惠州市儿童肺炎支原体感染流行病学及耐药性分析

林国栋，朱文艳，王 芳

(惠州市第三人民医院儿科一区，广东 惠州 516001)

肺炎支原体(mycoplasma pneumonia，MP)属于无细胞壁的病原微生物，是引起儿童呼吸道感染的常见病原体之一[1]。由于MP缺乏细胞壁，因而对于影响细胞壁合成的抗生素具有一定的耐药性。临床对于肺炎支原体的治疗，多以抑制蛋白质、核酸合成的药物为主，比较常见的如大环内酯类、四环素类、喹诺酮类[2]。儿童阶段是人生长发育的关键阶段，对于抗生素的使用要保持高度谨慎，部分毒副作用较强的药物应该避免使用，而毒副作用较小的药物，如罗红霉素、阿奇霉素等大环内酯类药物可以多加考虑。相关调查[3]表明，近年来MP感染率有了明显的上升，抗生素的滥用进一步增加了MP感染的出现，这对临床治疗造成了严重的干扰和影响。本研究针对惠州市第三人民医院收治的2000例急性下呼吸道感染患儿进行研究，分析惠州市儿童MP感染流行病学及耐药情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2017年6月至2018年6月在本院住院的急性下呼吸道感染患儿2000例，均有典型的临床症状或表现，如咳嗽、发热、气促、喘息等。患儿在就诊时予以采集静脉血2 mL，并于当日送检。其中男1042例，女958例；<1岁374例，1～3岁396例，>3～5岁411例，>5～7岁405例，>7岁414例；春季检测478例，夏季检测512例，秋季检测491例，冬季检测519例。

1.2 检测方法

1.2.1 MP-IgM检测

采用血清MP被动凝集法检测，试剂盒产自日本富士瑞必欧株式会社，型号为SERODIA-MYCOII。严格按照说明书和相关要求进行操作：将100、25 μL的血清稀释液分别加入反应板(12×8)第1孔、第2—12孔，另外第1—12孔加入25 μL待检血清，并进行套倍稀释处理，第2孔加入未致敏因子(25 μL)，第3—12孔各加入致敏因子(25 μL)，第3—12孔最终稀释倍数(1:40、1:80)，充分混匀，反应板加盖，放置3 h，注意调节室温在15～30 ℃。对凝集反应图像进行观察和读取，若MP-IgM在1:160及以上，则表示MP感染阳性。

1.2.2 MP快速培养

针对MP-IgM 1:160及以上的患儿，进行MP快速培养鉴定(随机抽取100例样本)及药物敏感试验。药敏板：1)红霉素高浓度、低浓度分别为1.0、0.1 mg·L-1；2)罗红霉素高浓度、低浓度分别为2.0、0.1 mg·L-1；3)克拉霉素高浓度、低浓度分别为1.0、0.1 mg·L-1；4)阿奇霉素高浓度、低浓度分别为1.0、0.1 mg·L-1；5)乙酰螺旋霉素高浓度、低浓度分别为1.0、0.1mg/L；6)克林霉素高浓度、低浓度分别为4.0、1 mg·L-1；7)左氧氟沙星高浓度、低浓度分别为4.0、1 mg·L-1。

培养方法：取分装干粉培养基1支，打开盖子(保证无菌操作)，将1.5 mL超纯水加入其中，待其溶解后加入50 μL培养液至药敏板阴性孔(C-孔)中。用咽拭子(棉试纸)采集标本，然后将棉试纸第一时间放置进培养基瓶内，反复搅动并提取棉试纸，对着瓶壁挤出液体，取出棉试纸，液体混合均匀，吸取50 μL加入各药敏板孔及观察孔(C+孔)中，丢弃培养瓶，药敏板放置于温度为35～37 ℃的孵箱培养，培养24 h后观察结果。

1.3 判断标准

1.3.1 阳性和阴性判断标准

1)阳性：阳性对照孔培养基变黄色；2)阴性：阳性对照孔培养基不变色。

1.3.2 药敏结果判断标准

A孔为药物高浓度，B孔为药物低浓度。敏感：药敏板A孔不变色，B孔不变色；中敏： A孔不变色，B孔变黄色；耐药：A孔变黄色，B孔变黄色。

1.4 统计学方法

数据分析使用SPSS21.0统计软件包，计数资料以例(%)描述。

2 结果

2.1 不同季节MP感染情况

冬季感染率最高，夏季感染率最低，见表1。

表1 不同季节MP感染情况

2.2 不同性别MP感染情况

男性MP感染率低于女性，见表2。

表2 不同性别MP感染情况

2.3 不同年龄MP感染情况

<1岁幼儿MP阳性率最低，>7岁的儿童MP阳性率最高；随着年龄的增加，MP阳性率逐渐上升。见表3。

表3 不同年龄MP感染情况

2.4 不同抗生素耐药情况

对MP-IgM≥1:160患儿随机抽取无菌采集咽拭子100例作MP快速培养鉴定及药敏试验，79例培养有支原体生长。不同抗生素耐药情况见表4，显示阿奇霉素的耐药性比较低，克拉霉素、罗红霉素、红霉素的耐药性比较高。

表4 不同抗生素耐药情况 n=79

3 讨论

儿童急性下呼吸道感染疾病中，最为常见的病原体之一为MP，在自然界中广泛存在，飞沫传播是其主要的传播途径，因此传染性非常强[4]。相关调查[5]表明，因MP引起的呼吸道感染逐渐增多，并且日趋流行，越来越多的婴幼儿受到急性下呼吸道感染的影响，导致健康水平下降，生长发育因此受限。MP感染具有较强的隐匿性，起病早期并不具备典型的临床表现，通过X线片等手段检查也不具有明显的特异性，因而诊断存在较大的难度，多数情况下需通过实验室检查或者病原体分离、培养才能确诊；但普通培养的阳性率比较低，并且所需的时间比较长[6]。本研究选择的MP培养方式为快速培养，培养的速度比较快，阳性符合率也比较高。

人类对MP具有普遍易感染性，而婴幼儿群体因为年龄、身体条件等原因，感染的可能性更高，并且不同年龄段的儿童，感染率有所不同。本研究结果显示：>7岁的儿童MP阳性率最高，<1岁幼儿MP阳性率最低，并且随着年龄的增加，MP阳性率逐渐上升。这可能是因为婴幼儿群体中，7岁以上的儿童为学龄前儿童，人群比较密集，呼吸道传播的可能性更大，并且相较于低龄儿童，MP初次感染时的特异性更高，更容易检出[7]；在性别方面，男性MP感染率低于女性，而基本资料中的女性要少于男性，这就可以排除人数因素，因此可以认为女性相较于男性，对MP存在易感性，但其真实性还有待进一步研究；在季节方面，冬季感染率最高，夏季感染率最低，这与所处的地区有很大关系，亚热带、热带地区在冬季时比较湿冷，室外活动减少，室内空气的流动相对较差，相互感染的可能性增加[7]；另外本研究结果还显示，阿奇霉素的耐药性比较低，克拉霉素、罗红霉素、红霉素的耐药性比较高。分析原因认为可能与阿奇霉素组织浓度高、药物从细胞内释放缓慢等因素有关[8]。

综上所述，MP感染与患儿的性别、年龄以及季节有关，女性感染率高于男性，年龄越大感染率越高，冬季的感染率高于其他季节，阿奇霉素的耐药率比较低，克拉霉素、罗红霉素等耐药率比较高，临床治疗时应合理地选择药物。