保健食品中西布曲明检测方法研究进展

崔丽伟，舒友琴，胡平

(河南牧业经济学院，河南 郑州 450046)

近年来，随着人们饮食结构的改变，肥胖症的发病也在逐渐增加，肥胖引起的疾病也随之增多。对于大多数肥胖症患者来说，饮食疗法效果并不明显，通过外科手术治疗肥胖风险较大。患者不愿意通过体育锻炼来减轻体重，还希望看到立竿见影的效果，因此，对一些减肥保健类食品十分青睐。目前市面上较为流行的减肥药物根据其作用机理主要可分为三类：控制食欲类、加快能量消耗类和抑制肠道消化吸收类，这三类作用机制的代表药物分别是盐酸西布曲明，麻黄碱和奥利司他，其中，盐酸西布曲明作用最为明显，被许多生产减肥保健药品的厂家作为主要添加成分[1]。若患者盲目大量、长期的服用含有西布曲明的减肥保健类药品，将会对患者的身体健康以及生命安全造成严重危害[2]。

1 西布曲明的结构特征及代谢机理

盐酸西布曲明(STH)，化学名为：N-l-(l-对氯苯基环丁基)-3-甲基丁基-N，N-二甲基胺盐酸盐—水合物，分子式为C17H26ClN·HCl·H2O，在常温下呈白色结晶粉末，易溶于甲醇，熔点为193.0 ℃～195.0 ℃。

STH是一种新型的通过控制神经中枢来抑制食欲的减肥药物，可以抑制多巴胺、去甲肾上腺素和5-羟色胺的再摄取，通过释放5-羟色胺和抑制羟色胺转运蛋白，提高突触间隙的浓度，从而使下丘脑饱和中枢兴奋，食欲下降，使肠道对碳水化合物的吸收减少，体重减轻[3]。STH口服后被人体迅速吸收，可广泛分布在全身各个组织中，患者可以很快控制住体重并可保持较长时间不回弹的特点。西布曲明还可通过刺激肾上腺素受体，使四周组织对胰岛素敏感性增强，加快对葡萄糖的吸收，增加脂肪组织的消耗，降低血清中甘油三酯及总胆固醇的含量，加快能量的消耗，达到减肥的目的[4]。

2 西布曲明的使用规范

盐酸西布曲明适用于通过控制饮食和加强运动未能减轻体重的肥胖症人群，适用于体重指数为BMI≥30 kg/m2或≤27 kg/m2的患者[5]。医学上建议，患者在开始使用西布曲明时为每天服药一次，每次不超过10 mg，若药物疗效不够明显，体重降低较少，服用一个月后剂量可调成每天15mg。若服用了10 mg剂量出现了异常反应，应减少至每天不多于5 mg的剂量。在患者服药过程中可根据患者的心率和血压情况实时调整药物剂量。医学临床上禁止使用15 mg/日或者更大的剂量。因此，西布曲明只是治疗肥胖症的一种辅助药物，不易长期使用[6]。

3 西布曲明的国内外发展现状

2009年开始，我国国家药品不良反应检测中心开始对西布曲明进行全面性的检测，相关专家建议，医生应当关注其长期使用的安全性。2010年1月，欧洲药品局发表声明禁止使用西布曲明，并将其撤出市场。2010年10月，我国国家药监局也暂停了西布曲明在我国的生产和使用。

尽管西布曲明退出了市场，但产品仍然可以通过非法渠道购买，比如互联网和黑市，这些都可以通过假冒药品或掺假的膳食补充剂的形式购买，这类药物琳琅满目，种类繁多，为了打击掺假和避免买到掺假的药品，我们需要一种简便快捷的检测方法去甄别这些产品是否合格，这对西布曲明含量的检测意义重大。

4 西布曲明的定性分析

4.1 薄层色谱法(TLC)

为了更加简便快捷地检测保健食品中的西布曲明，国内外相关食品检测工作者进行了许多研究实验，探索了许多对西布曲明含量进行定性定量的检测分析方法，现分别从定性分析和定量分析两个方面进行阐述。

溶剂在固定相的流动过程中在吸附与解吸附之间连续进行循环，由于每种物质的性质不同，同一种吸附剂对不同组分的吸附能力也有差异，进而对各个物质进行分离。

石保龙[7]采用TLC法对37批样品中的STH进行快速鉴别，西布曲明的检出率可达24.3%，并且用液质联用法验证了该方法的准确性。此法可在较短时间内快速鉴别大批量的样品，结果准确可靠。余兰等[8]采用TLC法对15种减肥食品中的STH做出了初步的判断，用3：2的甲醇水作展开剂，测得8种样品均出现了斑点，并且与对照品中斑点位置相同，初步鉴定供试品中含有STH。

由于保健食品的成分复杂，若单一使用薄层色谱法对保健食品进行成分检测，准确性和精密度会受到比较大的影响，可能会有伪阳性结果的出现，因此薄层色谱法只用作初步的定性筛选，为液相色谱法、液质联用等方法的定量分析做铺垫。

4.2 直接实时分析离子源结合三重四极杆质谱法(DART-MS)

直接实时分析，简称为DART，是一种基于质谱的新型电离技术，近年来，质谱学领域的相关专家对此展开了研究。在标准气压的条件下，电离源放电，激发氦气或氮气生成激发态原子，再将该激发态原子快速加热，用电离源对其进行电场加速，待测化合物解析，并瞬间化为离子。由于时间较短，该办法可实现实时分析，能在几秒内直接分析保健食品表面的化合物，实现对待测样品进行低损耗的定性分析。

李文杰等[9]采用DART离子源结合三重串联四极杆质谱法对减肥胶囊中添加的西布曲明进行快速定性检测，发现在4批保健品中，有3批样品的母离子下的子离子与盐酸西布曲明的质谱图相同。用质谱反应监测法进行检测，填充剂使用可溶性的淀粉，检出限是1ppm，在进行大批量样品的检测时，该方法检测时间短，特别是对于一些中药类的保健食品，可大量减少人力和化学试剂的损耗，该方法可用于保健食品中大批量的快速筛查检测。

4.3 解吸附电晕束电离质谱检测法(DCBI-MS)

DCBI是一种解吸附电晕束离子化技术，通过加热气体使样品解吸，施加高压在电极上，两极之间产生强电场，激发流经的氦气，等离子体会被气流带出，形成电晕束于空心阴极针内。这种方法快捷高效，灵敏度高，且无需消耗大量试剂，可使繁琐复杂的前处理过程得到简化，该法是一种快速半定量筛选，若要准确定量还需结合高效液相色谱法。

赵勇等[10]通过DCBI-MS和高效液相色谱法对食品中的西布曲明进行快速分析，待测样品无需任何预处理即可直接进行分析，1 min内出结果，DCBI-MS和高效液相色谱法定性结果一致。若利用DCBI-MS进行半定量分析时，要用时间谱图上一级离子所围成的峰面积来计算，但若需准确测定还需结合高效液相色谱法。因此，DCBI-MS法常用于辅助高效液相色谱法对减肥食品中非法掺入西布曲明进行快速、准确的筛查。

4.4 解吸附电喷雾电离质谱检测法(DESI-MS)

DESI是一种目前正在被广泛应用的常压离子化方法，它起源于常压质谱分析。DESI的主要机理是液滴携带，待测物被喷雾液滴浸染表面并溶解，到达表面的液滴会溅射出次级小液滴，样品无需进行预处理。由于它是一种软离子源，分子很少产生碎裂，对于混合物中的物质鉴别和快速高通量分析可同时实现。目前，DESI已被应用于药品检测和蛋白质成分等多个领域的分析。

许光明等[12]应用DESI-MS方法对保健类食品中非法添加的西布曲明及其衍生物进行快速鉴别和半定量分析，研究了实验过程中多种影响因素，如毛细管温度、扫描册数等，可以快捷简便、准确的定性鉴别保健食品中的西布曲明，结果与液质联用方法一致。

4.5 光谱分析法

王新财[13]采用近红外特征谱段相关系数法对35批保健食品中西布曲明进行快速鉴别。通过标准品图谱和样品图谱的对比确定特征谱段6010～5900 cm-1、4680～4480 cm-1，取二阶导数的相关系数29%为设定模型阈值，通过所建模型对批次样品进行测定，测定结果与液质进行对比，准确率高达94.3%。孙映求等[14]用便携式拉曼光谱仪对市售保健食品中的西布曲明进行快速检测，探讨了不同酸度条件下对测定结果的影响，在优化酸度条件下，测定样品中西布曲明含量并将结果与HPLC结果进行对比，结果一致。

5 西布曲明的定量检测

5.1 高效液相色谱法(HPLC)

高效液相色谱法是以液体为流动相，使用高压输送装置，将极性不同的流动相送入装有固定相的色谱柱内，各成分在柱内被分离后，在检测器中进行检测，进而实现对试样的分析。

王金生[15]采用高效液相色谱法对市售具有减肥作用的23种保健品中的西布曲明进行检测，实验过程中，在流动相中加入三乙胺，优化流动相组成，做了稳定性、精密度和回收率实验，该方法检出限为3 ng。

李静等[16]建立了检测减肥食品中非法掺入的西布曲明的高效液相色谱法。西布曲明在11.15～111.50 μg/mL(r=0.999)的范围内，线性关系良好，平均回收率为98.97%，相对标准偏差为0.60%。该方法简便易行、结果准确，常用于西布曲明的检测。汪元符[17]采用高效液相色谱法测定减肥食品中非法添加的西布曲明，测定结果良好。

5.2 胶束电动毛细血管色谱法(MECC)

胶束电动毛细色谱是在电解质中加入超过临界胶束浓度的表面活性剂使其在溶液中形成胶束，这些胶束在电泳过程中按其所带的电荷不同朝着与电流相同或相反的方向迁移作为一种“假固定相”，在电场作用的同时，样品组分可以在“假固定相”和电解质之间进行自由分配，依据其电泳淌度和分配行为的不同而进行分离。MECC既能分离中性化合物又能分离带电组分，与高效液相色谱法相比，具有分离效率高、速度快、样品用量少、试剂消耗少和分离模式多等优点。

徐远金等[18]建立了使用胶束电动毛细管色谱法测定保健食品中西布曲明的方法，探讨了缓冲液酸碱度和浓度、表面活性剂浓度、有机改性剂、电压、温度和进样时间对分离效果的影响。该方法检出限为1.0 mg/L，是一种可以准确检测减肥食品中的西布曲明的方法。

5.3 与质谱联用法

气相色谱-质谱联用(GC-MS)以及液相色谱-质谱(HPLC-MS)联用是目前应用最广泛的色谱-质谱联用技术，其分离能力强，适用于定量分析。质谱具有高灵敏度、低检测限的特点，可以检测出化合物的结构信息，但分离复杂混合物的能力比较差，适于定性分析。色谱与质谱联用，可以把色谱的高分离能力和质谱的高鉴别能力汇聚为一体，在对复杂混合物进行定量和定性分析时，结果更为准确。Yang Li等[19]报道了减肥类保健食品中芬氟拉明、西布曲明的GC-MS检测方法，先用2%甲酸溶液提取待测样品，后用固相萃取柱进行净化，以孔雀石绿作为内标物质，采用VF-5MS毛细管色谱柱分离，回收率为80.1%～106%，方法检出限7.5～375 μg/kg，相对标准偏差为1.6%～13.9%。

王向峰等[20]采用多反应离子监测技术，在优化实验条件下，选择280.1/125.1离子对为检测对象，对西布曲明进行鉴别和定量分析。该方法检出限为10 pg，平均回收率为99.79%，相对标准偏差为0.28%，方法灵敏可靠，可用于西布曲明的检测。

李萌等[21]采用HPLC-MS技术，对样品中所含有的麻黄碱、伪麻黄碱、芬氟拉明和西布曲明进行检测，发现四种化合物在检测系统中显示出较好的分离度，13 min可得出结果，样品的平均回收率达到85%～104%。

5.4 分光光度法

秦宗会等[22]建立刚果红褪色光度法测定保健食品中非法掺入的盐酸西布曲明。刚果红与西布曲明在呈弱酸性的NaH2PO4-Na2HPO4的缓冲介质中生成离子缔合物，溶液颜色发生明显变化，最大褪色波长在490nm，从而建立了测定盐酸西布曲明的光度法。实验探讨了刚果红用量、pH值、表面活性剂、加样的顺序及体系稳定性等因素对吸光度值的影响，在优化实验条件下对不同批号曲美胶囊中西布曲明的含量进行测定，并将测定结果与高效液相色谱结果相对比，结果令人满意。此外，谢兵[23]等人根据西布曲明与酸性铬蓝K发生反应生成缔合物，在652 nm处形成负吸收，检出限为1.66×10-7mol/L。

5.5 离子迁移谱(IMS)

离子迁移谱法又称为离子淌度谱法，是一种根据离子迁移所消耗的时间来进行离子区分并定性的技术，与传统的色谱质仪器对比，离子迁移色谱仪工作过程中不需在真空状态下，仪器结构简单，便携性较强，分析速度快，可以快速筛选出保健食品中非法添加的化学物。

何欢等[24]选择了39种减肥药物进行IMS检测建立数据库，对20种明确具有非法添加的保健食品和6种多药物混合物进行筛查，并与液质测试结果进行比较，该方法测定假阴性率小于5%，假阳性率小于10%，满足筛查方法要求。

5.6 毛细管电泳法(CE)

毛细管电泳法是近年来发展迅速的新型分离分析技术，是以微小毛细管为分离通道，在高压直流电场的条件下，样品中各组分之间迁移速度和分配能力产生显著差异，从而将物品分离。该方法装置简单易操作，样品的耗量少且前处理简单，分析过程花费时间短，分离效率高，但它需要依靠标准品的对照来进行定性分析。因此，毛细管电泳法尚未完全广泛应用。

李阳等[25]建立了测定减肥类功能食品中违禁成分芬氟拉明、伪麻黄碱、安非拉酮、西布曲明等高效毛细管电泳分析方法。在优化电泳条件下对不同厂家的7种减肥样品进行检测，西布曲明的检出限为0.35 mg/L，平均回收率为91.30%。

6 小结

采用薄层色谱、近红外光谱等方法对非法添加的西布曲明进行快速定性分析，但保健食品成分的复杂性而使定性的准确度降低；色质联用法检测结果最为准确，是最常用的检测方法之一，但仪器昂贵，技术操作要求严格，测定成本高，该方法很难在基层检测部门普及；离子迁移谱是一种快速，便捷的检测方法，但其专属性有待加强；毛细管电泳法分析时间短、分离效率高、成本低，需要标准品的对照来进行定性分析，所以毛细管电泳这种仪器并未完全普及。因此，找到一种既能快速定性定量分析的检测方法，且成本低，普遍适用性强，是广大学者正在探索的一个新的检测方法。

本文对目前国内外已有的西布曲明检测方法进行梳理找出现有方法的优势及存在的问题，并对各种方法进行比较和总结，以期为建立西布曲明检测新方法提供参考。