安尔碘皮肤消毒剂在手术室开启后使用期限的研究

刘青焱，先 会，杨晓莹

（西南医科大学附属医院手术室，四川泸州 646000）

安尔碘皮肤消毒剂是一种含3 000 mg/L有效碘及乙醇的中效皮肤消毒剂，临床使用具有皮肤刺激小、作用迅速、着色浅、无需脱碘、操作方便等特点，因此，被广泛应用于各级医疗机构中。但由于各级医疗机构规模不同，临床科室使用环境、使用频次不同，安尔碘皮肤消毒剂（60 mL 最小包装单元）开启后消毒液的有效期限，使用中污染问题一直困扰着使用者。目前研究主要集中在病房环境下安尔碘皮肤消毒液安全使用的期限研究，一般为3～7 d[1]，主要与使用频次和污染有关，使用频次＞19次/d，合格率仅为35.7%，而使用频次＜11 次/d 的合格率为91.67%[2]。但在手术室恒温、恒湿，空气洁净度控制下安尔碘使用频次与使用期限的研究还没有开展。因此，本院于2017年3～5月以安尔碘皮肤消毒剂最小包装瓶（60 mL）为研究对象，研究其在手术室开启后不同使用频次下消毒液的安全有效性，以探讨其在手术室的使用期限，为手术室制定皮肤消毒剂开启后合理的有效期限提供循证依据。

1 材 料

试验材料与菌株：由上海利康消毒高科技有限公司生产瓶装安尔碘皮肤消毒剂，含碘浓度0.2%，规格为60 mL，生产批号：20170224。血培养基，TSA，TSB 培养基为环凯生物产品。中和剂组成为5 g/L的硫代硫酸钠、10 g/L的吐温-80、5 g/L 的卵磷脂的磷酸盐缓冲液(PBS)（AXYGEN），试验菌为大肠杆菌ATCC25922，由西南医科大学病原生物学实验室保存提供。

2 方 法

2.1 试验用无菌棉签抽样检测

手术室为万级手术间，保持环境温度21℃～25℃，湿度40%～70%，手术间启用前1 h 开启层流，进行地表和物表的清洁消毒，空气微生物监测为150 cfu/m3；物表监测为＜5 cfu/m3的环境下，采用无菌剪刀剪开、撕开、顶开的方法取用无菌棉签，取用后竖放于操作台，4 h内采样，细菌培养。培养结果显示3组棉签在不同开启方法后的4 h内取用棉签均无污染。

2.2 安尔碘皮肤消毒液开启后使用期限试验

2.2.1 试验环境

选择万级手术间，室温21℃～25℃，湿度40%～70%，手术间启用前1 h 开启层流，进行地表和物表的清洁消毒，空气微生物监测为150 cfu/m3；物表监测为＜5 cfu/m3的环境下进行,试验期间拒绝参观,减少非手术人员走动。

2.2.2 分组与干预方法

将32 瓶安尔碘瓶装皮肤消毒剂随机分为A、B、C三组，每组10瓶，空白对照组2瓶。A组：手术室环境下24 h 内使用频次为11 次；B 组：手术室环境下24 h内使用频次为19次，C组：手术室环境下24 h使用频次为27 次。三组安尔碘消毒液使用方法是每次棉签蘸取后直接废弃。

2.2.3 采样方法

本试验按照WS/T367-2012《医疗机构消毒技术规范》使用中消毒液和物表染菌采样方法。A、B、C 组和空白对照组安尔碘皮肤消毒剂开启后第3 d对消毒液、消毒液容器瓶口、瓶盖内面进行采样，每间隔1 d再次采样，直到消毒液使用完毕。A组采样到15 d，样本量为210例；B组采样到13 d，样本量为180 例；C 组采样到11 d，样本量为150 例，空白对照组为42例，共计582例。

2.2.4 检测指标

2.2.4.1 细菌定量与定性检测

按照WS/T367-2012《医疗机构消毒技术规范》要求进行。使用中安尔碘消毒液染菌量检测：用无菌吸管按无菌操作方法取1.0 mL 被检消毒液，加入9 mL中和剂混均，用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.0 mL接种琼脂培养基平皿，37 ℃温箱培养72 h，计数菌落数。安尔碘消毒液容器瓶口和瓶盖内表面染菌量检测：用浸有无菌生理盐水的棉签在被检部位涂抹采样，去除手接触部分棉签进行洗脱，取洗脱液1.0 mL接种琼脂培养基平皿，37℃温箱培养48 h，计数菌落数。

细菌计数按照消毒液染菌量（CFU/cm2）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数。

使用中消毒液和消毒液容器瓶口与瓶盖内表面卫生学合格判定标准参照WS/T367-2012《医疗机构消毒技术规范》要求进行，即使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10 cfu/mL、不得检测出致病菌为合格。

2.2.4.2 最低抑菌浓度（MIC）及最小杀菌浓度（MBC）测定

将大肠杆菌ATCC25922 接种TSA 琼脂培养基过夜培养，挑取单菌落接种TSB 肉汤培养基至对数生长期，去菌液稀释到0.5麦氏浓度备用。无菌取所稀释的菌液100 μL接种于96孔板，取消毒剂100 μL加于96孔板第1列，混匀后取100 μL与第2列，依次至第12列后，吸取100 μL弃掉，使得96孔板每列的浓度分别为2-1，2-2至2-12。并设定PBS组为对照组，培养20 h观察结果，以肉眼观察，药物最低浓度管无细菌生长者，即为受试菌液的MIC值。取96孔板中菌液100 μL均匀涂布于TSA琼脂平板，如果上一浓度有菌生长，而本浓度若无细菌生长，确定为MBC值。

3 结果

3.1 使用中安尔碘消毒液、消毒瓶口及瓶盖内表面染菌检测结果

对使用中的不同期限及不同使用频率的安尔碘皮肤消毒液、瓶口、瓶盖内面污染状况进行细菌检测。检测结果：A 组15 d 消毒液使用完毕，B 组13 d消毒液使用完毕，C 组11 d 消毒液使用完毕，3 组每个时间点消毒液、消毒容器瓶口和瓶盖内表面染菌检测结果均为阴性。空白对照组15 d内细菌采样检测结果为阴性。

3.2 MIC和MBC

安尔碘皮肤消毒剂对标准菌株大肠杆菌ATCC25922 的抑菌杀菌效果，随着使用期限的延长和使用频次的增加，A 组MIC 值由1×2-12 到第15 d 1.6×2-12，MBC 值由1.4×2-6 到第15 d 2×2-6，B 组MIC值由1×2-12到第13 d 2×2-12，MBC值由2-6到第13 d 2.4×2-6，C 组MIC 值由1×2-12 到第11 d 2×2-12，MBC值由1.4×2-6到第11 d 2.4×2-6。见表1、图1和图2。

表1 A，B，C 3组取样MIC与MBC值

图1 开启3-15 d A，B，C 3组消毒液对标准菌株大肠杆菌的MIC变化趋势图

图2 开启3-15 d A，B，C 3 组消毒液对标准菌株大肠杆菌的MBC变化趋势图

4 讨论

有效的皮肤消毒剂的选择和管理对确保消毒剂的安全使用和医院感染预防与控制具有十分重要的意义。随着消毒灭菌技术的发展，消毒产品也在不断更新，各种消毒剂广泛应用于临床，由于不同级别医院病区、手术室规模和业务量不一，皮肤消毒剂品牌、规格的使用选择不一，但临床使用管理共同存在的困惑是皮肤消毒剂开启后使用效期管理没有参照执行的统一标准，因此临床工作中对开启后的消毒液使用期限难以把控[3]。存在消毒剂安全使用问题与浪费现象，还可导致耐药菌株在医院的定植[4-5]。研究报道指出随着使用时间的延长，消毒液会发生细菌污染，且污染率为2.52%，超标率为1.83%[6]；临床研究发现皮肤消毒液的安全有效性一般受到环境温度、湿度、空气洁净度、暴露时间、人为因素（操作习惯、无菌棉签的使用、反复取用）等多因素的影响[7]。

本试验在万级洁净手术室环境下,正确使用无菌棉签的情况下检测结果表明，三组每个时间点消毒液、消毒容器瓶口和瓶盖内表面染菌检测结果均为阴性。说明使用频次为11 次的瓶装消毒液开启后存放时间至15 d 未检测出细菌污染、使用频次为19 次的瓶装消毒液开启后存放时间至13 d 未检测出细菌污染，使用频次为27次的瓶装消毒液开启后存放时间至11天未检测出细菌污染。

安尔碘皮肤消毒液开启后抑菌杀菌效果的稳定性是影响消毒液安全使用的重要因素，也是临床消毒液开启后明确使使用效期管理的参考依据之一[9]。本研究中安尔碘皮肤消毒剂对标准菌株大肠杆菌ATCC25922抑菌杀菌效果显示：随着使用时间延长，三组MIC 与MBC 值逐渐增大，但是增大不明显，说明安尔碘皮肤消毒剂杀菌抑菌效果随着使用时间的延长变化不大；而刘青研究发现在内科病区、门诊输液中心、普外科等科室在连续使用7 d 以上也能够保持良好的杀菌能力[8],林辉研究显示安尔碘皮肤消毒液相比其它复合碘,抑菌效果较理想[9]。因此，本研究结果提示安尔碘皮肤消毒剂在手术室恒温恒湿恒洁净度的情况下，控制暴露时间，控制棉签的无菌使用，控制人员混杂因素的情况下，安尔碘皮肤消毒液使用频次在11 次以下，存放到15 d，抑菌杀菌效果变化不明显；使用频次在19次以下，存放到13 d，抑菌杀菌效果变化不明显；使用频次在27 次以下，存放到11 d，抑菌杀菌效果变化不明显。