女性膀胱过度活动症患者尿液中脑源性神经营养因子的表达及意义

张杰，潘永军

(重庆市第九人民医院泌尿外科，重庆 400700)

膀胱过度活动症(overactive bladder，OAB)为以尿急为表现特征的症状群，在我国的发病率高[1]。患者常有夜尿、尿频症状，有时还伴有急迫性尿失禁，尿流动力学上表现出逼尿肌的过度活动[2]。目前，临床上尚缺乏准确、客观、实用的检测方法对OAB作出诊断和疗效评估，诊断主要是根据患者的主诉与症状，通过完善相关检查除外其它疾病进行排除性诊断。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的生成主要是小型到中型的各种肽能神经细胞，非神经细胞也可以产生，比如膀胱上皮细胞[3]，是人身体内数量最多的神经营养因子之一。国外有研究[4]报道，女性OAB患者尿液中的BDNF表达水平高于对照组，并由此认为，BDNF可能成为OAB的生物诊断标记物。本研究旨在通过探讨我国女性OAB患者尿液中BDNF的表达水平及其与OAB严重程度的相关性，为临床能更确切诊断该病寻找新途径及方法。

1 材料与方法

1.1 研究的对象

40例研究组对象来为自2015年2月至2016年5月在重庆市第九人民医院泌尿外科泌尿外科诊断为OAB的女性患者，年龄18～59岁，平均年龄(36.5±7.8)岁。对照组30名女性为健康志愿者，年龄19～58岁，平均(34.3±7.6)岁。两组年龄比较，差异无统计学意义(P>0．05)。全部研究对象都由院伦理委员会进行了严格的审查，并签署了知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 诊断的标准 OAB的诊断标准参照《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》[2]：特征表现为尿急，常常合并有尿频、夜尿症状(每个夜间排尿≥2次，每昼夜排尿≥8 次)，膀胱排空后往往仍有尿意；常常合并有突然的强烈的紧迫排尿感，伴有或者没有急迫性的尿失禁表现。尿动力学往往有逼尿肌的活动过度。

1.2.2 纳入及排除标准 (1)纳入标准：①患者女性，有尿急的症状，符合OAB诊断的标准；②尿常规检查、尿培养检查均为阴性；③按照膀胱过度活动症的评分(overactive bladder symptom scores，OABSS)标准[5]，尿急症状得分≥2 分，总得分≥3 分。其中，3 分

1.2.3 BDNF的表达水平测定 在清晨膀胱充盈想排尿时，采集所有研究对象尿液30 mL(室温)，离心10 min(4 ℃ 5 000 r/min)后，用1.5 mL的冻存管分装上清液，每个尿液标本留取3份上，置-80 ℃冰箱保存备用。采用酶联免疫吸附测定方法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，严格按照试剂说明书操作检测BDNF(ELISA试剂盒由钰博生物有限公司提供)，每份尿液标本均进行3 次重复检测，取平均数做为最终BDNF值，结果标准化采用BDNF/Cr值(pg/mg)为最后分析比较指标。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 尿液中BDNF/Cr表达水平

OAB组尿液中BDNF/Cr表达水平(892.1±420.7 pg/mg)显著高于对照组(150.6±63.5 pg/mg)，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 尿液中BDNF/Cr表达水平

*P<0.05，与对照组相比。

2.2 不同严重程度OAB患者尿液BDNF/Cr表达

根据OABSS评分，轻度、中度、重度OAB患者尿液BDNF/Cr平均值分别为(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，两两比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

组别例数尿液BDNF/Cr(pg/mg)轻度9560.2±274.5中度20825.3±402.6∗重度111148.5±510.2#

*P<0.05，与轻度相比；#P<0.05，与中度相比。

2.3 尿液BDNF/Cr与OABSS的相关性

40例OAB患者尿液BDNF/Cr与OABSS呈正相关(r=0.619，P<0.01)，差异有统计学意义。见图1。

3 讨论

BDNF是由119个氨基酸残基组成的一种碱性蛋白质，分子量为13.15道尔顿，含有3对二硫键[6]，主要是由肽能神经元细胞生成，也可由非神经元细胞产生，分布于周围神经系统、中枢神经系统、内分泌系统、膀胱组织和骨等广泛区域内，对神经元的发育、生长、分化、存活等起着十分重要的作用[7]，是人体内一种重要的神经营养因子。

BDNF除了与神经系统疾病如老年性痴呆、急性神经系统损伤等的发生和发展密切相关，也与泌尿系统疾病(如膀胱功能障碍)之间可能存在一定相关性。动物实验研究发现[8]，在大鼠的膀胱内灌注环磷酰胺诱发膀胱炎，会导致大鼠膀胱里BDNF表达水平明显升高，但如果将肉毒素A注射到膀胱壁则会降低BDNF的表达，进而降低大鼠膀胱逼尿肌反射性，改善大鼠的膀胱功能。另有研究[9-10]显示，间质性膀胱炎/膀胱疼痛综合征患者尿液中BDNF表达水平升高，在经过透明质酸治疗或者膀胱内注射肉毒杆菌毒素治疗后，其表达水平会显著下降。还有研究[11]认为，膀胱感觉传入神经中酪氨酸激酶受体B的激活可能和周围组织中BDNF表达水平的升高密切相关。

OAB是泌尿系统的常见疾病，主要表现为膀胱功能障碍，其具体发病机制至今还未明确。近年来，神经营养因子在OAB中的作用受到越来越多学者的关注。国外Antunes-Lopes等[12-13]的研究发现，BDNF在健康志愿者尿液中的表达水平较低，而OAB患者尿液中的BDNF表达水平则显著升高，且与尿液取样时间(早晨、中午、晚上)无关。在3个月的行为方式调节治疗后，随着临床症状的减轻，OAB患者尿液中BDNF的表达水平则明显下降。国内胡浩等[14]发现，合并有OAB的良性前列腺增生患者的膀胱尿液BDNF表达水平升高明显，且该组患者尿液中的BDNF表达水平与OAB症状严重的程度基本呈正相关性。Wang等[15]的研究也显示，女性OAB人群尿液BDNF的表达水平比正常人明显升高，而且尿液BDNF在诊断膀胱过度活动的敏感性等方面要优于神经生长因子，更适合作为OAB的诊断指标。

本研究在研究对象的选择上采取了严格的排除标准，尽可能排除神经系统相关疾病对结果的干扰。结果显示，40例女性OAB组尿液中BDNF/Cr的表达水平明显高于对照组，且 BDNF/Cr与OABSS呈正相关(r=0.619，P<0.01)，与文献报道[12-15]一致。根据OABSS评分，BDNF/Cr在轻、中、重度OAB患者尿液中表达水平分别为(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，表明OAB患者尿液BDNF/Cr表达水平随病情严重程度增加而升高。

综上所述，女性OAB患者尿液中BDNF的表达水平明显升高，且与病情严重程度有关。BDNF可能在OAB的发病机制中起着重要作用，有望成为诊断OAB的无创、有效、客观的标记物。但女性健康人群尿液中BDNF正常值的参考范围及女性OAB诊断临界值的确定，仍有待更深入研究。