血液性疾病疑难性交叉配血分析

纪桂香 夏和凤 贲燕华

[摘要] 目的 探讨血液性疾病疑难交叉配血不合原因，提出解决对策，为提高疑难配血处理能力提供依据参考。方法 方便选取2014年5月—2018年9月该院72例有输血指征的血液性疾病患者为研究对象，全部入选病例交叉配血试验均提示配血不合，回顾性分析患者配血试验结果以及抗体筛选与鉴定结果，查找配血不合原因。 结果 盐水法交叉配血不合45例（62.50%），以缗钱状凝集构成比最高（51.11%），自身温抗体次之（17.78%）;凝聚胺法交叉配血不合6例（8.33%）;抗人球法交叉配血不合18例（25.0%），血清中均含IgG抗体，以抗-E构成比最高（50.0%）;盐水法与抗人球法交叉配血均不合2例（2.78%），均为自身免疫性溶血性贫血。 结论 由于血液性疾病自身特性，患者同型输血也存在交叉配血不合的问题，为降低或消除输血不良反应，临床应积极根据患者病因去除配血不利影响因素，以更好的保障输血疗效及安全。

[关键词] 血液性疾病;交叉配血;盐水法;凝聚胺法;抗人球法;抗体鉴定

[中图分类号] R55          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2019）06（b）-0070-03

[Abstract] Objective To investigate the causes of mismatched blood matching in blood diseases， and to propose solutions to provide reference for improving the ability of difficult blood matching treatment. Methods From May 2014 to September 2018， 72 patients with blood diseases with blood transfusion indications in our hospital were conveniently selected as subjects. All the matched cases of blood matching tests indicated that the blood was not matched. The results of the blood test， antibody screening and identification results were retrospectively analyzed to find the cause of mismatching. Results There were 45 cases （62.50%） of the cross-matching blood in the saline method. The highest ratio of agglomeration was observed （51.11%）， followed by self-warming antibody （17.78%）. The condensed amine method was not suitable for 6 cases （8.33%）. The anti-human ball method did not match 18 cases （25.0%）， and the serum contained IgG antibody， which had the highest anti-E ratio （50.0%）; the salt method and the anti-human ball method did not match 2 cases（2.78%）， all of which are autoimmune hemolytic anemia. Conclusion Due to the characteristics of blood diseases， patients with homologous blood transfusion also have cross-matching problems. In order to reduce or eliminate adverse reactions of blood transfusion， clinically， the adverse factors of blood matching should be removed according to the cause of the patients， so as to better ensure the efficacy and safety of blood transfusion.

[Key words] Blood diseases; Cross-matching; Saline method; Condensed amine method; Anti-human ball method; Antibody identification

交叉配血試验指将受血者的血清和红细胞悬液分别与供血者的红细胞悬液和血清进行交叉匹配，以发现两者间是否存在血型不合的抗原-抗体反应，防止引起溶血性输血反应[1]。在临床实践中，受血者与供血者血型相同但交叉配血不合的现象并不十分少见，给输血相容性检测结果的判定带来了诸多困难，也给临床及时输血增添了困扰，因此，准确查找交叉配血不合原因，并采取有效方法进行特异性鉴定，对输血患者临床救治具有重要意义[2]。该研究现以2014年5月—2018年9月该院72例患者为例进行分析探讨，报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便择取该院72例血液性疾病患者为研究对象。纳入标准：临床综合检查确诊为造血系统疾病;输血前检验;接受血型鉴定与交叉配血试验，结果提示配血不合;签署知情同意书;获伦理委员会批准。排除标准：合并其他系统疾病;临床资料不全。入选病例中，男34例，女38例;年龄24～75岁，平均（53.1±10.4）岁;急性白血病15例，自身免疫性溶血性贫血11例，多发性骨髓瘤11例，慢性再生障碍性贫血9例，慢性粒细胞白血病7例，骨髓增生异常综合征7例，巨球蛋白血症3例，恶性淋巴瘤3例，血小板减少性紫癜2例，其他4例。

1.2  方法

取受血者和供血者新鲜无溶血的EDTA抗凝静脉血液样本各2份，每份2～3 mL，送检实验室。一份以生理盐水稀释成5%红细胞悬液备用，一份上机离心提取上清液。以盐水法、凝聚胺法和抗人球法进行配血试验，对于配血不合者进行抗体筛选及鉴定。

1.2.1  仪器与试剂  凝聚胺（珠海贝索生物）、ABO、RhD血型定型检测卡、不规则抗体筛检卡、ABO反定型红细胞、筛选细胞（长春博迅），谱细胞、抗-E、抗-e、抗-C、抗-S、抗-M、抗-H、抗-A1标准血清（上海血液生物）。BASO2005-1型离心机（台湾贝索），TD-3A型血型血清学离心机和FYQ型免疫微柱孵育器（长春博研）。

1.2.2  检测方法  盐水法：取2支小试管，1支加受血者血清和供血者红细胞悬液，为主侧配合，另一支反之，为次侧配合。血样充分混匀后，1 300 g/min离心15 s，观察管底反应物及有无凝集。

凝聚胺法：取2支小试管，分别做主侧与次侧配合。试管中分别加入0.65 mL低离子强度溶液和凝聚胺2滴，充分混匀后，3 400 r/min速离心10 s，倒掉上清液，观察管底红细胞聚集情况。最后再于试管中分别加入解聚液2滴，充分混匀后观察凝集有无散开，散开提示非特异性凝集，配血相符，不散提示抗原抗体特异性反应，配血不合。

抗人球法：盐水法和凝聚胺法配血试验均提示阳性者，以抗人球法进行复检。分别取血清2滴和红细胞悬液1滴，混合后置37 ℃水浴30 min，后洗涤3次去上清液后分别加入抗人球蛋白试剂，1 300 g/min离心15 s，观察有无凝集。

不规则抗体测定：取受血者血清与自身细胞以及抗体筛选细胞进行不规则抗体筛选，提示含有不规则抗体者，取其血清与谱细胞进行不规则抗体特异性鉴定，确定抗体性质及特异性。

2  结果

72例患者中，45例患者盐水法交叉配血试验提示配血不合（62.50%），见表1。统计显示，缗钱状凝集构成比最高，占5

1.11%;自身温抗体8例，抗体筛查证实抗-E9例，無特异性3例;ABO血型误定4例，其中3例为急性白血病患者，1例为慢性粒细胞性白血病患者;IgM血型抗体3例，抗体鉴定抗-M，重新为3例患者选择M抗原阴性供血者，复行交叉配血试验提示配血相合。6例患者凝聚胺法交叉配血试验提示配血不合（8.33%），包括受血者存在自身抗体3例，受血者IgM血型抗体3例，受血者血小板聚集2例。18例患者抗人球法交叉配血试验提示配血不合（25.0%），谱细胞鉴定结果显示，其血清中均含IgG抗体，其中以抗-E构成比最高，见表2。对此，选择不含该抗体相应抗原的供血者血液样本，与受血者复行交叉配血试验，均提示配血相合，予以患者输血均未见溶血性输血反应。此外，2例患者盐水法与抗人球法交叉配血试验均提示配血不合（2.78%），均为自身免疫性溶血性贫血患者，谱细胞鉴定结果显示，血清中同时有IgG抗-C和自身温抗体。

3  讨论

输血指将全血或成分血等经血管途径输入到人体，是临床常用救治手段[3]，能够有效补充血容、血红蛋白、血小板、血浆蛋白及各种凝血因子，从而增加有效循环血量，促进携氧功能，预防和控制出血，减轻组织渗出与水肿[4]，对挽救患者生命具有重要意义。但是，输血前必须进行血型鉴定、交叉配血试验、抗体筛查等血液相容性检测项目，是保证输血安全的前提和必要手段[5]。

免疫性因素是导致配血不合的常见原因，主要由自身抗体或机体产生不完全抗体所致，以主侧或伴次侧凝集为主要表现[6]。另外，受血清蛋白紊乱、药物破坏红细胞表面电势电位、球白蛋白倒置等非免疫性反应因素影响[7]，交叉配血也可见主侧红细胞缗钱状凝集。该研究中，抗人球法交叉配血不合占25%，其中以IgG-E构成比最高，占50%，与文献报道抗人球法配血不合IgG-E构成比56.3%的研究结论相近[8]。

自身免疫性溶血性贫血（AIHA）是抗原抗体反应加速红细胞破坏所引起的血液性疾病，研究发现AIHA患者血清中常常含有自身抗体，导致主次侧均可见交叉凝集[9]。此类患者在交叉配血时可行吸收放散试验，以37 ℃生理盐水洗涤红细胞先放散掉自身抗体，做交叉配血试验时，取用放散掉抗体的自身红细胞与吸收后的血清，能够有效避免上述问题[10]。白血病患者血液中原始及幼稚细胞数量多，恶性淋巴瘤患者长期化疗，两者均会削弱红细胞膜血型抗原，导致正定型时红细胞弱凝聚，配血时应加强观察，必要者镜下观察，避免误判。同时，我们可以通过洗涤来维持红细胞血型抗原，增强凝聚性，以提高试验结果准确性。对于IgM血型抗体所致配血不合，可以巯基试剂对红细胞进行预处理，以解裂IgM抗体分子间的二硫键，消除其对交叉配血的影响。此外，输血史、妊娠史等也会对输血配血产生影响，为防止溶血性输血反应，应予以此类患者多介质交叉配血，同时结合病史分析，以排除假凝集。

综上所述，由于血液性疾病自身特性，患者同型输血也存在交叉配血不合的问题，为降低或消除输血不良反应，临床应积极根据患者病因去除配血不利影响因素，以更好的保障输血疗效及安全。

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[10]  張伟军，王杰敏，胡少媚.盐水介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法3种交叉配血法在新生儿输血安全中的应用价值研究[J].黑龙江医学，2016，40（2）：124-125.

（收稿日期：2019-03-14）