中药挥发油空气清新剂的制备及抑菌性能评价

葛永红，张继方，杨昕霖，谢秀芝

（吉林农业科技学院，吉林吉林 132101）

金银花为忍冬科植物，其药用成分芳樟醇、木犀素、氯原素；陈皮为芸香科植物，其药用成分橙皮苷；黄芩为唇形科植物，其药用成分黄芩苷；鱼腥草为三白草科植物的干燥地上部分，其药用成分绿原酸；薄荷为唇形科植物，其药用成分薄荷油。五种中药的药用成分均为广谱性的抑菌成分。[1]

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1

菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及酵母菌，均为吉林农业科技学院微生物实验室提供。

金银花、陈皮、黄芩、鱼腥草、薄荷：购自安徽亳州中药材交易中心。

培养基：牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）、豆芽汁葡萄糖培养基（用于真菌）。

1.1.2 仪器

挥发油提取器装置、冰箱、恒温干燥箱、粉碎机、恒温培养箱、灭菌锅、海尔电冰箱。

1.2 试验方法

1.2.1 金银花、鱼腥草药用成分的粗提取[2、3]

将材料阴干、粉碎并过筛后，称取20g粉末，索式回流提取法置于500ml锥形瓶中，加入溶剂30%乙醇200ml，回流提取60分钟。滤除滤液，浓缩生药含量为1g/ml，滤膜过滤除菌，封口至4摄氏度冰箱中保存。

1.2.1.1 陈皮、薄荷挥发油的提取[4]

将材料阴干、粉碎并过筛后，称取80g粉末，置于1000ml容量瓶中，加入溶剂500ml的水，挥发油提取法，得到上层油状液体为香樟精油，计算精油提取率。

1.2.1.2 黄芩药用成分的粗提取

将材料阴干、粉碎并过筛后，称取20g粉末，水煎煮3次，每次溶剂200ml，每次煎煮1h，合并水煎液，浓缩至生药含量1g/ml，滤膜过滤除菌，封口至4摄氏度冰箱中保存。

1.2.2 体外抑菌研究

1.2.2.1 金银花体外抑菌实验

取干燥后的定型滤纸片，依次浸入稀释浓度为的0.500 00g/mL、0.250 00g/mL、0.125 00g/mL、0.062 50g/mL、0.031 25 g/mL的金银花稀释液中浸泡5分钟。采用滤纸片法，10 h后测定抑菌圈的大小。

1.2.2.2 陈皮、鱼腥草体外抑菌实验

取干燥后的定性滤纸片，依次浸入稀释浓度分别为2.000 00g/ml、1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、0.250 00g/ml、0.012 50g/ml的陈皮稀释液中浸泡5分钟。采用滤纸片法，10h后测定抑菌圈的大小。

1.2.2.3 黄芩体外抑菌实验[5]

取干燥后的定性滤纸片，依次浸入稀释浓度分别为4.000 00g/ml、2.000 00g/ml、1.000 00g/ml、0.5000 0g/ml、0.250 00g/ml的黄芩稀释液中浸泡5分钟。采用滤纸片法，10h后测定抑菌圈的大小。

1.2.2.4 薄荷体外抑菌实验

取干燥后的定性滤纸片，依次浸入稀释浓度分别1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、0.250 00g/ml、0.012 50g/ml、0.062 50g/mL的薄荷稀释液中浸泡5分钟。采用滤纸片法，10h后测定抑菌圈的大小。

1.2.3 空气清新剂的制备[6]

取等量的金银花、陈皮、鱼腥草、黄芩、薄荷五种提取液，加入装有等量的30%的乙醇容器中，密封，充分溶解，装入定量气压瓶中使用。

1.2.4 空气清新剂抑菌模型的制备

取24个培养皿、24个500ml（1 098cm3）烧杯。将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌采用平板划线法分别接种6个培养皿，等量分为实验组与对照组。接种后的培养皿拿到室内环境下，将烧杯罩在培养皿上。实验组分别向烧杯内喷一次空气清新剂，对照组分别烧杯内喷一次无菌蒸馏水。10h观察实验组与对照组培养皿上的菌株与杂菌生长状况[7]。

1.2.5 感官评价

选择10名志愿者，男女各半，分2组，分别对各种精油空气清新剂的气味、使用情况、混浊度和是否分层等指标进行综合评定[8]。

2 结果与分析

2.1 金银花提取物最小抑菌浓度（MIC）

金银花提取液对四种菌株都能起到抑菌的最小浓度为0.250 00g/mL。具体情况见表1。

表1 金银花提取物对不同菌种的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌作用

2.1.1 陈皮挥发油最小抑菌浓度（MIC）

陈皮挥发油对四种菌株有明显的抑菌效果。陈皮挥发油对四种菌株都能起到抑菌的最小浓度为1g/mL。具体情况见表2。

表2 陈皮提取物对不同菌种的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌作用

2.1.2 鱼腥草提取物最小抑菌浓度（MIC）

鱼腥草提取物对四种菌株有明显的抑菌效果。鱼腥草提取物对四种菌株都能起到抑菌的最小浓度为0.500 00g/mL。具体情况见表3。

表3 鱼腥草提取物对不同菌种的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌作用

2.1.3 黄芩提取物最小抑菌浓度（MIC）

黄芩提取物对四种菌株有明显的抑菌效果。黄芩提取物对四种菌株都能起到抑菌的最小浓度为2.000 00g/mL。具体情况见表4。

表4 黄芩提取物对不同菌种的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌作用

2.1.4 薄荷挥发油最小抑菌浓度（MIC）

薄荷挥发油对四种菌株有明显的抑菌效果。鱼腥草提取物对四种菌株都能起到抑菌的最小浓度为1.000 00g/mL。具体情况见表5。

表5 薄荷提取物对不同菌种的最小抑菌浓度（MIC）及抑菌作用

2.2 感官综合评价结果

根据表6得出四种提取物的感官评价最优浓度：金银花提取物在0.250 00g/mL和0.125 00g/ml时最优，0.500 00g/mL次之；陈皮挥发油在 1.000 00g/ml和0.125 00g/mL时最优，0.500 00g/mL次之；鱼腥草取物在 0.500 00g/mL时最优，1.000 00g/mL次之；黄芩提取物在 2.000 00g/mL 时最优，0.250 00g/mL次之；薄荷挥发油在 1.000 00g/ml和 0.125 00g/ml时最优，0.500 00g/ml次之。

表6 不同浓度金银花、陈皮、鱼腥草、黄芩、薄荷提取液感官综合评价

2.3 空气清新剂的配方分析

结合五种中药材提取物的最小抑菌浓度和感官综合评价得出：金银花提取物的最佳浓度为0.250 00g/mL，陈皮挥发油的最佳浓度为1.000 00g/mL，鱼腥草提取物的最佳浓度为0.500 00g/mL，黄芩提取物的最佳浓度为2.000 00g/mL，薄荷挥发油的最佳浓度1g/ml。

2.4 空气清新剂对三种菌的抑菌效果评价结果

等量配比金银花、陈皮、鱼腥草、黄芩、薄荷五种提取液浓度分别为 0.250 00g/ml、1.000 00g/ml、0.500 00g/ml、2.000 00g/ml、1.000 00g/ml，加入定量的30%的乙醇容器中。根据表7得出空气清新剂对四种菌均有较好的抑菌效果。对大肠杆菌的抑菌效果最好。

表7 空气清新剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌的抑菌效果

3 结论

结合感官评价，得出空气清新剂中提取物的最佳配方为金银花、陈皮、鱼腥草、黄芩、薄荷提取物的浓度 0.25 g/mL、1g/mL、0.5g/mL、2g/mL、1g/mL。 此中药空气清剂，不含香精等人工合成的化学成分，是纯天然安全无毒的，在气味清香的同时还具有良好的抑菌效果，有很好的开发空间[9]。