大豆酶解蛋白改善断奶仔猪生长性能及肠道健康的研究

■杨在宾 袁 丽 乔 凯 沈自泉 曲浩杰 于彩云 李军训

(1.山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018；2.山东华盛江泉农牧产业发展有限公司，山东临沂 276000；3.山东泰山生力源集团股份有限公司，山东泰安 271018)

在仔猪饲养早期阶段日粮中，使用动物源性蛋白质原料是配合饲料生产中常用的配方组合。血浆蛋白粉、肠膜蛋白和鱼粉是仔猪最常用的动物源性蛋白质原料。但是，这些原料的高价格、资源限制、进口依赖等都使它们在配合饲料生产中使用受限。近些年来，动物源性饲料原料对动物潜在的安全隐患越来越受到政府和行业的重视。寻找能够替代上述动物源性蛋白质原料的植物源性蛋白质饲料产品，一直是全球最热点的问题[1]。有研究表明，对豆粕进行深度发酵可以大大提高豆粕的营养品质和利用价值，改善动物肠道功能[2]，可以根据动物体的不同需求，使用不同的添加比例替代昂贵的动物源性蛋白原料，比如鱼粉等[3]。本研究选用二次深度发酵豆粕作为优质蛋白质原料，以不同比例分别替代仔猪日粮中的血浆蛋白粉、肠膜蛋白粉和鱼粉，系统研究了大豆酶解蛋白日粮对断奶仔猪生长性能、肠道微生物、免疫性能和血清生化指标的影响，证明了大豆酶解蛋白替代血浆蛋白粉、肠膜蛋白粉和鱼粉的可行性。

1 材料与方法

1.1 试验材料

大豆酶解蛋白(ESM，enzymolytic soybean meal)：粗蛋白质≥51%，猪消化能≥14.84 MJ/kg，由山东泰山生力源集团股份有限公司提供。

血浆蛋白粉：进口喷雾干燥血浆蛋白粉（BP-SD，Blood plasma，spray dried）。粗蛋白质≥78%，山东华盛江泉农牧产业发展有限公司提供。

肠膜蛋白：进口肠膜蛋白（DPS，Dried porcine solubles）。粗蛋白质≥50%，山东华盛江泉农牧产业发展有限公司提供。

鱼粉：进口鱼粉（FM，Fish meal）。粗蛋白质≥63%，山东华盛江泉农牧产业发展有限公司提供。

1.2 试验动物与设计

哺乳期仔猪：为了获得条件一致的断奶仔猪，本研究选用胎次、体重相近的32窝7日龄哺乳期仔猪，随机分为4个处理，每个处理4个重复，每个重复2窝猪，进行预试期，哺乳仔猪采食商品日粮（不含大豆酶解蛋白）至断奶。28 d断奶后以窝为单位称重，按照不同处理组转群，进入断奶保育期试验。

保育期仔猪：从上述断奶仔猪中，采用单因素完全随机试验设计，选择28 d断奶的三元杂交（杜×长×大）仔猪320头，随机分为4个处理，每个处理4个重复，每个重复20头。分别饲喂：处理1组：3%血浆蛋白+3%肠膜蛋白+3%鱼粉日粮；处理2组（无血浆蛋白质）：9%大豆酶解蛋白+3%肠膜蛋白+3%鱼粉日粮；处理3组（无肠膜蛋白）：4%大豆酶解蛋白+3%血浆蛋白+3%鱼粉日粮；处理4组（无鱼粉）：3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆蛋白+3%肠膜蛋白日粮。4个处理营养水平一致。详细日粮组成及营养水平见表1。试验期28 d。

表1 日粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 测定指标

在今年刚刚结束的中国(昌乐)国际宝石博览会宝石文化高峰论坛上，中国著名珠宝设计师王旭曾表示：在雕刻工艺方面，四年前昌乐做的珠宝工艺简单的居多，经过这三四年的发展，昌乐出现了很多非常精致的雕刻，从细节到镶嵌的宝石，再到造型以及文化注入，都有普遍提高，精品越来越多。而且昌乐蓝宝石质地均匀、洁净、色带漂亮，只要在雕刻中把这一独特优势发挥出来，那么蓝宝石就会散发独到魅力，发展的空间也将更广。

生长性能：以每个重复为单位，在试验正式期的始末对仔猪进行称重，计算仔猪日增重，统计仔猪每日采食量，计算断奶仔猪日平均采食量，并计算料重比。

腹泻率：试验期间，每天观察仔猪排粪情况，记录腹泻个体，并计算腹泻率。

腹泻率(%)=（腹泻仔猪头数×仔猪腹泻天数）/（试验仔猪头数×正式试验天数）×100

肠道菌群：在正式期的第14 d，取仔猪直肠新鲜粪样，测定肠道微生物。

免疫球蛋白：试验第28 d，每个重复选择2只猪，采血，测定血清免疫球蛋白浓度（lgM、lgA、lgG）。

1.4 数据统计与分析

数据采用SAS 9.2统计软件进行方差分析，采用Duncan's法多重比较处理平均值，P＜0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 生长性能比较

表2 哺乳仔猪生长性能比较分析

不同比例大豆酶解蛋白替代断奶仔猪日粮中血浆蛋白粉、肠膜蛋白粉和鱼粉后，对生长性能的影响见表3。统计分析表明：与常规的血浆-肠膜-鱼粉日粮相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉的无血浆蛋白粉日粮，可以获得与其相同的增重和腹泻率（P＞0.05），但是，采食量和料重比均显著降低（P＜0.05）；4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉的无肠膜蛋白日粮处理显著提高了日增重，降低了料重比和腹泻率（P＜0.05）；3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜的无鱼粉日粮处理生长性能表现最好，试验期末体重、日增重和日采食量显著增加，料重比和腹泻率均显著降低（P＜0.05），处理之间仔猪成活率没有显著差异（P＞0.05）。由此证明，使用9%的大豆酶解蛋白可替代日粮中3%的血浆蛋白粉、4%的大豆酶解蛋白可替代日粮3%的肠膜蛋白质、3.5%大豆酶解蛋白可替代日粮中3%的鱼粉。

表3 断奶仔猪生长性能比较分析

与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪试验期末体重分别增加了1.2%、3.3%和7.0%；日增重分别提高了1.7%、5.4%和13.3%；料重比降低了5.7%、4.4%和4.1%。9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉处理仔猪采食量降低了5.3%；3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪采食量增加了8.6%；4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪腹泻率分别降低了27.4%和33.0%。

2.2 肠道微生物比较

仔猪转群后，试验至14 d，直肠取粪样进行微生物测定的结果见表4。不同处理间需氧菌总数无差异（P＞0.05），大肠杆菌总数和乳酸菌总数有改变的趋势。4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉的日粮组获得了最低的大肠杆菌总数，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉组获得了最高的乳酸菌总数。无大豆酶解蛋白日粮组的大肠杆菌总数最多，乳酸菌总数最少。由此说明，大豆酶解蛋白可能有改善仔猪肠道有益菌数量的趋势。

表4 断奶仔猪粪便细菌数统计分析(lgCFU/g)

与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪粪便大肠杆菌总数分别降低了0.7%、10.2%和5.4%；乳酸菌总数分别增加了2.5%、1.2%和0.4%。

2.3 免疫功能比较

仔猪转群后，饲喂大豆酶解蛋白饲料至28 d，对血清免疫抗体测定的结果见表5。不同处理间IgG无显著差异（P＞0.05），IgA和IgM水平第1、2组间差异显著（P＜0.05）。9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉组获得了最高的IgA和IgM抗体水平。由此说明，大豆酶解蛋白有改善仔猪免疫功能的功效。

表5 断奶仔猪血清免疫抗体指标分析(mg/ml)

与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的IgA水平分别提高了16.1%、6.5%和4.8%；IgM水平分别增加了17.1%、1.9%和2.5%。

3 讨论

大豆酶解蛋白是豆粕经过灭菌、好氧发酵、厌氧发酵后，制备而成的一种特殊的小肽。其同时具备发酵饲料和小肽的优点。前人研究报道，豆粕在发酵过程中可以消除抗营养因子，还能产生丰富的烟酸、叶酸等维生素，促进动物体内益生菌的生长繁殖，有利于动物肠道发育，促进肠道健康[4-5]。陈勇等[6]和Boza等[7]指出，小肽能促进游离氨基酸的转运，消除氨基酸之间的吸收竞争，可通过动物肠道黏膜直接吸收，耗能低、速度快、不易饱和；且蛋白质以小肽的形式供给，可以使利用率显著提高。

刘海燕等[8]研究表明，发酵豆粕对乳仔猪生长性能的改善具有积极作用。在饲粮中使用14.27%和28.54%的发酵豆粕可以使仔猪的日增重显著提高(P＜0.05)，腹泻率极显著降低(P＜0.01)，且仔猪对饲粮中的粗蛋白、干物质和有机物利用率得到显著提高(P＜0.05)。用发酵豆粕饲喂断奶仔猪的试验结果表明，仔猪料重比和腹泻指数可分别降低8.39%(P＜0.05)和39.96%(P＜0.01)[9]。以8%的发酵豆粕“肽多乐”替代普通日粮中的鱼粉和膨化大豆，加工成等氮日粮，同时对40日龄的断奶仔猪进行饲喂试验，结果表明，发酵豆粕可以显著降低仔猪的死淘率和腹泻率(P＜0.05)，虽然生长性能没有显著差异，却提高了整体经济效益[10]。本研究结果表明，不同比例大豆酶解蛋白替代血浆蛋白粉、肠膜蛋白和鱼粉，均不同程度地降低了仔猪料重比和腹泻率，这与前人研究结果类似，也证实了大豆酶解蛋白在断奶仔猪上应用的可行性和功能性。

肠道菌群平衡对动物的健康和生长性能具有重要的意义[11]。俞晓辉[12]和Amato等[13]研究报道，仔猪日粮中添加发酵豆粕，可以使肠道内菌群多样性和相似性显著提高，外界因素变化时，肠道菌群不容易失调，也能反映仔猪的健康。本研究结果还发现，大豆酶解蛋白有改善仔猪肠道有益菌数量的趋势，分析其原因可能是微生物发酵可以减少豆粕中的蛋白酶抑制因子，大分子蛋白被降解成为更容易被吸收的小肽，发酵过程产生的代谢产物能够抑制大肠杆菌的繁殖，促进乳酸菌的生长，从而改善肠道内菌群平衡[14-17]，同时也减少了氨气、硫化氢和腐胺的产生[18]。

本研究结果还表明，大豆酶解蛋白能显著提高断奶仔猪的血清抗体水平，从而增强免疫力。究其原因可能是豆粕发酵过程中，有效降解了抗原蛋白，使仔猪的免疫刺激效应减少；给仔猪饲喂发酵豆粕能使其肠系膜淋巴细胞指数显著增加，对免疫器官的生长起到正向促进作用，从而增加机体免疫功能。

4 结论

4.1 与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪试验期末体重分别为增加了1.2%、3.3%和7.0%；日增重分别提高了1.7%、5.4%和13.3%；料重比降低了5.7%、4.4%和4.1%。9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉处理仔猪采食量降低了5.3%；3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪采食量增加了8.6%；4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪腹泻率分别降低了27.4%和33.0%。

4.2 使用9%的大豆酶解蛋白可以替代日粮中3%的血浆蛋白粉，4%的大豆酶解蛋白可以替代日粮3%的肠膜蛋白粉，3.5%大豆酶解蛋白可以替代日粮中3%的鱼粉。大豆酶解蛋白可能有改善仔猪肠道有益菌数量的趋势。

4.3 与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的仔猪粪便大肠杆菌总数分别降低了0.7%、10.2%和5.4%；乳酸菌总数分别增加了2.5%、1.2%和0.4%。

4.4 与3%血浆+3%肠膜+3%鱼粉日粮组相比，9%大豆酶解蛋白+3%肠膜+3%鱼粉、4%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%鱼粉和3.5%大豆酶解蛋白+3%血浆+3%肠膜组的IgA分别提高了16.1%、6.5%和4.8%；IgM分别增加了17.1%、1.9%和2.5%。

4.5 仔猪饲喂添加3.5%、4%、9%大豆酶解蛋白日粮，可以不同程度地改善断奶仔猪的生长性能、饲料效率；改善肠道健康；增加免疫力。