猪常温精液品质检验

2019-03-19崔凤喜

国外畜牧学(猪与禽) 2019年5期

崔凤喜

(甘肃省天水市麦积区畜牧技术推广站，甘肃天水 741020)

伴随着现代化养猪事业的逐渐开展，生猪产业早就已经成为中国多个区域发展农村经济、全面提高农民收入的重要经济产业。为了全面推动生猪工作的创新格局，国家也开始积极主动地推动猪人工授精技术的应用，以全面提高良性生猪的利用频率，全面促进生猪产业的发展。前几年，相关部门一直在实行生猪良种补贴活动，利用猪人工授精技术来进行全面的应用与推广，因此，此项技术在母猪生产以及商品改良方面发挥了关键的作用。猪农如想实现上规模、上档次的养猪生产以及高效收益，就必须要全面推行猪常温精液品质的检验工作。

1 猪常温检验的基本概念

根据有关规定，猪常温精液检验包括精液的外观、精子的总体活力、使用计量、每份精液中直线前行运动的精子数量、精子畸形率以及有效期6个方面。普遍的检验流程是将常温精液样品送到化验室，观察外观形状，测量计量大小，观察精子活力、每份精液直线运动的精子数量、畸形精子率、有效期限等。通常情况下，在进行精液检验前，相关人员应提前做好准备工作：首先要将实验室的室温调到25 ℃左右，其次把所需要用到的设备加热到37 ℃左右，然后检查设备、试剂是否正常。

2 猪常温精液检验的具体步骤

2.1 外观要求

检查精液外观前制定或参照一个主要的评断标准。根据国家标准，猪常温精液的外观应该是乳白色并且无杂质，包装封口严密服帖。如果发现杂质，该份精液必须要废弃；精液外包装必须完整，不可有缺口，外包装的标识必须清晰明了，注明产品的名称、计量大小、生产日期、生产单位、批号、品种类型有效期以及需要保存的温度等。

2.2 计量大小

按照国家标准，地方品种在50 mL左右，其他品种保持在90 mL即可。

在操作前，应先将量筒洗干净，晾干待用然后，将分好的精液缓慢倒进量筒中，要避免在倒入过程中出现气泡导致精子的活力下降在倒入之后，要等待数分钟再读数。在读数时操作人员要将眼睛放到液面的凹面平面上，而且在小数点后要再估读一位。

2.3 记录读数的最终结果

计算公式为Q＝(n 1＋n 1)/2；公式中Q为计量值大小，单位是毫升(mL)，n1是第一样品计量，n2是第二样品计量，单位均为毫升；两个计量大小的平均值即为样品的剂量大小，计算结果的误差值最好保持在百分之二左右。

2.4 判断标准

按照国家标准，精液计量大小在40 mL～50 mL的为合格品，小于40 mL的是不合格品，其他品种的都在80 mL以上。

3 具体的操作步骤

第一步，取样进行预热：取5 mL精液注入试管中，随后放在水浴锅中预热；应分两次升温，第一次从17 ℃的恒温冰箱中取出后放在27 ℃下5 min，再将温度调到37 ℃后放置5 min，此时检查的活力为标准活力；第二步取20 μL放到预热好的载玻片上，再盖上盖玻片；取样必须均匀，在观察时温度要长期保持在37 ℃左右；第三步观察精液在放大几百倍后的发展情况；每个样片都要进行三个部分的观察工作，观察时的动作一定要快速，而且精子活力在检测过程中会受到温度的较大影响，温度很低时精子活跃度就很低，温度高精子的活跃度会变高，但是温度过高会导致精子快速死亡。

精子活动的评估以一个观察视野内可见直线运动的精子数量为依据，如视野内有百分之九十的精子进行直线运动，精子活力为0.9；如果视野内百分之八十的精子进行直线活动，精子的活力为0.8；按照这种规律进行推测，假如视野内没有一个精子进行直线运动，只有运动非常缓慢的精子或者不动的精子，那它们的活力就为0或0.1左右。

4 最终结果陈述

最新研究表明，一般来说计算结果的平均值就是这一样品的实际检查结果。每一样品都要进行两个计数室的观察工作，之后再取平均值，如果两个计数室的计数结果误差小于百分之五则可以不做第二次检测；如果超过了百分之五，应进行第二次检测。

《种猪常温精液》的国家标准规定了针对精子畸形率应做出的要求，即当畸形率小于百分之二十时要使用姬姆萨染色法进行检测。在试验中，利用中性福尔马林溶液把精子杀死后固定在载玻片上，之后再使用姬姆萨染液染色精子，以此更为细致地观察精子的具体形态，最后再利用显微镜在高倍分区下观察出精子的总数量以及畸形精子的数量，以此换算出精子的畸形率。