持续定时免疫猪瘟疫苗应用效果研究

文│何东旭 周先建 王勋 顾玉美（南京天邦生物科技有限公司）

猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的严重危害养猪业的重大传染病。目前发现的CSFV毒株可分为3个基因型和11个基因亚型，但CSFV抗原性比较保守，只有一个血清型，不同基因型间有很好的抗原交叉，中和抗体水平可以直接反应疫苗免疫产生体液免疫力的高低。接种高效猪瘟细胞疫苗可以有效刺激机体产生体液免疫和细胞免疫，成为当前有效防控猪瘟的重要手段。持续定时免疫的做法，因具有劳动效率高、全群无遗漏、疫苗浪费少的特点，在生产中得到广泛的应用，常见的免疫程序是种猪群每年定时进行3次普免，两次免疫间隔3个月，后备猪使用前按日龄定时进行两次免疫，两次免疫间隔一般为1个月，仔猪通常在25～35日龄定时首免，间隔1个月左右加强免疫一次。本文采用间接ELISA法对国内三个省4家连续使用同一厂家生产的高效猪瘟细胞苗，持续定时免疫1年以上的规模化猪场不同阶段猪群的猪瘟中和抗体水平进行调查，以便于更好地了解，持续定时免疫猪瘟疫苗在临床中的应用效果。

表1 猪瘟中和抗体效价均值

一、材料与方法

1.血样。由安徽、江苏、福建三省4家规模猪场（500头以上经产母猪，连续使用同一厂家生产的高效猪瘟细胞疫苗1年以上的猪场）提供，共437份。

2.检测试剂盒。BioChek猪瘟E2（CSFV-E2）抗体检测试剂盒，产品代码SK106。

3.试验方法。各场分群体采样，1～6胎经产母猪、后备猪、公猪、首免前1日仔猪（即25～35日龄猪只）、首免后20日保育猪（即45～55日龄猪只）、二免后30日商品猪（即90～105日龄猪只）及育肥猪（即120～150日龄猪只）猪分别随机采集血样，分离血清，-20℃保存待检，检测方法按试剂盒说明书方法进行。

二、结果与分析

1.猪瘟中和抗体效价均值及阳性率。猪瘟中和抗体效价均值及阳性率结果显示（见表1、图1）：种猪群猪瘟中和抗体效价均值均处于较高阳性水平，且阳性率均高于94%；首免后20日仔猪（45～55日龄）到二免后30日商品猪（90～105日龄）的猪瘟中和抗体效价均值呈上升趋势，且到育肥中后期（120～150日龄）仍维持在较高水平，二免后30日保育期（90～105日龄）及育肥中后期（120～150日龄）阳性率均高于80%，说明持续定时免疫猪瘟高效猪瘟细胞苗能较好地激发各阶段猪群产生免疫应答，产生较好的临床免疫效果。

首免后20日仔猪（45～55日龄）中和抗体水平偏低，且首免前1日仔猪（25～35日龄）到首免后20日保育猪（45～55日龄）呈下降趋势，首免后20日（45～55日龄）中和抗体阳性率仅为33.3%，分析为首免时母源抗体水平较高，首免后抗体上升延迟所致，实际生产中可以根据母源抗体监测情况，适当延迟首免日或增加首免剂量。

2.猪瘟中和抗体效价离散度。猪瘟中和抗体效价离散度结果显示（图2）：1～6胎母猪以及公猪群中和抗体效价离散度相对其他群体而言更低，且各群体离散度相近，而相对其他群体来说种猪群在实际生产过程中接受了更多次的定时免疫，这就说明多次持续定期免疫可以有效提升猪群中和抗体水平的同时还能提升整体抗体水平的整齐度。调查结果还显示，公猪抗体水平离散度在种猪群中表现为最低，说明公猪免疫应答水平相对其他群体表现最好，持续定期免疫后可以产生更整齐和有效的抗体水平。综合整体调查结果可以说明，持续定期免疫可以有效提升猪群猪瘟中和抗体水平和阳性率，是一种非常有效的免疫方法。

三、讨论

经典猪瘟C株弱毒活疫苗对接种猪免疫保护率接近100%，免疫后3日即可产生良好的免疫保护，不仅能诱导完全的临床保护（不发病），而且能产生完全的保护（不出现病毒血症，不排毒），中和抗体通常在接种后2周产生，通过经典猪瘟C株弱毒活疫苗免疫还可以有效阻止亚临床感染的发生。一般来说，抗体阳性率达到80%以上，就可以有效阻止病毒在猪群的传播。通过免疫实现猪群猪瘟中和抗体水平达到高效价、高阳性率、高整齐度的状态是猪瘟疫苗免疫的理想结果，而这一结果的实现除了受到猪瘟疫苗品质，产品保存、运输条件等因素的影响以外，很大程度上还受到免疫程序可行性的影响。持续定时免疫的免疫方法因为具有可行性强、执行效率高、免疫无遗漏的特点在临床得到了广泛的应用。生产中应加强对持续定时免疫猪瘟疫苗临床效果的监测，以便于了解猪群猪瘟疫苗免疫的真实状态，及时发现临床应用效果的不足，进而进行相应改进和调整，以确保猪群猪瘟疫苗的免疫效果，推进我国猪瘟净化工作进程。

◎图1 猪瘟中和抗体效价均值及阳性率

◎图2 猪瘟中和抗体效价均值及离散度