鱼组和小鱼组的特定生长率分别为3.72%、3.71%、4.78%。由表1可知，试验开始时大鱼组体长和体质量的变异系数均大于其他2组，试验结束时各个组的体长和体质量的变异系数都有所增加，但中鱼组的体质量变异系数增加幅度明显高于其他2组，达87.6%。

2.2 不同规格沙塘鳢的生长情况对比

养殖试验后，每个试验组中都出现了明显的生长差异，即大、中、小个体分化明显，为了更好地分析结果，将最终体长划分为55 mm鱼的以上、 35～55 mm和35 mm以下进行分析。研究发现，在大鱼组中大部分的鱼（62.5%）体长为55 mm以上，仅有37.5%的鱼仍处于35～55 mm范围内，其平均体长已经达到了50 mm左右。虽然体长相差不大，但体长55 mm以上鱼的体质量却是35～55 mm鱼的2.5倍。中鱼组中体长 35～55 mm 范围内鱼所占比例较大（46.3%），而55 mm以上和 35 mm 以下鱼所占比例相差不大，但是体长 55 mm 以上鱼是35～55、35 mm以下体质量的2.8、11.1倍。在小鱼组中，55 mm以上鱼所占比例最大（43.1%），体长55 mm以上鱼的体质量是35～55 mm的2.3倍、35 mm以下鱼体质量的7.4倍。值得注意的是，小鱼组中35 mm以下鱼平均体长和体质量都比中鱼组大（表2）。

2.3 饵料虾生长状态统计

试验期间共投入青虾1 500 g，试验结束后剩余青虾 760 g，试验期间青虾生长状态也发生了变化。试验前后的平均体长和平均头胸甲长差别不大，但试验后青虾的各项变异系数明显增加，尤其是体质量的变异系数，达到了83.3%（表3）。

2.4 不同规格的河川沙塘鳢氧化还原酶活性的比较

不同规格沙塘鳢的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性之间存在明显差异，小鱼组的SOD活性显著高于大鱼组和中鱼组（P<0.05），而中鱼组与大鱼组之间差异不显著。GSH-PX的活性变化规律与SOD一致（图1）。

2.5 不同规格的河川沙塘鳢繁殖相关激素含量的比较

3组不同规格的河川沙塘鳢在经过37 d的养殖试验后发现，雌二醇和睾酮的含量都是随着鱼体的增大而逐渐降低，其中小鱼组的雌二醇和睾酮含量都与中鱼组和大鱼组相比显著提高（P<0.05），而这2种激素含量在大鱼组和中鱼组之间无显著差异（图2）。

2.6 不同规格的河川沙塘鳢生长相关激素含量的比较

3组鱼的生长激素和甲状腺激素的含量随体质量增大逐渐降低，生长激素含量显著高于大鱼组和中鱼组（P<0.05），小鱼组生长激素含量较大鱼组增加171%，较中鱼组增加65%。甲状腺激素含量与生长激素含量变化基本一致，小鱼组甲状腺激素较大鱼组增加48%，较中鱼组增加29%（图3）。

3 讨论

河川沙塘鳢夏花在22.2 g/m3较高的养殖密度下，水质能够长时间保持清新，表明室内模拟池塘的生态养殖方式具有一定的净化能力。试验中发现，保证其饵料虾充足的情况下仍然存在残食现象，表现在整体存活率为83%左右，其中中鱼组的成活率（87.0%）较大鱼组（80.0%）和小鱼组（81.6%）高，可能是由于大鱼组总数比中鱼组少且小鱼组中的小鱼易被养殖池内的大个体鱼虾捕食。特定生长率结果显示，小鱼组的特定生长率4.78%，分别比大鱼组和中鱼组高出28.00%和29.00%，表明小鱼组有更大的生长潜力。

超氧化物歧化酶活性主要反映机体清除氧自由基的能力，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）能将脂质过氧化物还原减少脂类被氧化的机会[11]，两者都是鱼体抗氧化系统的重要组成部分。笔者发现，小鱼组SOD和GSH-PX的活性都显著高于大鱼组，推测其可能是小规格的幼鱼具有更高的抗氧化能力。而生长相关激素和繁殖相关激素的含量也都与特定生长率一致，即小鱼组明显高于其他2组，表现出较大的生长和发育优势。

投喂青虾大小不合适会造成小个体沙塘鳢长期处于饥饿状态，肥满度低。笔者观察发现，大鱼组中的沙塘鳢能很好地捕食青虾，肥满度都在2.3以上，而中鱼组中约1/4和小鱼组中约1/2的体长较小的鱼不能很好地捕食青虾，常缓慢游动于水面上层或趴在养殖池壁上来逃避大规格鱼虾的捕食，这个结果与肥满度系数较低相吻合，后续对它们进行精细饲养（投喂更小規格的青虾），也都不能改善它们的状态，推测在饵料不充足或野外状态下，这部分鱼将会被更大的鱼虾所捕食，从而降低了夏花培育期间的存活率。

变异系数能够反映数据离散程度，对于研究沙塘鳢和青虾这种存在种内相互残食现象的生物有很重要的意义[12]。在本试验中发现，中鱼组体长和体质量的变异系数在试验开始前为最低，而在试验结束后变为最高，尤其是体质量的离散度达到了87.6%，这种情况可能是由于中鱼组中存在很大比例（25.0%）35 mm以下的鱼，而小鱼组这种现象不如中鱼组明显，可能是因为早期小鱼组的鱼普遍都较小，各个鱼之间的影响较小，前期有较好的生长空间。另外，试验后青虾的各项变异系数明显增加，尤其是体质量的变异系数达到了 83.3%，这是因为极大和极小个体所占比例较大所致，随着青虾的生长，导致35 mm以下的沙塘鳢的摄食情况受到限制，因此合理控制放养时青虾和沙塘鳢夏花的大小比例是减轻后期鱼虾种内残食的有效手段。