睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血IL-23与IL-17水平变化及临床意义研究

叶华富 李勇

睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）是指夜晚7h睡眠中呼吸暂停和低通气反复发作次数≥30次，或者睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）≥5次/h，患者以呼吸暂停、堵塞、憋气、血氧饱和度下降、打鼾、白天嗜睡等临床症状为主，是一种免疫性、炎症性疾病[1]。OSAHS发病率高、合并症多，严重危害患者健康[2]。目前，OSAHS的发病机制并未明确。IL是白细胞产生的具有传递信息，激活、调节免疫细胞增殖和分化等功能的炎性因子[3]。研究发现，TNF-α、C反应蛋白、IL-6等炎性因子在OSAHS患者的血清中呈现高表达[4-5]。基于此，本研究通过分析OSAHS患者血清与外周血单个核细胞（PBMCs）培养上清液L-23、IL-17水平，探讨IL-23与IL-17对OSAHS患者发病与预后的影响，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2015年1月至2017年1月本院耳鼻咽喉科收治的OSAHS患者与非OSAHS患者各98例，分别设为OSAHS组与对照组，排除合并慢性呼吸道疾病、心脑血管疾病、恶性肿瘤、甲状腺功能亢进/减退者。OSAHS 组男 62 例，女 36 例；年龄 21～73（45.83±11.53）岁。对照组男 58 例，女 40 例；年龄 20～74（44.71±10.76）岁。OSAHS组与对照组性别、年龄比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

1.2 方法 两组患者均于多导睡眠监测完成后次日清晨抽取两份空腹静脉血。一份在4℃温育箱内静置并以3 000r/min的速率离心10min，分离的血清置于-80℃的冰箱内待测；另一份进行PBMCs分离和培养，具体如下：将静脉血注入ACD血液抗凝管内摇匀，按1∶1比例加入PBS稀释摇匀，吸取6ml淋巴细胞分离液放入离心管内，并将稀释后的血液置入该离心管内，在20℃的温育箱内以2 000r/min速率离心20min。离心后由上到下依次为红细胞和粒细胞层、淋巴细胞分离液层、PBMCs层、血浆层。吸出PBMCs层置入新的离心管内，离心管内加入PBS并摇匀，在20℃的温育箱内以2 000r/min离心10min，并洗涤2次。加入重悬细胞后调节细胞密度为2×106个/ml，将细胞接种在培养板内，用500ng/ml Ionomycin和50ng PMN进行刺激试验，收集刺激后的细胞培养上清液并置于-20℃冰箱内待测。采用ELISA法及相应试剂检测血清、PBMCs培养上清液的IL-23与IL-17水平。

1.3 观察指标 观察并比较OSAHS组与对照组血清IL-23、IL-17 水平，PBMCs培养上清液 IL-23、IL-17 水平；比较经韩式悬雍垂鄂咽成形术治疗后2年随访期内OSAHS组死亡（19例，因OSAHS并发上气道梗阻、心脑血管意外死亡）与存活（79例）患者血清IL-23、IL-17水平。

1.4 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件；计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料比较采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清IL-23、IL-17水平比较 见表1。

表1 两组患者血清IL-23、IL-17水平比较（pg/ml）

由表1可见，OSAHS组患者血清IL-23、IL-17水平均高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.2 两组患者PBMCs培养上清液IL-23、IL-17水平比较 见表2。

表2 两组患者PBMCs培养上清液IL-23、IL-17水平比较（pg/ml）

由表2可见，OSAHS组患者PBMCs上清液IL-23、IL-17均高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.3 治疗后2年内OSAHS组死亡与存活患者血清IL-23、IL-17水平比较 见表3。

表3 治疗后2年内OSAHS组死亡与存活患者血清IL-23、IL-17 水平比较（pg/ml）

由表3可见，经治疗后随访2年内，OSAHS组死亡患者血清IL-23、IL-17水平均高于存活患者，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

3 讨论

OSAHS是临床上常见的、多发的睡眠疾病，是由于睡眠过程中反复发生的上呼吸道崩塌所导致的上气道部分气流受限、完全堵塞等而引起的反复的高碳酸血症和间歇性低氧血症，进而可能会导致患者发生重叠综合征、心脑血管疾病、内分泌功能紊乱、血流动力学变化、神经功能紊乱等变化[6-7]。间歇性的慢性反复低氧血症作为OSAHS患者病理生理的中心问题，会导致炎症反应和氧化应激反应，在整个病变过程中发挥关键作用，且与患者的多器官功能损伤也存在密切关系[8]。OSAHS患者的上气道炎症会加重上气道狭窄，延长睡眠呼吸暂停的时间，增多睡眠呼吸暂停的次数，且炎症因子会对上气道神经功能和肌肉功能产生影响，两者功能遭受影响后又会加重OSAHS患者的病情，加重炎症发展，增多炎症因子的释放，对其表达产生抑制作用，形成恶性循环[9]。因此本研究分析OSAHS患者血IL-23与IL-17水平的变化及临床意义，以期能为临床治疗提供参考。

辅助性T细胞17（Th17）是与Th1及Th2存在差别的效应T细胞，能够分化产生IL-17，并对炎症反应具有调节作用[10]。IL-17是一种重要的前炎性因子，具有较强的活化和招募中性粒细胞的功能，同时能够刺激T细胞，使其活化，进而对树突状细胞的成熟产生促进作用，并介导释放多种炎症介质，诱导机体产生炎症反应，提高炎性因子在机体中的表达[11]。目前临床对IL-17的研究主要集中在慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、肺炎等方面。已有研究指出，IL-17能够激活NF-κB通路和有丝裂原活化蛋白激酶家族通路[12]。而由于OSAHS所导致的低氧会对炎症反应的启动因子和关键因子NF-κB产生刺激，因而笔者推测IL-17在OSAHS疾病的进展过程中也发挥重要作用。IL-23主要是由活化的树突状细胞和巨噬细胞分泌的，具有维持Th17细胞活化的功能，可对Th17细胞的增殖产生刺激，帮助分泌IL-17，促进炎性因子分泌[13]。研究发现，小鼠缺失IL-23的抗原呈递细胞刺激T细胞分泌IL-17前炎性因子的能力降低，得出IL-23可能对IL-17的表达有一定影响[14]。本研究结果显示，OSAHS患者血清IL-23、IL-17水平均高于对照组，PBMCs上清液IL-23、IL-17水平亦均高于对照组；OSAHS患者经治疗后2年随访期内死亡患者血清IL-23、IL-17水平均高于存活患者。这提示，IL-17在OSAHS的发病过程中也发挥重要作用，且由于IL-17与IL-23存在相同的变化趋势，因而IL-23可能对IL-17的表达有一定影响。

综上所述，IL-23、IL-17可能通过影响炎症反应参与OSAHS的发生、发展，高血清IL-23、IL-17水平患者预后较差。