乳酸菌口服疫苗在猪病防治中的运用研究

熊柳红

（封开县动物卫生监督所，广东 肇庆 526500）

乳酸菌属于革兰氏阳性菌，可以发酵碳水性质的化合物，从而生成大量乳酸物质。在人体的肠道和大部分动物的肠道中，乳酸菌是非常常见的一种细菌种类。这种细菌不存在致病性质，经常被应用于食品工业等领域制造，是一种安全等级的微生物。其中，很多菌类与益生作用存在一定联系，在研究过程中受到了人们的广泛关注。但是，当前在进行乳酸菌疫苗研究的过程中存在诸多问题，需要全面分析这些问题，采取有效措施予以解决［1］。

1 乳酸菌表达系统特点

近几年，我国开始研究疫苗的转基因系统，需要寻找传递的载体，才能使其在机体内长时间存活，且不会对机体产生损伤，使机体长时间产生免疫力。这项菌种属于原核表达系统的一种类型。在进行外援基因表达过程中，一些菌种自身携带大量的染色体外因子，比较容易发展新的载体，培养过程更加简便，遗传操作效率较高。这项技术的发展比较成熟，具有良好的重复率。这项菌种是食品级细菌，能够构建食品级的表达系统，可以进行基因克隆，促进基因技术的发展，提高产品的应用安全性。在进行本底表达的过程中，它具备的水平较低，但是表达量较高，纯化相对简单［2］。

这个系统能够多方面调控子系统，而且能够表达毒素基因，在细胞体内和体外均能进行表达，且能够分泌到细胞外。这项菌种体内没有毒素，比较安全。表达过程中，外源蛋白不能进行纯化，可以与菌体一同服用。乳酸杆菌等类型的菌株粘附作用较强，可以作用于机体黏膜，可以在黏膜处生产存在免疫与治疗作用的蛋白和乳酸菌表达，而且能够持续向机体释放抗原蛋白，能够引起机体自身的免疫应答反应和耐受反应，提高人体以及动物的免疫作用。因此，这种系统的应用前景较好，具有良好的抗原效果［3］。

2 乳酸菌口服疫苗产生的作用机理

乳酸菌类型口服疫苗的制作，是将乳酸菌种作为载体菌，利用基因工程技术对病毒和细菌等基因进行重组，构建能够表达抗原的重组乳酸菌。这种乳酸菌携带外援的DNA疫苗，能够通过口服或者滴鼻的形式，在宿主的黏膜系统中进行抗原传递，然后在黏膜处产生刺激反应，使其能够产生反应，同时可以激发宿主的免疫反应，使其产生体液免疫和细胞免疫。这种免疫过程与病源感染的过程比较相似，能够在黏膜水平预防病原的感染问题。重组乳酸菌种在应用过程中不仅可以预防疾病问题，而且能够治疗和抑制已经发生的感染问题［4］。

3 乳酸菌口服疫苗在猪病防治中的具体应用

3.1 流行性腹泻

这种疫病是由腹泻病毒引起的一种高度接触性传染病。这种病会导致猪食欲不振，出现呕吐和腹泻问题，而且不同年龄的猪在发病过程中产生的临床症状存在差异。例如，幼龄的猪一旦发病，会因脱水出现死亡问题。当前这项疫病的发病率非常高，产生的临床症状越来越复杂，经常会出现大规模感染问题，给猪的养殖带来严重危害。因此，应该针对这种疾病进行疫苗研制。在进行疫苗研制过程中，可以将携带病毒基因的复制子基因转入乳酸菌种中，得到重组乳酸杆菌的疫苗，并且通过对照实验判断这种口服疫苗是否存在效果。经过研究发现，重组乳酸杆菌口服疫苗不仅能激发动物的免疫反应，而且能够刺激动物的肠道，使其产生局部免疫反应。将健康猪体中的基因缺陷型乳酸杆菌进行分离，融入乳酸菌中，构建含有保护性质抗原基因的非抗性乳酸杆菌作为表达的载体，将其转入乳酸杆菌，可以制作口服疫苗［5］。

3.2 传染性肠胃炎

传染性胃肠炎是一种急性传染病，属于高接触性传染疾病，是由冠状病毒引起的一种猪传染病。它主要的临床症状为患病的猪会发生呕吐和腹泻情况，而且会出现脱水现象。与流行性腹泻病毒进行感染后，不易对猪的临床症状进行判断，且不同年龄和品种的猪都易产生感染问题，特别是年龄较小的幼猪，感染后死亡率非常高。这种疾病呈世界性分布趋势，给不同国家的养殖业都带来了严重的经济损失。在进行疫苗研制过程中，可以将含有病毒基因的载体转入乳酸杆菌中进行表达，制作乳酸菌口服疫苗。将这种疫苗进行试验发现，这种口服疫苗在应用过程中具有比较良好的免疫效果［6］。

3.3 轮状病毒

这种疫病属于呼肠孤病毒科，是导致猪类发生腹泻的主要疫病之一。这种病的分布范围较广，感染性强，引发的疾病问题非常复杂，是一种世界范围内的疫病，给各地的养殖业带来了严重的经济损失。一般来说，年龄较小的幼猪一旦患上这种疫病，发病率超过80%，死亡率达到20%。研究过程中发现，含有这种病毒蛋白的重组乳酸菌，在应用过程中产生的黏膜和血清抗体可以促进实验动物的细胞免疫和体液免疫，因此可以通过乳酸菌口服疫苗的制作有效防治这项疫病［7］。

3.4 细小病毒

这种疾病属于细小病毒科，主要的临床症状为怀孕的母猪产生繁殖障碍，导致幼龄猪出现皮肤炎症和腹泻问题。这种疫病的临床表现和病情特点存在一定差异。疫病研究过程中可以发现，因为其他病毒混合感染发生的问题较多，导致很多患病的猪出现了疾病综合症。在进行疫苗研究的过程中，可以将分泌型病毒基因作用于乳酸杆菌进行重组，通过重组基因使实验动物产生明显的抗体，提高自身的抗病水平。分泌型重组基因可以成为口服疫苗的载体，而且在应用过程中具有较好的免疫原性，在进行重组大肠杆菌与含有病毒蛋白的干酪乳酸杆菌构建的过程中可以使这项病毒产生分泌表达系统。这种应用方法可以增强粘膜的免疫反应，而且存在较好的免疫原性和抗原性，在研制过程中可以增强疫苗的应用效果，并为疫苗的进一步发展奠定良好的基础。因此，将其应用于猪病防治，可以更好地发挥效果［8］。

3.5 口蹄疫

这种疫病会导致动物产生急性传染病，临床表现为患病的猪口腔黏膜和腿部皮肤出现溃烂，而且传播速度非常快，传播范围比较广，给畜牧业带来了严重损失。当前猪养殖的养殖规模不断扩大，这项疫病给养殖业带来的危害变得越来越大，预防也存在更大的困难，而传统的预防措施已经不能有效预防这种疫病。在进行新的防控技术研发过程中，需要采用安全有效的新型疫苗，才能有效防治这项疫病。在进行口服疫苗研制的过程中，可以通过乳酸杆菌进行疫苗研制，将其应用于免疫幼猪。研究发现，这种疫苗能够产生较强的抗体水平，可以诱发导体液的免疫和细胞出现免疫。在进行重组类型乳酸杆菌免疫构建的过程中发现，这种疫苗的应用可以增强动物自身的免疫水平，预防感染问题［9］。

3.6 链球菌病

这种疫病可以分为30多个血清型，而且存在二次感染问题，致病性质较强，传播速度非常快，一旦患病死亡率非常高。这种疫病的存在没有明显的季节性特征，因此疫病控制过程中应该以预防为主。需要研发新型疫苗，构建乳酸菌作为表达载体，使其能够在干酪乳酸菌中进行表达，从而制作口服类型疫苗。将这种疫苗应用于动物可以发现，重组的乳酸杆菌可以刺激实验动物产生特异性抗体。这项发现为口服疫苗的制作提供了实验基础，促进了口服疫苗的发展，提高了应用效果［10］。

4 应用效果

应用乳酸菌口服疫苗防治猪病的效果显著，对于减少病猪、死猪起到了重要作用。本次研究中共调查应用乳酸菌口服疫苗病猪138头。结果显示，138头病猪中，痊愈的有69头，病情控制的有61头，病死的有8头，防控率为94.20%。可见，乳酸菌口服疫苗对于猪病防治疗效显著。

5 结语

乳酸菌可在人体黏膜部位和生殖系统中存活，且不会致病，可以利用这一特性制作活菌类型的口服疫苗，而疫苗研发已经受到了社会各界人士的广泛关注。口服类型的疫苗主要是利用胃肠粘液递呈抗原，经过不同的免疫通道反应后，可以产生与常规治疗方式类似的反应。在当前技术不断发展的背景下，口服类型的疫苗已经开始运用到猪病防治中。这种疫苗的应用效果较好，而且研究取得了技术性突破，可以诱导机体产生相应的免疫反应，能够有效防治现有的猪病。