非小细胞肺癌患者血清铁蛋白、胸苷激酶1、基质金属蛋白酶9表达及临床价值探讨

王总飞，刘先本，张瑞祥，刘士磊

(郑州大学附属肿瘤医院胸外科，河南 郑州 450008)

非小细胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占4/5左右，早期症状无特异性，临床确诊时多处于中晚期，易侵袭或转移，患者5年生存率不高[1]。早期诊治NSCLC，对提高患者生存率，改善其生存质量具有十分重要的意义。近年来肿瘤标记物在恶性肿瘤诊断、治疗、预后评估中应用较多[2，3]，血清铁蛋白(SF)为新型肿瘤标志物之一，其诊断肺癌敏感度较高。胸腺激酶1(STK1)属于DNA修复酶，参与细胞增殖过程，被发现在实体肿瘤中高表达，且关于其对NSCLC化疗效果评估的价值报道多[4，5]。基质金属蛋白酶9(MMP-9)通过对细胞外基质(ECM)降解以参与肿瘤生长、侵袭与转移[6]。本研究探讨血清SF、STK1、MMP-9在NSCLC患者中的表达及临床意义，为临床NSCLC治疗提供重要参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料2016年2月至2018年2月我院收治的NSCLC患者80例(观察组)，均通过病理学检查证实，术前均无放化疗干预，排除肝肾功能异常、免疫异常、合并其他恶性肿瘤等患者。其中男44例，女36例；年龄40～80岁[(56.38±3.29)岁]；病理分型：鳞癌52例，腺癌28例；TNM分期：I期30例，II期33例，III期17例；有吸烟史30例，有淋巴结转移26例。同期诊治的肺部良性疾病患者65例(对照1组)，疾病类型：慢性阻塞性肺疾病(COPD)42例，肺炎18例，肺结核5例。其中男36例，女29例；年龄36～77岁[(55.84±3.35)岁]；有吸烟史22例。同期健康体检正常人员50例(对照2组)，其中男25例，女25例；年龄37～76岁[(55.69±3.16)岁]；有吸烟史17例。三组性别、年龄、吸烟史比较差异均无统计学意义(P> 0.05)，有可比性。本次研究患者均自愿参与，并签署知情同意书。

1.2 方法清晨空腹采集各组对象肘静脉血4 ml，以每分钟3000转的速率(r=5 cm)离心5分钟，血清分离后保存待测。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组对象血清SF、MMP-9水平，试剂盒均购自上海江莱生物科技有限公司；免疫印迹增强化学发光法对血清STK1测定，化学发光成像分析仪及其配套试剂购自西安瑞迈分析仪器有限责任公司。

1.3 统计学方法采用SPSS 20.0统计软件处理数据。计量资料行正态性和方差齐性检验，不符合正态分布则通过对数转化后呈正态或近似正态分布，多组间行单因素方差分析，组内两两比较行LSD-t检验；两组间行独立样本t检验。Pearson相关性分析SF、MMP-9与STK1水平的关系。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清SF、MMP-9、STK1水平比较观察组血清SF、MMP-9、STK1水平高于对照1组、对照2组(P< 0.05)；对照1组血清SF、SKT1水平高于对照2组(P< 0.05)，两组血清MMP-9水平比较差异无统计学意义(P> 0.05)。见表1。

表1 三组血清SF、MMP-9、STK1水平比较

*与对照2组比较，P< 0.05；#与对照1组比较，P< 0.05

2.2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比较鳞癌、III期、淋巴结转移患者血清SF、MMP-9、SKT1水平分别高于腺癌、I～II期、非淋巴结转移患者(P< 0.05)；>60岁患者血清MMP-9水平高于≤60岁患者(P< 0.05)。见表2。

表2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比较

2.3 相关性分析NSCLC患者血清SF与MMP-9、STK1水平均呈正相关(r=0.580、0.612，P< 0.05)；血清MMP-9、STK1水平也呈正相关(r=0.563，P< 0.05)。

3 讨论

NSCLC患者预后与肿瘤侵袭、转移密切相关，而肿瘤侵袭、转移复杂，新生血管形成、免疫低下、肿瘤标志物等均可能导致肿瘤浸润、转移。SF属于结合蛋白之一，为人体铁储备重要形式，人体各组织中SF有所表达，特别是骨髓、肝脏及脾脏。有研究表明SF与恶性肿瘤发生有关[7]。范国华等[8]研究发现相比肺良性病变，肺癌患者血清SF水平明显高，且与肺癌患者病理类型、肿瘤直径、分化程度、临床分期可能有关。认为血清SF可能参与肺癌发生、发展过程。同时该学者提出SF不稳定一说，假阳性率较高。对此需联合其他指标或检查手段进一步诊断。周晶等[9]研究发现SF对NSCLC诊断敏感度、特异度分别为62.86%、86.00%，联合C反应蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)检测NSCLC的敏感度、特异度分别为87.14%、51.00%。可见SF联合CRP、CEA能显著提高NSCLC诊断敏感度，但不会提高其特异度。本研究结果显示相比肺部良性疾病、健康人员，NSCLC患者血清SF水平显著高，提示NSCLC患者多出现铁超载现象。分析其原因：相关致癌理化因子对人体铁代谢影响，减少铁排出量，人体内铁储备增多，此时抽血检测血清SF升高；同时炎症等对SF有一定的诱导作用，这是肺部良性疾病患者SF比健康人员高的原因之一。同时本研究发现NSCLC不同病理分型、TNM分期、淋巴结转移与否患者血清SF水平存在显著差异，提示血清SF明显上升可能倾向鳞癌，且其显著表达与NSCLC分期、淋巴结转移有关。

细胞基膜、细胞基质被认为是肿瘤侵袭、转移的天然屏障，肿瘤细胞通过之且往远处转移，这个过程中诱导机体形成蛋白酶类，对细胞基质降解。相关报道发现，NSCLC患者血清MMP-9水平与肿瘤浸润、转移密切相关，可作为NSCLC预后预测重要指标[10]。MMP-9为MMPs家族成员之一，其相对分子质量大，它被激活后对I、V、IV、VII、X型细胞外基质(如胶原蛋白、纤维黏连蛋白等)有不同程度的降解作用，促使肿瘤细胞易穿过基底膜浸润结缔组织基质，进而促肿瘤侵袭、转移。徐晓艳等[11]研究发现NSCLC组织MMP-9阳性表达率高，且其表达和患者年龄、分化程度、淋巴结转移密切相关。本研究结果显示相比肺部良性疾病患者、健康人员，NSCLC患者血清MMP-9水平显著高，与梁乃超[12]报道一致。本研究还发现血清MMP-9水平可能与NSCLC患者年龄、病理分型、TNM分期、淋巴结转移有关。MMP-9通过对基底膜、细胞外基质降解以促肿瘤细胞往周边组织侵袭[13]。

STK1被证实在多种实体肿瘤中高表达。目前关于STK1与NSCLC的研究以化疗效果评估为主[14]。黄仁飞等[15]对59例NSCLC患者化疗4周期不同疗效患者STK1水平测定，发现化疗4周期后STK1阳性率比化疗前明显降低，且化疗有效者明显比无效者低。认为STK1水平监测能有效评估NSCLC患者化疗效果。本研究结果显示NSCLC患者血清STK1水平相比肺部良性疾病、健康人员显著高，这可能与STK1参与细胞周期调控有关。有文献发现，STK1与肿瘤细胞转化有关，能让S期调控异常，G/S期时STK1水平持续上升，M期时其水平最高[16]。本研究还发现血清STK1水平可能与NSCLC患者病理分型、TNM分期、淋巴结转移有关。另外，本研究还发现NSCLC患者血清SF、MMP-9与STK1水平均正相关。提示血清SF、MMP-9、STK1协同促肿瘤生长、浸润及转移。

综上，血清SF、MMP-9、STK1水平在NSCLC患者中高表达，且其水平与肿瘤病理分型、TNM分期、淋巴结转移密切相关。血清SF、MMP-9、STK1可能协同参与NSCLC发生、侵袭及转移。