Notch1与核转录因子-κB在腹主动脉瘤血浆中的表达

时明涛

作者单位：南阳市中心医院血管外科，河南 南阳 473000

腹主动脉瘤（AAA）是指腹主动脉某一段的异常或局限性膨胀，最终使得管壁无法承受血流的冲击而出现破裂的一种高危疾病；调查显示，我国AAA发病率高达2%～8.9%，且呈明显上升趋势［1］。以往研究结果显示，炎症与AAA发生有关［2］。Notch信号通路可通过调节多种炎性细胞因子加重机体炎性反应，参与AAA病理进程［3］；核转录因子-κB（NF-κB）是一种细胞核内转录因子，在调节炎症、细胞免疫方面起重要作用，可能参与AAA发生、发展［4］。本研究主要观察AAA病人血浆Notch1、NF-κB浓度变化，并分析两者联合诊断的敏感性、特异性，探讨Notch1、NF-κB在诊断AAA中的应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2012年1月至2018年1月南阳市中心医院收治的84例AAA病人作为AAA组，所有病人均经CT检查诊断为AAA，选取同期入院的性别、年龄相匹配的非AAA病人50例作为对照组。所有研究对象均为无严重感染、恶性肿瘤或其他恶性疾病。两组病人性别、年龄及吸烟史、糖尿病、高血压比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求。病人或其近亲属知情同意。

表1 84例AAA病人与50例非AAA病人一般资料比较

1.2方法采用CT检测所有入组对象肾下腹主动脉最大直径，并根据肾下腹主动脉直径分为3组，肾下腹主动脉直径＜50 mm作为AAA1组，肾下腹主动脉直径为50～70 mm作为AAA2组，肾下腹主动脉直径＞70 mm作为AAA3组。所有病人均行空腹静脉采血2 mL，置于EDTA抗凝试管中，3 000 r/min离心15 min，离心半径为10 cm，分离血浆，-80℃低温下保存。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆Notch1、NF-κB水平，试剂盒分别购自武汉华美生物工程有限公司、上海酶联生物科技公司。

1.3观察指标①观察两组病人肾下腹主动脉最大径；②比较两组血浆Notch1、NF-κB水平；③比较不同肾下腹主动脉直径的AAA病人血浆Notch1、NF-κB水平；④绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析，血浆Notch1、NF-κB及其联合诊断AAA效能分析；Notch1、NF-κB联合诊断时，Notch1、NF-κB任一一项超过临界值，则诊断为阳性。

1.4统计学方法采用SPSS18.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，采用χ2检验，灵敏度和特异度比较采用多组计数资料χ2检验，两组间比较采用χ2分割检验，检验水准调整为0.016 7；计量资料采用±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，相关分析采用Pearson相关性分析。P＜0.05提示差异有统计学意义。采用绘制受试者工作特征曲线（ROC）评估血浆Notch1、NF-κB诊断AAA的效能，曲线下面积（AUC）比较采用Z检验，计算公式为Z＝|AUC1-AUC2|/sqrt（SE12+SE22），SE1、SE2分别为AUC1、AUC2对应的标准差。

2 结果

2.1两组肾下腹主动脉最大径比较AAA组肾下腹主动脉最大径为32～87（59.67±5.92）mm，对照组为18～25（22.16±3.64）mm，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2两组血浆Notch1、NF-κB水平比较AAA组血浆Notch1、NF-κB浓度显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 AAA组和对照组血浆Notch1、NF-κB水平比较/xˉ± s

2.3不同肾下腹主动脉直径的AAA病人血浆Notch1、NF-κB水平比较AAA1、AAA2、AAA3三组病人血浆Notch1、NF-κB比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 不同肾下腹主动脉直径的AAA病人血浆Notch1、NF-κB水平比较/xˉ± s

2.4AAA组血浆Notch1、NF-κB水平的相关性分析Pearson相关分析显示，血浆Notch1、NF-κB与AAA病人肾下腹主动脉直径无明显相关性（r＝0.164，P＝0.671），血浆Notch1与血浆NF-κB水平呈正相关关系（r＝0.561，P＝0.039）。

2.5血浆Notch1、NF-κB及其联合诊断AAA的价值分别绘制血浆Notch1、NF-κB及其联合诊断AAA的ROC曲线，并确定最佳界值，血浆Notch1诊断AAA的最佳截点为119 ng/mL，曲线下面积（AUC）为 0.751（95%CI：0.714～0.850），血浆 NF-κB诊断AAA的最佳截点为98 ng/L，AUC为0.723（95%CI：0.671～0.768），血浆Notch1联合NF-κB诊断AAA的AUC为0.786（95%CI：0.729～0.859），两者联合诊断的AUC与血浆Notch1、血浆NF-κB单独诊断的AUC比较，差异无统计学意义（Z＝1.094、1.432，P＝0.296、0.231），血浆NF-κB与Notch1单独诊断的AUC比较，差异无统计学意义（Z＝1.061，P＝0.303），见图1。血浆Notch1联合NF-κB诊断特异性高于单独血浆Notch1和血浆NF-κB诊断（P＜0.05），血浆Notch1和NF-κB诊断特异性比较，差异无统计学意义（P＞0.05），三组敏感性比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

图1 AAA组血浆Notch1、NF-κB及其联合诊断AAA的ROC曲线

表4 AAA组血浆Notch1、NF-κB及其联合诊断AAA的价值比较/%

3 讨论

AAA指老年人常见病，一旦破裂，可引起大出血，病死率高达60%～80%［5］。目前，AAA发病机制尚未完全明确，可能与炎症、氧化应激、基质金属蛋白酶等有关，其中巨噬细胞和淋巴细胞浸润所介导的炎性反应是AAA发生的关键环节，另外，炎症细胞大量活化还可促进动脉壁血管新生，导致动脉瘤破裂［6］。

Notch信号传导途径是在进化上高度保守的一类通路，主要包括Notch1-4，在器官、组织、细胞的发育分化中起重要参与作用。Notch1最早在人类T细胞母细胞白血病中鉴定出来，随后研究认为Notch1信号通路与肿瘤发生密切相关［7-8］。近年来，随着国内外对Notch1受体信号的通路的深入研究，发现Notch1信号通路可参与调节机体炎性反应，机制可能包括以下方面：调控DC细胞因子和化学因子的分泌调控Th分化；促使局势细胞向MI分化；与巨噬细胞表面TLR相互协调，促使细胞分化，参与炎症进展［9］。Koenig等［10］指出，Notch1在AAA发生及进展中其重要参与作用；樊晓静等［11］指出，Notch1信号通路可通过参与免疫调节参与胃肠道间质瘤发生、发展。

NF-κB是1986年Sen等首先从B淋巴细胞中发现的核转录因子，广泛存在于细胞内，具有多项调节功能，可参与感染、炎症、免疫调节、应激反应等［12］。研究报道，NF-κB是促炎症基因表达的枢纽之一，可调控下游靶基因促炎性因子及基质金属蛋白酶-9等表达，促使细胞活化、增殖、浸润等［13］。动物研究指出，AAA形成过程中，NF-κB大量激活［14］。王国强等［15］认为NF-κB活化是AAA发生和发展的始动机制。

本研究中，AAA组病人血浆Notch1、NF-κB浓度显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），说明AAA病人会伴随血浆Notch1、NF-κB升高。聂斌等［16］指出，人主动脉瘤组织中NF-κB呈高表达。近年来，有研究发现，Notch1与NF-κB两个信号通路可相互调节，Notch1型号通路的共激活分子MAML1可能参与调节NF-κB型号通路的活化［17］；还有学者发现，Notch1活化可延长NF-κB介导的炎症基因表达时间，进一步加重机体炎症反应［18］。本研究发现，AAA病人血浆Notch1与NF-κB浓度基本同步，且Pearson相关分析显示，AAA病人血浆Notch1与NF-κB呈正相关关系。本研究还就血浆Notch1、NF-κB诊断AAA效能进行分析，发现两者联合诊断AAA的AUC大于血浆Notch1、NF-κB单独诊断，特异性高于血浆Notch1、NF-κB单独诊断，差异有统计学意义（P＜0.05），但敏感性差异比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，与非AAA病人相比，AAA病人伴随血浆Notch1、NF-κB浓度升高，且两者呈正相关关系，但AAA病人不同肾下腹主动脉直径与血浆Notch1、NF-κB无关；另外，血浆Notch1、NF-κB诊断AAA具有较高和特异性。