牦牛和藏羊免疫特性的研究
2019-03-29吴艳清
吴艳清
摘要:针对牦牛和藏羊的养殖技术和疾病防控等方面,目前已经有了彳艮多的研究,但是对于牦牛和藏羊的免疫特性,研究甚少。因此,本文对牦牛和藏羊的免疫特性进行研究,并对牦牛和藏羊血液中红细胞C3b受体、红细胞免疫复合物(lC)、B淋巴细胞C3b受体以及T淋巴细胞E一玫瑰花环等免疫指标进行了测定,以求初步探索牦牛和藏羊的免疫特性。
关键词:牦牛;藏羊;免疫特性
1材料和方法
1.1 材料
牦牛和藏羊研究:所使用的牦牛和藏羊各100頭,其中牦牛的年龄在5~10岁之间,藏羊的年龄在3~5年之间。所有牦牛和藏羊均来自青海。实验所选用的牛羊不需要雌雄限制,通过临床观测其身体健康状况,从静脉采集血液、肝素抗凝。
试剂:研究采用补体致敏酵母菌以及酵母菌多糖等试剂。
1.2 研究方法
1.2.1 红细胞C3b受体、红细胞免疫复合物(IC)的测定 本次研究采用的红细胞不需要使用Ficoll分离液进行分离,可以直接使用生理盐水对其进行离心洗涤,丢弃血液中的大部分红细胞。血液剩余的成分按照1.25 x107个/毫升进行配置,其中添加酵母菌的量与红细胞的比例为10:1。
1.2.2 B淋巴细胞C3b受体的测定 将淋巴细胞悬浊液键入到一支小试管中,然后添加补体致敏酵母菌悬液,两者的量均为0.075毫升。将试管置于37 0C的恒温水浴中进行孵育,时间为30分钟,然后向其中加入0.25%戊二醛生理盐水2滴,进行涂片,镜检200个淋巴细胞,对其中联结3个以上酵母菌的淋巴细胞数目进行记录,从而计算花环百分率。
1.2.3 T淋巴细胞E玫瑰花环的测定
2 结果
根据检测结果显示,100头牦牛的红细胞C3b受体花环率平均数为2.65±1.91,变异系数为72;红细胞IC花环率为4.51±2.75,变异系数为61;B细胞C3b受体花环率为23.24±5.81,变异系数为25;T细胞E玫瑰花环率平均数为7.15±3.62,变异系数为42。藏羊的指标检测结果为红细胞C3b受体花环率平均数为2.10 ±1.09,变异系数为52;红细胞IC花环率为4.51±2.75,变异系数为64;B细胞C3b受体花环率为23.24±5.81,变异系数为21; T-细胞E玫瑰花环率平均数为7.15±3.62,变异系数为31。
3 结果讨论
近年来随着对动物红细胞的研究发现,动物体内存在红细胞免疫系统,血液中的红细胞能够清除循环免疫复合物,起到促进吞噬的作用,红细胞还具有识别和储存抗原、提呈抗原、增强T细胞功能的作用,参与激活动物体内补体系统。C3b受体是血液红细胞免疫功能的前提基础,其位于红细胞膜表面,对于红细胞C3b受体的研究在人类医学领域中较为常见,针对牦牛和藏羊红细胞是否具有C3b受体及免疫黏附功能的研究报告非常少。通过本文对牦牛和藏羊红细胞的研究结果分析,可以开出牦牛和藏羊体内的红细胞与人体红细胞相同,都具有C3b受体,同时也都拥有黏附免疫复合物的能力。因此说明了牦牛和藏羊的红细胞也包含免疫功能。根据国外的研究结果证明,血液的红细胞能够对T淋巴细胞产生Y下干扰素等淋巴因子,对B淋巴细胞产生Smlg,另外红细胞对于NK、LAK的活性以及在T淋巴细胞免疫黏附时,具有调控肿瘤细胞能力作用。对于牦牛和藏羊红细胞是否对机体免疫调节具有重要作用,还需要进一步研究。
通过对牦牛和藏羊血液红细胞进行研究,发现其红细胞具有与C3b受体补体致敏酵母菌相结合的能力,结合后形成花环。牦牛和藏羊红细胞相对于与人类血液红细胞而言,其形成花环的百分率较低。形成这种问题的主要因素可能为牦牛和藏羊血清中存在抑制因子,抑制因子具有阻碍C3b受体活性的作用,而人类的血清中含有这种物质,所以人类血液红细胞C3b受体不会受到抑制。比如在奶牛血清中,含有免疫胶固素,这种物质具有引发红细胞产生凝集的作用,从而影响C3b受体的活性,阻碍了红细胞C3b受体花环的形成。但是影响牦牛和藏羊红细胞C3b受体花环形成的因素目前还不能确定,是否血清中存在抑制因子或者抑制因子是否为免疫胶固素,还需要进一步验证。另外,从牦牛和藏羊的生长环境来考虑,由于牦牛和藏羊长期生长在高原环境中,具有比较特殊的种群属性,所以牦牛和藏羊红细胞C3b受体数量可能会减少,同时其活性也相对降低,因此而导致了牦牛和藏羊红细胞C3b受体花环百分率较低。
4 研究结论
本文研究了牦牛和藏羊免疫特性,对血液T淋巴细胞E-玫瑰花环进行了测定,根据结果显示,牦牛和藏羊的花环百分率均低于其他平原地区的牛羊品种。造成这种问题的主要原因可能是牦牛和藏羊生活在高原地区,由于气候环境的差异,导致红细胞C3b受体花环的形成率低。血液B淋巴细胞的补体受体具有激发B淋巴细胞合成RNA的作用,同时能够加快B淋巴细胞的代谢作用,增强释放接枝,从而参与产生抗体,形成免疫记忆。对于B淋巴细胞补体受体的检测意义非常重要,因为其直接影响了动物的免疫功能。本文的采用了酵母菌进行研究,对传统的研究方法进行了改进,酵母菌相对于特异性抗体致敏的红细胞补体(EAC)而言,不需要制备抗RBC IgM型抗体的过程,缩短了步骤,同时酵母素的使用也取得了较为理想的研究。因此该方法的研究稳定性较好,同时具有简便、经济的特点。