士酒缓解体力疲劳功能的研究

鞠凤霞

（吉林工商学院粮食学院·吉林长春·130507）

保健酒已有数千年的历史，是中国医药科学的重要组成部分。中国的历代医药著作中几乎无一例外地有药酒治疾健身的记载。保健酒作为一种传统的保健食品剂型，温而味辛，因其能养生健体且满足口感嗜好而广受欢迎[1]。本士酒选用人参、鹿茸、麦冬、肉桂、枸杞子等为主要原料，以白酒为基础酒，在常温下通过浸泡、搅拌、过滤、调配等工艺制成，其成品酒精度为35%vol。其中，人参主产地为我国东北地区，是现阶段我国最为珍贵的药材之一，有“补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、明目开心益智”的功效，现代药理研究表明，人参内含人参皂甙，它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效[2～4]；鹿茸用于医疗保健的历史悠久，应用广泛。鹿茸对生殖系统、免疫系统、抗疲劳、抗肿瘤、神经系统、骨质疏松症等都有一定的作用[5]。麦冬具有润肺清心、养阴生津功效。现代药理研究表明，麦冬具有增强免疫、抗疲劳、降血糖、抗衰老等方面的药理作用[6]。肉桂味甘幸、性大热。能引火归源、温肾助阳、温中补阳、散寒止痛[7]；枸杞的生物活性成分——枸杞多糖具有调节免疫力、清除自由基、抑制肿瘤、降血脂、降血糖、降血压及抗疲劳等作用[8]。配方中人参、鹿茸、麦冬为可用于保健食品的原料，肉桂、枸杞为药食两用原料，配伍安全。通过动物实验验证该士酒的缓解体力疲劳功能。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

受试物：某公司提供中试产品，受试物为20.83倍浓缩液，折成人体日服用量为：4.80mL/人/日（体重60kg计）。

动物：选用上海西普尔-必凯实验动物有限公司繁殖的SPF级CI/F1代健康雄性小鼠200只，生产许可证号SCXK （沪）2013-0016，合格证编号：2008001670384。实验动物在温度为20～26℃、相对湿度为40%～70%的南京医科大学卫生分析检测中心屏障环境中饲养。实验动物使用许可证号：SYXK(苏)2015-0009。辐照灭菌饲料由江苏省协同医药生物工程有限责任公司提供，生产许可证：苏饲证（2014）01008。

仪器与试剂：T-1000型电子天平、JA-2003型电子天平、JJ-100型电子天平、离心机、水浴锅、多功能酶标仪、SBA-40E生物传感分析仪、游泳箱 (大小约50cm×50cm×40cm)、铅丝、计时器。血浆尿素测定试剂盒、肝糖原测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 剂量选择与受试物给予方式

受试物为士酒20.83倍浓缩液，该受试样品的人体推荐量为4.80mL/人/日（体重60kg计）。设0.40mL/kg·bw/d、0.80mL/kg·bw/d、2.40mL/kg·bw/d 三个剂量组 （分别相当于受试样品人体推荐摄入量的5倍、10倍、30 倍），另设一个酒基对照组（0mL/kg·bw/d）和一个空白对照组（0mL/kg·bw/d）。酒基对照组以15%的酒基代替受试物，空白对照组以无菌水代替受试物。厂家提供95%(v/v)的酒基进行各剂量组受试物的配制，调整各剂量组的乙醇浓度为15%。低、中、高剂量配制浓度分别为4.0%、8.0%、24.0%。经口每日一次给予小鼠相应剂量的受试物，小鼠灌胃量为0.1mL/10g·bw。连续灌胃一个月后测定各项指标。

1.3 实验方法

1.3.1 负重游泳实验

末次给小鼠受试物30min后，置于游泳箱中游泳，水深约35cm，水温25℃±1℃，鼠尾根部负荷5%体重的铅丝。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠负重游泳时间。

1.3.2 血浆尿素测定

末次给小鼠受试物30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后立即眼眶采血。血液离心后，吸取20μL血浆，用二乙酰—肟法测定血浆尿素值。

1.3.3 肝糖原测定

末次给小鼠受试物30min后，立即处死，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏75mg，加入碱溶液0.225mL，煮沸20min，配制成1%肝匀浆液，取1%肝匀浆液0.1mL，加2mL蒽酮试剂，煮沸5min，冷却后在620nm波长比色测定，根据所称取的肝脏重量计算肝糖原含量。

1.3.4 血乳酸测定

末次给小鼠受试物30min后眼眶采血。然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止，立即眼眶采血，休息20min后再眼眶采血测定小鼠血乳酸含量。SBA-40E生物传感分析仪测定乳酸方法：取血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞。直接从乳酸仪上读数。实际值（mmoL/L）=测得值×3 1.4实验数据统计：用SPSS10.0软件对各实验原始数据进行方差齐性检验，满足方差齐要求的数据资料用单因素方差分析方法中多个实验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理；对非正态分布或方差不齐的数据资料进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换所得的数据进行统计处理。对非正态分布的数据用秩和检验进行统计处理。 两组间的比较用t检验。

2 结果与分析

2.1 士酒对小鼠体重的影响

由表1可见，基酒对照组、各剂量组小鼠的初始体重与空白对照组比较无统计学意义，表明各组动物的初始体重是均衡的。

基酒对照组小鼠的中期体重、结束体重与空白对照组比较无统计学意义，3个剂量组小鼠的中期体重、结束体重与基酒对照组比较均无统计学意义

表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

剂量(mL/kg·bw/d)动物数(只)Ⅰ组初始体重(g) P Ⅰ组终末体重(g)增长值(g) P 0(空白对照) 10 20.65±1.12 0.918 26.91±0.87 6.26±1.56 0.883 0(酒基对照) 10 20.60±1.02 26.75±1.37 6.15±1.72 0.40 10 20.63±0.94 1.000 26.51±0.93 5.88±1.36 0.938 0.80 10 20.66±0.85 0.998 27.44±0.86 6.78±0.92 0.574 2.40 10 20.66±0.78 0.998 27.56±0.89 6.90±1.07 0.440

续表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

续表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

剂量(mL/kg·bw/d)动物数(只)Ⅱ组初始体重(g) P Ⅱ组终末体重(g)增长值(g) P 0(空白对照) 10 20.66±1.11 0.950 27.44±1.25 6.78±1.58 0.595 0(酒基对照) 10 20.63±1.00 27.05±1.16 6.42±1.38 0.40 10 20.62±0.93 1.000 26.49±1.18 5.87±1.57 0.727 0.80 10 20.65±0.84 1.000 26.72±1.53 6.07±1.25 0.906 2.40 10 20.66±0.78 1.000 26.91±1.23 6.25±1.53 0.987

续表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

续表1 士酒对小鼠体重的影响(±s)

剂量(mL/kg·bw/d)动物数(只)Ⅱ组初始体重(g) P Ⅱ组终末体重(g)增长值(g) P 0(空白对照) 10 20.65±1.08 0.914 27.54±1.24 6.89±1.73 0.595 0(酒基对照) 10 20.60±0.95 27.08±1.41 6.48±1.65 0.40 10 20.66±0.87 0.997 26.99±1.41 6.33±1.71 0.994 0.80 10 20.63±0.77 1.000 27.03±1.54 6.40±1.64 0.999 2.40 10 20.64±0.77 0.999 26.31±1.38 5.67±1.70 0.575

续表1 士酒对小鼠体重的影响 (±s)

续表1 士酒对小鼠体重的影响 (±s)

剂量(mL/kg·bw/d)动物数(只)Ⅱ组初始体重(g) P Ⅱ组终末体重(g)增长值(g) P 0(空白对照) 10 20.63±1.04 0.964 27.05±1.40 6.42±1.91 0.721 0(酒基对照) 10 20.61±0.94 27.31±1.14 6.70±1.51 0.40 10 20.63±0.85 1.000 26.58±1.30 5.95±1.35 0.444 0.80 10 20.64±0.77 1.000 26.97±0.87 6.33±1.03 0.863 2.40 10 20.64±0.73 1.000 26.53±1.28 5.89±1.31 0.383

2.2 士酒对小鼠负重游泳时间的影响

由表2可见，空白对照小鼠负重游泳时间与酒基对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。高剂量组小鼠负重游泳时间显著长于酒基对照组（P＜0.05）。

表2 士酒对小鼠负重游泳时间的影响(±s)

表2 士酒对小鼠负重游泳时间的影响(±s)

（m L/k g·b w/d）动物数(只) 负重游泳时间(秒) P 剂量0(空白对照) 1 0 4 6 1±1 3 2 0.3 5 9 0(酒基对照) 1 0 5 1 0±9 6 0.4 0 1 0 5 2 4±1 1 3 0.9 9 1 0.8 0 1 0 6 2 7±1 8 6 0.1 5 8 2.4 0 1 0 6 7 2±1 3 8 0.0 3 2

2.3 士酒对小鼠游泳后血浆尿素水平的影响

由表3可见，空白对照小鼠血浆尿素水平与酒基对照组比较无显著差异 (P＞0.05)。低、中、高剂量组小鼠血浆尿素水平显著低于酒基对照组(P＜0.05)。

表3 士酒对小鼠游泳后血浆尿素的影响(±s)

表3 士酒对小鼠游泳后血浆尿素的影响(±s)

（m L/k g·b w/d）动物数(只) 血 浆 尿 素剂量(m m o l/L) P值0(空白对照) 1 0 9.9 5±1.0 1 0.6 6 8 0(酒基对照) 1 0 9.7 7±0.8 6 0.4 0 1 0 8.5 3±0.9 3 0.0 0 8 0.8 0 1 0 7.7 3±0.9 4 0.0 0 0 2.4 0 1 0 8.4 5±0.7 6 0.0 0 5

2.4 士酒对小鼠肝糖原储备量的影响

由表4可见，空白对照小鼠肝糖原储备量与酒基对照组比较无显著差异 (P＞0.05)。高剂量组小鼠肝糖原储备量显著高于酒基对照组(P＜0.05)。2.5士酒对小鼠游泳前后血乳酸值及其曲线下面积的影响

表4 士酒对小鼠肝糖原储备量的影响(±s)

表4 士酒对小鼠肝糖原储备量的影响(±s)

（m L/k g·b w/d）动物数(只) 肝 糖 原剂量(m g/g肝) P值0(空白对照) 1 0 2 5.4±3.5 0.5 0 9 0(酒基对照) 1 0 2 3.7±6.9 0.4 1 0 2 1.6±3.9 0.6 6 3 0.8 0 1 0 2 9.2±5.9 0.0 5 0 2.4 0 1 0 3 2.3±1.7 0.0 0 1

由表5可见，空白对照小鼠游泳后血乳酸曲线下面积值与酒基对照组比较无显著差异(P＞0.05)。中剂量组小鼠游泳后血乳酸曲线下面积值显著低于酒基对照(P＜0.05)。

表5 士酒对小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲线下面积的影响(±s)

表5 士酒对小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲线下面积的影响(±s)

剂量（m L/k g·b w/d）动物数(只)安静血乳酸值运动后0分钟血乳酸值运动后休息2 0分钟血乳酸值血乳酸曲线下面积值 P值0(空白对照) 1 0 1.9 9±0.7 3 4.0 0±0.5 8 3.0 1±1.1 6 1 0 0±1 8 0.2 9 3 0(酒基对照) 1 0 1.7 8±0.5 4 3.7 3±0.7 5 2.6 9±0.4 8 9 2±1 6 0.4 0 1 0 1.6 7±0.7 5 3.3 4±0.6 1 2.0 8±0.2 8 7 9±8 0.0 6 8 0.8 0 1 0 1.3 0±0.4 3 3.0 3±0.6 1 2.1 0±0.3 3 7 3±1 1 0.0 0 4 2.4 0 1 0 1.7 0±0.4 8 3.0 8±0.8 3 2.4 8±0.6 1 7 9±1 2 0.0 7 4

3 讨论

体力疲劳即运动性疲劳，运动耐力的提高是抗疲劳能力加强的最直接表现，负重游泳时间是反映动物运动耐力的重要指标[9]。士酒可以显著地延长小鼠负重游泳的时间，说明其具有提高运动耐力的作用；低、中、高剂量组小鼠血浆尿素水平显著降低；可以增加小鼠肝糖原的储备量，降低剧烈体力劳动后糖原的消耗；乳酸是糖无氧酵解的产物，长时间剧烈运动使体内乳酸堆积而引起运动性疲劳，运动停止后糖酵解停止，乳酸被不断清除，血乳酸则逐渐降低，疲劳得以恢复。因此，血乳酸水平也是反映机体疲劳程度的重要指标。中剂量组小鼠运动后血乳酸含量显著降低，说明士酒能减少运动时动物血乳酸的堆积。综上可知，士酒具有缓解体力疲劳的作用。