人工栽培苍术的含量测定

张宏莲 孙辑凯 李宏铃 刘玉露

摘   要：对人工栽培苍术进行检测，与市售苍术饮片比较，用以评判栽培品的质量，用于衡量人工栽培的技术成熟程度。采用薄层色谱法（TLC）鉴别人工栽培品是否含有指标性成分，采用高效液相色谱法（HPLC）对指标性成分进行含量测定，并进行方法学考察。经TLC法鉴定，苍术栽培品中含有苍术素，且含量测定结果显示，连锁药店市售北苍术饮片中苍术素的含量分别为1.1671%、0.7611%、0.7326%，苍术栽培品中苍术素的含量为0.8366%。人工栽培的苍术含有指标性成分，且符合法定标准的要求，提示苍术的人工栽培技术基本成熟，可拟应用于农业生产。

关键词：人工栽培  苍术素  HPLC  TLC  含量测定

中图分类号：R283                                  文献标识码：A                        文章编号：1674-098X（2019）02（c）-0240-02

苍术是菊科苍术属植物苍术的根茎，在我国分布广泛，主要产自内蒙古自治区东北部、山西省以及东北三省[1-2]，在我国有悠久的临床应用历史。相关医药学理念指出，北苍术具有独特的化学成分和较为显著的的药理活性，目前，已有研究表明北苍术具有良好的抗溃疡、抗心律失常、降血压、利尿、保肝、抗炎等作用[3-4]，临床应用广泛，致使野生苍术的资源匮乏，因此人工栽培苍术是必要的选择，具有现实意义。

人工栽培技术的应用是解决市场上苍术窘境的有效途径，但是，仿野生品的质量有待于借助实验手段予以评价。本实验依据2015版《中国药典》[5]，以连锁药店市售的苍术饮片为衡量标尺，以指标性成分为标准，对人工栽培的苍术进行鉴别和含量测定，客觀地评价栽培苍术的质量，以期反映栽培技术的效果，为更合理开发中草药资源，更合理控制中草药市场提供实验依据。

1  实验材料

仪器：Waters E2695高效液相色谱仪（美国沃特世科技有限公司）、手动中药切片机（温岭市林大机械有限公司）、MDF-492超低温冰箱（日本三洋公司）、高速多功能粉碎机（永康市敏业工贸有限公司）、PALL水纯化系统（Pall Corporation公司）、ML203T/02十万级电子天平（梅特勒--托利多）。

试剂：甲醇（色谱级）、石油醚（60～90℃）和丙酮（分析纯）。

实验样品：栽培品标记为CZ;随机选购苍术饮片，分别标记为CZ1、CZ2、CZ3，对照品为苍术素，采购于中国食品药品检定研究院。

2  实验方法

2.1 待测溶液

TLC对照溶液：0.2mg·mL-1苍术素甲醇溶液，TLC样品溶液：以生药量计，为0.08g·mL-1甲醇溶液。

HPLC对照溶液：0.2μg·mL-1苍术素甲醇溶液，HPLC样品溶液：以生药量计，为0.004g·mL-1甲醇溶液。

2.2 TLC鉴别

照《薄层色谱法检验标准操作程序》（附录ⅥB）试验[5]，吸取供试品溶液6μL与对照品溶液2μL，将供试品溶液与对照品溶液分别通过毛细管点于同一个硅胶G薄层板上，采用石油醚（60～90℃）-丙酮（9：2）作为展开剂，展开，取出，晾干，往硅胶G薄层板上喷10%硫酸乙醇溶液，放入烘箱加热，直至斑点显色清晰后取出。观察薄层色谱板，在与对照品色谱同一高度的位置上，应显示相同颜色的斑点。

2.3 HPLC含量测定

2.3.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18（2）（250×4.6mm，5μL）;流动相：A：甲醇，C：水，按A：C=79：21;进样量：10μL;流速：1mL·min-1;检测波长：340nm。

2.3.2 含量测定

分别精密吸取HPLC样品溶液20μL，分别进样3次，按“2.3.1”项下色谱条件，分别测定，计算不同样品中苍术素的含量。

3  实验结果

3.1 TLC鉴别结果

通过观察对比，发现在薄层板上有若干斑块，其中在与对照品溶液色谱对应的位置上，显墨绿色斑块，其中CZ1和CZ2斑块颜色较深，CZ比CZ3样品颜色深。

3.2 含量测定结果

经HPLC测定，CZ苍术素的含量为0.8366%，CZ1、CZ2、CZ3中苍术素的含量分别为1.1671%、0.7611%、0.7326%，均高于2015年版《中国药典》一部正文的规定（>0.30%），如图1所示。

4  讨论

表观鉴别常常通过观察外观、断面颜色、油室的数量、药材的气味等方式来判定北苍术的品质优劣，在本实验中，我们采用TLC以及HPLC方法，简要、客观地直接对人工栽培苍术进行评价，方法简洁，适用于基层食药检测。

通过TLC法的鉴定与HPLC法检测，我们发现，不同的来源，北苍术中苍术素的含量也是不同的，表明生态环境或者炮制方法是影响药材质量的因素，同时，向我们提示在今后的人工栽培过程中，需要注意调控土壤、光照、水分、施肥及防虫治虫等影响这类经济农作物质量的因素，以实现增产保量的目的。

5  结语

本实验中，人工栽培苍术含有指标性成分，与市售同类饮片相比，苍术素的含量居中，且高于法定药品标准的规定，提示苍术栽培品具有市场竞争力，人工栽培技术可拟被推广。

参考文献

[1] 王强，林昌松.论经方中的白术或为苍术[J].中华中医药杂志，2017（5）：2043-2046.

[2] Plengsuriyakarn T， Matsuda N， Karbwang J， et al. Anticancer Activity of Atractylodeslancea（Thunb.） DC in a Hamster Model and Application of PET-CT for Early Detection and Monitoring Progression of Cholangiocarcinoma [J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention Apjcp，2015，16（15）：6279.

[3] 杨靖，彭晶晶，芦夏阳，等.苍术的研究进展[J].陕西农业科学，2018，64（4）：77-80.

[4] 陈佳，解小霞，刘合刚.几个道地产区茅苍术指纹图谱及苍术素含量测定研究[J].中国实验方剂学杂志，2013， 19（10）：125-127.

[5] 国家药典委员会.中国药典（一部2015年版）[M].北京：化学工业出版社，2015.