血清血管生成素样蛋白水平与冠心病患者Gensini积分的相关性分析

黄志明 王研

冠心病(coronary heart disease，CHD)是冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease)的简称，是由冠状动脉狭窄或闭塞导致心肌缺血、缺氧而引起的心血管疾病[1]。近年来，随着人们生活方式改变、生活质量提高，CHD 发生率不断升高，严重危害人类健康，因此，评估冠状动脉病变程度对CHD 预防十分重要。血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like protein 3，ANGPTL3)是一种分泌蛋白，主要在人肝脏表达[2]；血管生成素样蛋白4(angiopoietin-like protein 4，ANGPTL4)又称为过氧化物酶体增殖物激活型受体，在人肝脏、肾脏及心肌中均有表达[3]。Gensini 积分是评估CHD 患者冠状动脉病变程度的有效指标，能准确评估患者病情。目前，已有研究证实[4-5]，血清 ANGPTL3、ANGPTL4水平与代谢综合征、糖尿病肾病发生、发展密切相关，而与CHD 患者Gensini 积分关系研究尚少。因此，本研究通过分析CHD 患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平变化，并结合CTA 结果，探讨二者水平与Gensini 积分相关性。详述如下。

资料与方法

1.一般资料 选取2017年3月至2018年9月，洪湖市人民医院心血管内科，收治的187 例接受CTA 患者为受试对象，按照CTA 结果分为冠心病组(CHD 组)95 例(至少有 1 支冠状动脉狭窄≥50%)、对照组 92 例(CTA 完全正常)。CHD 组年龄35～80 岁，其中单支病变患者34 例、双支病变患者31 例、3 支病变患者 30 例。纳入标准：①均符合CHD 诊断标准[6]；②患者均签署知情同意书；③临床资料齐全；④肝、肾功能正常。排除标准：①有其它类型心血管疾病；②近期内有重大手术者；③严重心力衰竭者；④恶性肿瘤或自身免疫性疾病者。对照组年龄35 ～81 岁。本研究经医院伦理委员会批准。

2.方法 (1)CTA 结果评估及Gensini 积分计算：每支血管病变程度按照美国心脏协会规定的冠状动脉血管图像分段评价标准和Gensini 积分系统进行评估[7]。

(2)根据冠状动脉狭窄程度评分：狭窄≤25%，记为1 分；25%＜狭窄＜50%，记为 2 分；50%≤狭窄≤75%，记为4 分；75%＜狭窄＜90%，记为 8 分；90%≤狭窄≤99%，记为16 分；100%为完全闭塞，记为32 分。

(3)根据冠状动脉病变部位确定权重系数：左冠状动脉主干×5；前降支近段、回旋支近段分别×2.5；前降支中段×1.5；前降支心尖支、第一对角支分别×1，回旋支钝缘支、远端、后降支分别×1，右冠状动脉近段、中段、远段、后降支分别×1；回旋支后侧支×0.5。CHD 组 CTA 结果见表1。每一病变Gensini 积分以冠状动脉狭窄程度评分乘以其病变系数表示，每例患者各病变Gensini 积分之和为病变程度的最终积分。根据Gensini 积分四分位间距将CHD 患者分为Ⅰ组 23 例(积分≤20)、Ⅱ组 25 例(20＜积分＜51)、Ⅲ组 24 例(51≤积分≤80)、Ⅳ组23 例(积分＞80)。

(4)样本收集与保存：两组患者均于住院第二天清晨抽取空腹肘静脉血，6 mL，分别置于促凝管中，室温静置1 h 后在离心机中离心(3 000 r/min)10 min，提取血清保存于-80 ℃冰箱，用于检测血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平。

(5)血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平检测：采用ELISA 法检测血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平。人ANGPTL3 试剂盒由上海邦景实业有限公司生产，人ANGPTL4 试剂盒由上海信裕生物科技有限公司生产，具体方法参照说明书。

表1 CHD 组冠状动脉造影结果[n(%)]

3.统计学方法 采用SPSS 20.0 处理所有数据。计数资料用频数及百分比描述，行χ2检验；正态分布计量资料以均数±标准差表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，采用SNK-q 检验行两两比较；非正态分布计量资料用中位数描述，行秩和检验；利用Pearson 检验进行CHD 患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平与Gensini 积分相关性分析。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

结 果

1.两组基线资料比较 两组患者年龄、性别、BMI、空腹血糖及HDL-C 水平比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。CHD 组患者吸烟率、有高血压比例、有糖尿病比例及血肌酐、TC、TG、LDL-C 水平均显著高于对照组(P＜0.05)，见表2。

表2 两组基线资料比较[，n(%)]

表2 两组基线资料比较[，n(%)]

项目 对照组(n=92)CHD 组(n=95) t/ χ2 值 P 值年龄/岁 61.25±14.78 60.49±15.03 0.349 0.728性别/(男/女) 49/43 54/41 0.242 0.623 BMI/(kg/m2) 22.61±6.55 23.17±6.84 0.572 0.568吸烟 14(15.2) 31(32.6) 7.756 0.005高血压 30(32.6) 49(51.6) 6.894 0.009糖尿病 12(13.04) 29(30.5) 8.345 0.004 FPG/(mmoL/L) 5.22±1.44 5.41±1.38 0.921 0.358血肌酐/(μmol/L) 57.64±16.02 69.11±17.23 4.711 0.000 TC/(mmoL/L) 4.24±1.15 4.63±1.30 2.170 0.031 TG/(mmoL/L) 1.85±0.33 1.99±0.42 2.529 0.012 HDL-C/(mmoL/L) 1.15±0.28 1.08±0.23 1.871 0.063 LDL-C/(mmoL/L) 2.37±0.52 2.58±0.60 2.554 0.011

2.各组血清 ANGPTL3、 ANGPTL4 水 平 及Gensini 积分比较 CHD 组单支病变、双支病变、3支病变患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平均明显高于对照组(P＜0.05)；CHD 组双支病变、3 支病变患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平及Gensini 积分均明显高于单支病变患者(P＜0.05)；CHD 组3 支病变患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平及Gensini积分显著高于双支病变患者(P＜0.05)，见表3。

表3 各组血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平及Gensini积分比较()

表3 各组血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平及Gensini积分比较()

注：与对照组比较，aP＜0.05；与单支病变患者比较，bP＜0.05；与双支病变患者比较，cP＜0.05

组别 n ANGPTL3/(μg/L)ANGPTL4/(μg/L) Gensini 积分对照组 92 24.12±7.64 40.65±11.87 —CHD 组单支病变患者 34 29.55±8.25a 52.29±14.05a 27.16±9.34双支病变患者 31 37.84±12.06ab 63.00±16.43ab 59.24±10.07b 3 支病变患者 30 51.06±15.37abc 75.31±19.52abc 103.39±20.84bc F 值 57.895 50.573 458.056 P 值 0.000 0.000 0.000

3.不同 Gensini 积分组血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平比较 由表4 可知，与Ⅰ组比较，Gensini 积分Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平显著升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)；与Ⅱ组比较，Gensini 积分Ⅲ组、Ⅳ组血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平明显升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)；与Ⅲ组比较，Gensini 积分Ⅳ组血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平显著升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表4 不同Gensini 积分组血清ANGPTL3、ANGPTL4水平比较()

表4 不同Gensini 积分组血清ANGPTL3、ANGPTL4水平比较()

注：与Ⅰ组比较，aP ＜0.05；与Ⅱ组比较，bP ＜0.05；与Ⅲ组比较，cP＜0.05

组别 n ANGPTL3/(μg/L) ANGPTL4/(μg/L)Ⅰ组 23 28.51±8.62 49.11±11.52Ⅱ组 25 36.17±9.12a 58.74±10.25aⅢ组 24 45.61±10.24ab 67.85±11.22abⅣ组 23 58.13±10.22abc 79.01±11.60abc F 值 41.214 30.382 P 值 0.000

4.CHD 患者血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平与Gensini 积分相关性分析 CHD 患者血清ANGPTL3水平与Gensini 积分呈正相关(r=0.772，P＜0.05)；血清ANGPTL4 水平与Gensini 积分呈正相关(r=0.721，P＜0.05)，见图1。

讨 论

图1 CHD 患者血清ANGPTL3、ANGPTL4 水平与Gensini 积分相关性分析

CHD 发生、发展与冠状动脉狭窄程度和支数有关，主要临床表现有心绞痛、心力衰竭、心肌梗塞等症状，由于早期临床症状不明显，易错失最佳治疗时机，死亡率较高[8]。因此，应进一步寻找与冠状动脉狭窄程度相关指标，为CHD 防治提供新思路，从而降低死亡率。Larouche 等[9]研究证实，血浆ANGPTL2 与 CHD 发生、发展有关，而 ANGPTL3、ANGPTL4 与 ANGPTL2 同属于 ANGPTL 家族，因此，本研究通过分析CHD 患者血清ANGPTL3、ANGPTL4水平变化，探讨其与冠状动脉狭窄程度关系。

ANGPTL 是分泌性糖蛋白，参与血管生成及糖脂代谢调控，ANGPTL3 属于其中一员，定位于1p31，包含7 个外显子。ANGPTL3 通过抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)活性，降低 LDL-C 水平、促进血管平滑肌细胞增殖及增加泡沫细胞数量，从而参与足细胞及脂质代谢类疾病发生、发展过程[10]。ANGPTL3水平降低是动脉粥样硬化和高脂血症的保护因素，在预防动脉粥样硬化及高胆固醇血症上有重要意义[11]。Dewey 等[12]研究发现，血浆 ANGPTL3 水平变化与LDL-C、HDL-C 水平及动脉粥样硬化性心血管疾病发生率降低有关。梁越等[13]研究表明，下肢动脉粥样硬化闭塞症患者血浆ANGPTL2 水平显著高于健康对照组，且疾病进展为重症下肢缺血时，患者血浆ANGPTL2 水平升高更明显。本研究通过检测血清ANGPTL3 水平，发现CHD 组3 支病变患者血清ANGPTL3 水平最高、其次为双支病变患者、单支病变患者最低，且均明显高于对照组，与梁越等[13]研究结果类似，提示血清ANGPTL3 水平变化与冠状动脉狭窄程度有关，可通过降低血清ANGPTL3 水平治疗CHD 患者。为进一步明确血清ANGPTL3 水平与冠状动脉狭窄程度关系，本研究通过比较不同Gensini积分组血清ANGPTL3 水平，发现其水平高低依次为：Ⅳ组、Ⅲ组、Ⅱ组、Ⅰ组，表明 Gensini 积分越高，CHD 患者血清ANGPTL3 水平越高。

人ANGPTL4 定位于19p131，包含6 个内含子和7 个外显子。ANGPTL4 在动脉粥样硬化形成过程中具有双重作用[14-16]：首先，ANGPTL4 能通过抑制LPL 活性阻碍动脉粥样硬化；其次，ANGPTL4 还能通过巨噬细胞，参与动脉粥样硬化发生、发展。Muendlein 等[17]研究发现，代谢综合征患者血浆ANGPTL4 水平显著高于无代谢综合征患者，可作为预测心血管事件的危险因素。吴欣等[18]研究表明，糖尿病肾病患者尿ANGPTL4 水平明显高于对照组。此外，Bouleti 等[19]研究发现，血清 ANGPTL4 水平与急性心肌梗死患者PCI 术后冠状动脉无复流有关。为探讨血清ANGPTL4 水平与CHD 病情严重程度关系，本研究采用 ELISA 法检测其水平，发现CHD 组单支病变、双支病变、3 支病变患者血清ANGPTL4 水平均远高于对照组，CHD 组双支病变、3支病变患者血清ANGPTL4 水平及Gensini 积分均明显高于单支病变患者，CHD 组3 支病变患者血清ANGPTL4 水平及Gensini 积分远高于双支病变患者，与上述研究相似[17-19]，提示血清ANGPTL4 水平可能参与动脉粥样硬化斑块发展进程，从而影响冠状动脉病变程度，推测可能与多支血管病变导致多处血内皮损伤有关。考虑到单纯采用CHD 患者单、双、3 支病变表示冠状动脉病变程度具有局限性，本研究采用Gensini 积分系统进一步评估CHD 冠状动脉严重程度，结果显示Gensini 积分越高，CHD 患者血清ANGPTL4 水平越高，表明血清ANGPTL4 水平与冠状动脉严重程度密切相关。本研究结果还发现，CHD 患者血清 ANGPTL3 水平、ANGPTL4 水平均与Gensini 积分呈正相关，提示二者共同作用可能对CHD 发生、发展存在不利影响。

综上所述，CHD 患者血清 ANGPTL3、ANGPTL4水平均升高，二者水平与冠状动脉病变程度呈正相关，为临床病情评估及防治提供一定依据。本研究中血清 ANGPTL3、ANGPTL4 水平变化能否作为CHD 危险预测的参考指标，需加大样本进行证实。