2012-2017年梅州市诺如病毒和轮状病毒腹泻监测

何秋瑜 陈志青 邹勇文

病毒性腹泻(viral diarrhea)又称病毒性胃肠炎，由一组多种病毒感染引起的急性胃肠道疾病，广泛存在并流行于世界各地，发展中国家尤为严重[1]。腹泻病已成为一个重要的公共卫生问题，据世界卫生组织报道，全球每年约有17亿例儿童期腹泻病，每年共有52.5万名儿童死于此病，腹泻病是五岁以下儿童的第二大死因[2]。轮状病毒(rotavirus，RV)和诺如病毒(norovirus，NV)是引起病毒性腹泻最主要的病原[3]。为了解梅州市腹泻患者中NV和RV感染情况和流行趋势，掌握其发病的重点人群、高发季节等，以便采取有针对性的防控措施。现对梅州市2012-2017年腹泻患者进行NV和RV分型检测，为梅州市病毒性腹泻的预防控制提供参考。

1 材料与方法

1.1样本来源 采集监测门诊(包括消化内科、肠道门诊、儿科和急诊科)中符合“腹泻病例”监测定义的病人粪便标本和/或呕吐物标本，开展诺如病毒(GI、GII)核酸检测与轮状病毒抗原检测。两家监测哨点分别是梅州市妇幼保健院(今称“梅州市妇女儿童医院”)和梅县人民医院(今称“中山大学附属第三医院粤东医院”)。

1.2仪器与试剂 仪器：ABI 7500 fast PCR仪。试剂：诺如病毒核酸检测采用试剂为核酸提取试剂盒为QIAGEN/西安天隆公司产品，货号52904/52906；Real-time -PCR试剂为TAKARA公司产品，货号204443；轮状病毒抗原ELISA检测试剂盒(酶联免疫法)为德国R-biopharm AG公司产品，产品编号KIB0901。严格按照试剂说明书操作，检测试剂盒均在有效期内使用。

1.3方法

1.3.1样本采集方法与保存： 哨点医院采集粪便和/或呕吐物标本，成型便采3～5 g(“成人拇指头”体积)，水样便采集3～5 mL，采集的标本应置冷冻保存，并于每周一将冷藏标本运送至市级疾控中心开展病毒性腹泻病原(诺如病毒、轮状病毒)检测。

1.3.2检测方法： NV检测采用Real-time PCR方法，以感染性腹泻诊断标准(WS271-2007)为检测依据。RV检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。实验过程中严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.4统计学方法 汇总广东省急性传染病监测信息平台系统2012年1月-2017年12月梅州市重点感染性腹泻监测登记的所有数据，建立Excel数据库。将一年划分为4个季节(1-3月为春季，4-6月为夏季，7-9月为秋季，10-12月为冬季)。用SPSS 24.0软件进行χ2检验处理，以P<0.05为差异有统计学意义。采用描述流行病学方法进行分析。

2 结果

2.1流行概况 2012年1月-2017年12月，因腹泻在梅州市两家腹泻监测哨点医院门诊就诊或住院的患者粪便样本共3 066份，总阳性率为26.84%，差异有统计学意义(χ2=288.96,P< 0.05)。共检出NV阳性406份，阳性率为13.24%，包含GⅠ型7份，GⅡ型399份(占98.27%)，NV阳性率差异有统计学意义(χ2=168.85,P<0.05)；RV阳性417份，阳性率为13.60%，RV阳性率差异有统计学意义(χ2=173.77,P<0.05)。RV阳性率自2013年起呈逐年下降趋势，NV阳性率则呈波动趋势，RV阳性率略高于NV(表1和图1)。

表1 2012-2017年梅州市腹泻病毒监测情况

图1 2012-2017年梅州市诺如病毒和轮状病毒监测情况

2.2流行特征

2.2.1人群分布： 3 066份病例中男性1 816份，女性1 250份，男女性别比为1.45∶1。其中阳性患者的男女性别比NV为1.31∶1，RV为1.45∶1，差异无统计学意义(χ2=0.75,P>0.05，表2)。

表2 不同性别腹泻病毒监测情况

2.2.2年龄分布： 按照年龄不同将病例分为<1岁、1～3岁、4～5岁以及>5岁4组，各年龄组人群均可检出NV和RV阳性，不同年龄组阳性率差异有统计学意义(χ2=28.96,P=0.00)，且以5岁及以下年龄组为主要感染对象，其阳性数占总阳性数的84.81%(表3)。

表3 不同年龄组腹泻病毒监测情况

2.2.3时间分布： 经6年连续监测发现，各月份均能检出NV和RV阳性，NV检出高峰为10月和11月；RV则为1月和2月。与其他各月份比较差异有统计学意义(χ2=144.24,P=0.00)。按季节计算，NV和RV检出情况呈现明显的季节分布特征，以冬春季检出阳性数较多，合计占全年检出阳性数的73%。不同季节阳性率差异有统计学意义(χ2=119.06,P=0.00，图2)。

图2 不同月份腹泻病毒监测情况

3 讨论

3.1监测发现，2012-2017年，梅州市每年检出NV和RV总阳性率呈逐年下降趋势，这可能与轮状病毒疫苗的研制成功并逐步推广有关[4]。近年来，GⅡ型株一直是我国NV引起散发和暴发急性胃肠炎的病原流行优势株[5]。检测显示，NV在梅州市全年各月份均可检出，且以GⅡ型感染为主，达98%，尤其是10月和11月检出率最高。值得注意的是，不同地区时间分布存在差异。有研究报道欧洲和印度等地区夏季为诺如病毒流行高峰[6,7]。

3.22011年全国的检测报告显示，广东省轮状病毒腹泻报告发病数占全国报告总数的50.4%[8]。RV主要通过粪口途径传播，轮状病毒性腹泻患者、隐形感染者以及带病毒者、急性期患者都是轮状病毒的传染源，水样腹泻是主要特征，诊断时需注意与霍乱等鉴别[9]。此次研究发现，梅州市RV 阳性率高于NV，尤其以1-3月份检出率最高，达25.30%。疫情以散发为主，全人群均能感染，但以5岁及以下年龄组为主要感染对象[10]。

综上所述，梅州市2012-2017年腹泻患者中NV发病率呈波动趋势，而RV发病率则呈逐年下降趋势，但仍高于NV发病率。同时由于NV腹泻目前尚无特异性预防措施，今后仍需加大卫生投入，继续加强梅州市NV和RV腹泻监测，以制定有效的综合防治模式，进一步降低NV和RV腹泻发病率。