不同储存温度对白僵菌孢子活性的影响

张力泉 张建华 查玉平 夏剑萍

(1. 当阳市王店林业管理站 宜昌 444100；2.当阳市森防站 宜昌 444100； 3.湖北省林业科学研究院 武汉 430075)

白僵菌是一种真菌高效生物杀虫剂，广泛应用于农林害虫的生物防治，具有安全环保、专一性强等优点[1]。有研究表明，白僵菌在10～30 ℃时均能生长，5 ℃和35 ℃时则基本上停止生长[2]。白僵菌工业化生产中，白僵菌粉剂的储存是其中关键之一。目前生产中，白僵菌粉剂储存温度一般采取0～4 ℃。本研究拟对冷库不同储存温度储存一定时长的白僵菌粉剂的活性影响进行试验研究，为进一步找到合适的大量白僵菌粉剂存储温度提供依据。

1 材料和方法

1.1 供试菌种

S16、D16、J16三种白僵菌菌株培养提纯的白僵菌高孢粉，来源于当阳市兴林白僵菌研发中心。

1.2 方法

储存白僵菌高孢粉：分别将同一批次的同等质量、体积的白僵菌高孢粉塑料袋封存，置于0,1,2,3,4 ℃冷库中、常温地下室储存4个月。

储存温度对白僵菌孢子活性影响的测定：

(1)储存温度对白僵菌生长影响的测定：将0,1,2,3,4 ℃冷库中、常温地下室储存4个月的白僵菌高孢粉取出复苏，每组接种5个培养皿，26 ℃、PDA培养基中培养7 d。菌株生长的观察：菌株在培养1周后，在超净工作台上用解剖镜观察其生长情况。

(2)储存温度对白僵菌活孢率影响的测定：将0,1,2,3,4 ℃冷库中、常温地下室储存4个月的白僵菌高孢粉取出复苏，用真菌液体培养基培养24 h后检测活孢率。以上两组试验，每处理设2个重复，以同批次刚产出白僵菌高孢粉活孢率做空白对照。

统计分析：测定各组白僵菌的菌落在培养皿上的直径、活孢率取平均值。用新复极差法(SSR)进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同储存温度对白僵菌生长的影响

表1 不同储存温度对白僵菌生长的影响

由表1可以看出，生长率(mm/周)统计结果：白僵菌在刚生产出来0m储存(空白组)，生长最佳；在0～4 ℃之间，白僵菌均能够生长，但以0 ℃和1 ℃低温储存条件下，生长情况相对较好；其中以地下室常温(25 ℃)储存效果最差；此外，不同菌种在同一储存温度值下的生长速度尽管有差异，但基本上差异不大。

2.2 不同储存温度对白僵菌活孢率的影响

表2 不同储存温度对白僵菌孢子活孢率的影响

由表2可见，白僵菌(空白组)在刚生产出来的活孢率最高；在0～4 ℃之间，白僵菌活孢率高低依次是0,1,4,2,3℃；但是地下室常温组(25℃)活孢率显著降低。

3 讨论

本研究结果表明：在0～4 ℃的冷库条件下，白僵菌孢子处于干燥、低温停止生长的环境条件，孢子处于休眠状态，活性保持完好，置于地下室常温(25 ℃)，仍处于白僵菌孢子生长所适条件，白僵菌孢子继续萌发生长，但因缺少营养、其他微生物竞争生长，白僵菌孢子逐渐失去活性甚至衰亡。由此可见，白僵菌如果需要储存一段时间，以0～1 ℃储存效果较好，不适合暴露于地下室常温(25 ℃)。白僵菌比较适合的储存温度为0～1 ℃,而且环境必须干燥清洁，综上将白僵菌高孢粉封存后储存于0～1 ℃冷库最为适宜。上述结论对进一步开展大量存储白僵菌高孢粉提供了参考依据。

白僵菌作为我国新型高效、绿色生物杀虫剂，具有广泛的市场前景。多年来实践表明，白僵菌防治松毛虫、玉米螟等农林害虫具有很好的防效[3-4]。但受限于白僵菌生长条件，白僵菌高孢粉生产具有很强的季节性，因此将白僵菌储存一定时间，并有效保持其生物防虫的活性是白僵菌项目研究一个重要领域。