泌尿道感染沙眼衣原体RNA和解脲脲原体RNA检验分析

陈晓祺

【摘要】目的：通过恒温扩增技术检测杭州市第三人民医院泌尿道感染患者沙眼衣原体RNA（CT-RNA）和解脲脲原体RNA（UU-RNA），分析其感染情况及特点。方法：采集2193例泌尿道感染患者尿液样本，采用实时荧光恒温扩增检测技术（SAT）检测解脲脲原体RNA和沙眼衣原体RNA。结果：CT阳性率男性明显高于女性（P

【关键词】泌尿道感染;沙眼衣原体;解脲脲原体;RNA;实时荧光恒温扩增技术

沙眼衣原体（CT）和解脲脲原体（uu）是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染（NGU）的主要病原，两者均可寄生于健康人的泌尿生殖道，当机体免疫力下降时，这些菌群会变成致病菌，从而造成泌尿生殖道感染。以实时荧光恒温扩增检测技术检测病原体RNA，避免了机体残留病原体DNA核酸片段的干扰，具有较高的灵敏度和特异性。本文探究2193例泌尿道感染患者沙眼衣原体RNA和解脲脲原体RNA检验结果，报告如下。

1材料与方法

2016年1月至2017年12月在杭州市第三人民医院初诊为泌尿道感染的患者2193例（男1608例，女585例），最小年龄15岁，最大年龄87岁，平均年龄37.0±12.6岁。

1.2标本采集

取清晨首次尿，或长时间（至少l小时）不排尿后的首段尿2ml，于样本保存液混合，待测。

1.3检测方法

采用实时荧光恒温扩增检测技术，分核酸提取和核酸检测两个步骤。在核酸提取过程中，CT、UU裂解释放出的核酸与核酸提取液中的磁性颗粒特异性结合，通过清洗磁性颗粒而获得纯净的靶标核酸（RNA）。实时荧光核酸恒温扩增检测技术使用M-MLV反转录酶、T7RNA多聚酶和优化探针技术来同时实现。反转录酶用于产生靶标核酸（RNA）的一个DNA拷贝，T7RNA多聚酶从DNA拷贝上产生多个RNA拷贝，带有荧光标记的优化探针和这些RNA拷贝特异性结合，该荧光信号可由检测仪器捕获。根据实时荧光信号出现的时间与强度，结合阳性对照和阴性对照对检验结果进行判断。

1.4仪器与试剂

Bio-Rad全自动核酸扩增仪。仪器型号Bio-Rad CFX96。试剂：上海仁度生物科技有限公司生产的沙眼衣原体（cT）核酸检测试剂盒、解脲脲原体（UU）核酸检测试剂盒。

1.5统计学处理

所有数据采用SPSS21.0软件进行处理，率的比较采用卡方检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1不同性別泌尿道感染患者CT、UU、CT+UU感染情况

CT阳性率男性高于女性（P<0.001），UU阳性率女性高于男性（P<0.001），CT+UU混合感染阳性率男性高于女性（P<0.001）。详见表1。

2.2不同年龄段泌尿道感染患者CT、UU、CT+UU感染情况

按照患者年龄进行分组统计，≤25岁年龄组CT、UU、CT+UU阳性率均为最高，>55岁年龄组CT、UU、CT+UU阳性率均为最低。详见表2。

3讨论

（1）CT感染是男性尿道炎常见原因，未经治疗者多数转变为慢性，周期性加重，可合并附睾炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎等。UU可引起男性前列腺炎、附睾炎、不育症，女性可引起泌尿生殖道炎症、不孕症，并可感染胎儿导致流产、早产及低体重胎儿。

（2）实时荧光恒温扩增检测技术对于检测CT、UU的敏感性、特异性均很高。样本保存液中包括去垢剂，高离子浓度能够抑制RNase活性，尽量保护新鲜样本里的RNA免受降解。而尿液作为一种非侵入式取样，可由患者自行取材，一方面减少了医生的工作量，同时避免拭子取样的尴尬和痛苦，且可减少医源性感染。尤其对于男性患者，其优势更加明显。

综上所述，泌尿道感染患者中，CT和UU感染率较高，与性别、年龄因素有关。