柴胡的真伪鉴别※

谢嘉驰 李亚兰 彭江丽 肖冰梅* 王 兴*

（1 湘潭市中医医院药学部，湖南 湘潭 411100；2 湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208）

柴胡为伞形科植物柴胡 Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡 Bupleurum scorzoneri folium Willd.的干燥根。根据性状区分，我们将其称为“北柴胡”和“南柴胡”。柴胡［1］首次记载于在《神农本草经》，具有和解退热，疏肝解郁，升提中气功效，临床应用广泛。其入汤剂有用来治疗寒热往来感冒的小柴胡汤，治疗肝郁血虚导致月经不调的逍遥散。《中国植物志》中记载，我国柴胡属（Bupleurum） 植物多达 36种。近年由于柴胡在临床上使用量增大，产量低，正品柴胡常常不能满足市场的需求，导致多种柴胡的混伪品进入了药材销售市场［2］。为保证临床上患者用药安全及药效质量，对高桥药材市场购买的样品进行系统的鉴别研究。通过对样品与正品柴胡在性状特征、显微特征及理化反应进行系统对比研究，以确定该柴胡的真伪，为柴胡的真伪鉴别提供简便可行的实验研究方法，为临床用药提供可靠依据。

1 仪器、试剂与材料

1.1 仪器 显微镜（厂家：Motic型号：BA210LED）；培养皿；剪刀；刀片；牛角勺；滤纸；载玻片；盖玻片；镊子；解剖针；文具盒；酒精灯；打火机；粉碎机；玻璃烧杯；试管；胶头滴管；25 mL量筒；10 mL量筒；水浴锅。

1.2 试剂 水合氯醛液；稀甘油；甲醇；蒸馏水；95%乙醇；冰醋酸；硫酸；对二甲氨基甲醛；磷酸。

1.3 材料 从高桥药材市场采购柴胡药材，由湖南中医药大学药学院中药鉴定学教研室肖冰梅老师鉴定均符合《中国药典》2015年版项下规定。

2 方法

取样品和柴胡饮片分别用蒸馏水浸泡 24 h，待其充分吸水膨胀时及时取出按常规制片法制作组织横切片，用水合氯醛透化后置于显微镜下观察。取中药材，烘箱干燥后，用打粉机打成粉末并过100目筛网以备用。分别取适当粉末制成透化装片置于显微镜下观察并记录比较两者间的显微特征。取样品粉末和正品柴胡粉末各进行理化鉴别反应。

2.1 徒手切片法 取已被蒸馏水浸泡过的药材，选择合适的部位，将其两端削平；注意手拿刀片的姿势，防止使用不当造成刀片损伤手指。切片时刀片应与材料相垂直并且应用臂力切片，若使用腕力，则很难切得均匀透明。切的过程中刀片不能离开食指，否则易造成厚薄不均，注意动作要敏捷迅速，不能中途停顿或是做拉锯式切割。将刀片上的切片移入盛有水的培养皿中，选取较薄且完整均匀的切片置于载玻片上；在滴加适量的水合氯醛液后于点燃的酒精灯上加热，当水合氯醛液因加热而减少时，及时用胶头滴管添加，重复数次直至切片透化完成；滴加 1～2滴稀甘油，用镊子夹取洁净盖玻片，从左至右沿液面轻轻覆盖，以防气泡产生影响观察。盖玻片外溢出的的液体用吸水纸轻轻吸去，置于显微镜下观察。

2.2 水合氯醛法 用牛角勺取适量样品粉末和正品粉末置于载玻片上，滴加水合氯醛液1～2滴后在点燃的酒精灯上边加热边用解剖针适当搅拌，这样可使装片受热均匀防止沸腾。当试液因加热渐渐挥干时，再次滴加水合氯醛液1～2滴，反复数次，透化完成后，用镊子夹取干净无水的盖玻片沿液面从左至右覆盖，保证试液充满盖玻片下方并无气泡。

2.3 泡沫反应 取样品粉末和柴胡粉末各 0.5 g，分别置于具塞试管中，加水10 mL，用力振摇，观察现象。

2.4 显色反应 （1）取样品粉末和柴胡粉末各1 g，加入10 mL冰醋酸，浸提12 h后过滤，将滤液置于干燥洁净的试管中，各缓缓加入浓硫酸 0.5 mL，观察现象［3］。（2）取用水润软的样品饮片和正品柴胡饮片，切取横切片，用胶头滴管滴加配比好的硫酸和无水乙醇的等量混合液 1滴，观察现象［3］。（3） 取样品粉末和柴胡粉末各0.5 g，分别加10 mL甲醇，用力振摇后再静置30 min，过滤，各取0.5 mL滤液于干燥洁净的试管中，分别滴加0.5 mL的对二甲氨基甲醛的甲醇溶液（1∶30），摇匀后再滴加2 mL磷酸，水浴加热，加热时温度不宜太高，观察现象［3］。

3 结果

3.1 性状鉴别 样品饮片外观呈现为长圆柱形，直径较小，弯曲。根头部明显可见膨大，并有较多支根、根头部残留多数茎基和叶基。饮片长约为5～7 cm，直径约为0.3～0.6 cm。饮片外表皮为灰褐色或黑褐色，摸起来粗糙。质地较松脆，折断后较平坦，可见片状纤维性。皮部较薄，且易与木部分离。气微香，味微苦［4］。

正品柴胡饮片外观呈圆柱形，部分有分支，直径0.3～0.8 cm。根头部的膨大不明显，顶端留有茎基和叶基。饮片外表面为浅棕色或黑褐色，外表皮可见纵皱纹和支根痕。质地较硬，有韧性，因此不易折断，断面可见片状纤维性。皮部和木部颜色有较大区别，一为浅棕色，二为黄白色。气微香，味微苦［4］。如图1～3。

图1 正品

图2 样品

图3 样品

3.2 横切面显微特征 正品：木栓层下有7层栓内层细胞；皮层散有油管；韧皮部有红棕色或黄棕色油腔；形成层成环；木质部面积占整个根部面积约为2/3，导管径向排列，木纤维群排列成多个不连续的环状［2］。

样品：木栓层由众多数列细胞构成；皮层分布有油管；韧皮部油管数目众多，排列散在，大小不一；木质部面积占比较小，导管径向排列。如图4～7。

图4 正品

图5 正品

图6 样品

图7 样品

3.3 粉末显微特征 正品：粉末偏黄棕色；木纤维众多，多呈长梭形，，木化较明显；管道中含黄棕色分泌物；木栓细胞大部分为黄棕色，偶见数层重叠，表面观一般呈类多角形，壁较厚；主要为网纹导管，偶见双螺纹导管；薄壁细胞多呈长圆形，类长方形［5］。

样品：粉末偏灰棕色；纤维较少，呈末端钝圆的长梭形；油管多是破断的，管道中含有棕色油状分泌物；多为网纹导管和梯纹导管；薄壁细胞呈长圆形；木栓细胞排列紧密，无色或黄棕色，呈类多角形［6］。如图8～13。

表1 柴胡与伪品区别

图8 正品木纤维

图9 正品油管和导管

图10 正品薄壁细胞

图11 样品木栓细胞

图12 样品导管

图13 样品薄壁细胞

3.4 泡沫反应 振摇后均产生蜂窝状泡沫，样品产生的泡沫明显较对照品少。静置，样品泡沫明显减少，五分钟后泡沫基本消失，而对照品产生持久性泡沫，基本没有变化，如图 14～15。

图14 左为样品，右为对照品

图15 左为样品，右为对照品

3.5 显色反应 2.4.1项下，正品柴胡在液面交接处呈现红棕色环，放置后呈深棕色。而样品无该现象。2.4.2项下，正品柴胡初显黄绿色，5～10 min后由黄绿色变为蓝色，1 h后变为深蓝色，最后消失。而样品无该现象。2.4.3项下，正品柴胡水浴加热后溶液出现淡红紫色。而样品无该现象。

4 小结

根据理化实验结果（表1） 和相关文献［4］，鉴定该伪品为伞形科的小叶黑柴胡。正品与伪品柴胡其药理活性成分不同，临床治疗效果差异明显。进一步证明目前市场上存在伪柴胡混淆用药，危害患者的安全性，政府要加大对其监控力度，维护市场秩序。