CMA辅助诊断超三倍体核型引起的自然流产

袁鹏辉 方卉 姜育燊

自然流产是指非人为目的造成的胚胎及其附属物脱离母体而终止妊娠。自然流产的病因十分复杂，在遗传因素引起的自然流产病例中，主要为染色体数目的异常，如三体、单体和多倍体等，少量为结构异常，如倒位、缺失和重复［1］。早期的流产检测方法主要为核型分析和荧光原位杂交（FISH）。核型分析分辨率低，只能检测＞5Mbp的染色体片段的改变，不能检测杂合性缺失（LOH）。由于需要细胞培养过程，容易被母体细胞污染，部分活性较差的细胞生长还可能会被抑制，核型分析无法得到准确的核型结果［2］。而FISH检测需要特定的荧光探针，只能对特定的染色体的已知位点进行检测，且一次只能检测单一位点，不适用于全基因组的筛查［3-4］。染色体微阵列分析（CMA）可以在全基因组内检测染色数目异常，结构异常（微缺失微重复）和杂合性缺失，也可以区分嵌合体，但不能不能检测染色体平衡易位（相互易位、罗伯逊易位、倒位等）。

1 病例

患者女性，39岁，高龄产妇，孕周8周，因胚胎停育行刮宫流产，临床主诉有反复不明原因流产史。采集患者流产绒毛组织，利用Affymetrix（昂飞）提供的CytoScan 750K芯片进行染色体微阵列分析检测。检测核型结果复杂，具体结果为71，XXY，+13，+22，即胚胎核型整体为三倍体，另外又增加一条13号染色体和一条22号染色体，如图1所示。

图1 全基因组概览图

2 讨论

自然流产是指孕周＜28周，胚胎重量＜1000g，非人为目的造成的胚胎及其附属物脱离母体而终止妊娠。据统计，自然流产的发生率为15%～40%，其中＞80%为发生在12周以内的早期流产［5］。自然流产的病因复杂，除了遗传因素以外，还包括子宫结构因素、内分泌因素、感染因素、环境因素、免疫因素等［1］。在自然流产病例中，胚胎染色体异常的检出率大约为60%，并且随着流产次数的增加，染色体异常的比例逐渐下降［1，6］。三倍体的发生率为1%～3%，胎儿很少能存活至出生［3］。超三倍体核型（hypertriploid），是指在三倍体基础上又增加一条或多条染色体，染色体条数在70（＞3×23）和80（＜3×23+1/2×23）之间的核型。三倍体病例中，约6%的病例为超三倍体核型。

本例首次在流产胚胎组织中报道此种超三倍体复杂核型71，XXY，+13，+22。三倍体危害较大，胎儿很少能存活至出生，少数存活的婴儿带有多个严重出生缺陷，常见缺陷包括：生长迟缓、先天性心脏缺陷、神经管缺陷，三倍体婴儿出生后常只能存活几天［7］。

13号染色体三体（T13）综合征，又称为帕陶综合征，是导致自然流产的三体综合征之一，13号染色体的胚胎活产率为33%［8］。存活至出生的患儿，在新生儿中所占的比例约为1/10000，13号染色体三体患儿的临床表型多样，有智力障碍、运动障碍、小头畸形、眼部结构性缺陷、脊髓缺陷、肌肉骨骼发育异常、泌尿生殖系统异常等［9］。

22号染色体三体（T22），是常见的引起自然流产的常染色体三体类型，22号染色体三体引起的流产占所有自然流产病例的3%～5%［10］。但是，存活至出生的22号染色体三体患儿却较为少见［11］。22号染色体三体患儿的临床表现为头小畸形、无耳廓、颈蹼、唇腭裂、指端发育不良等［11-12］。 超三倍体复杂核型71，XXY，+13，+22可以认为是在正三倍体69，XXY的基础上，又增加一条13号染色体和一条22号染色体，目前暂无该染色体异常类型引起的流产或者患儿病例的报道。

在本病例中，由于样本经过低温运输，难以进行细胞培养，且培养过程易受母体细胞污染，故而采用核型分析进行诊断的难度较大。而目前FISH常用的探针主要针对13号染色体、18号染色体、21号染色体、X染色体和Y染色体，不能准确诊断该样本，且需要多次实验，成本较高。而采用CMA方法，不需要细胞培养，一次实验，就能够获得样本最初全部的染色体结构和数目信息。