盐酸小檗碱上调冠心病患者血浆LDLR水平及相关性分析

杜 燕，张 杰

0 引言

冠状动脉粥样硬化性心脏病(Coronary artery heart disease，CHD)简称冠心病，是一种最常见的心脏病，是指因冠状动脉狭窄、供血不足而引起的心肌机能障碍和(或)器质性病变[1]。目前临床上治疗冠心病的主要方式包括药物治疗、介入治疗及动脉搭桥手术治疗，虽然随着临床手术技术的发展，各种治疗方案均有很大的进展，但药物治疗仍然是临床治疗该病的基础方案及主要手段[2]。

小檗碱是一种喹啉类生物碱，是我国传统的中药，近年来研究显示，盐酸小檗碱在心脑血管系统治疗中，具有抗血小板、抗炎、降血脂、降血压、稳定斑块和抗动脉粥样硬化作用[3-4]。本研究旨在通过临床试验探讨盐酸小檗碱对冠心病患者血浆低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor，LDLR)水平的影响并分析其相关性，为临床应用提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集我院2015年8月至2017年12月期间收治的慢性稳定性冠心病患者30例，随机分为观察组(18例)和对照组(12例)，其中观察组男12例，女6例；对照组男6例，女6例。所有患者均为单支血管病变(SVD)，血管内超声(IVUS)显示其狭窄>50%且<75%。排除标准：既往有心肌梗死(MI)、冠状动脉支架植入术或冠状动脉搭桥术、血管造影发现靶病变血管存在血栓、心源性休克、纽约心功能分级Ⅲ/Ⅳ级的心力衰竭、肝/肾功能异常、停经正在接受雌激素替代治疗的女性患者。患者基线特征包括年龄、性别、心血管危险因素，如吸烟、家族史、高血压和糖尿病。本研究遵守赫尔辛基宣言，并在中国临床试验注册中心(no.ChiCTR-TRC-10000868；http://www.chictr.org，2010年5月24日)注册，经上海交通大学实验研究伦理委员会同意。所有患者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 各组用药情况 对照组患者给予阿司匹林(100 mg/d)和瑞舒伐他汀(10 mg/d)，此外，根据患者个体情况，由主诊医师决定是否给予血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素受体阻断剂(ARB)、钙通道阻滞剂、β受体阻滞剂和/或抗糖尿病治疗(包括胰岛素或口服药物)。观察组在对照组的基础上口服盐酸小檗碱片(Berberine，BBR，300 mg，3次/d)。连续治疗3个月。

1.2.2 冠状动脉造影 根据标准临床指南，所有患者经桡动脉入路行冠状动脉造影(CAG)。使用血管内超声(IVUS，Volcano S5，Kimball Electronics Fremont，US)评估冠状动脉狭窄的严重程度，计算斑块面积。所有患者在PCI术前均预防性服用阿司匹林(300 mg负荷剂量+后续100 mg/d)和氯吡格雷(300 mg负荷剂量+后续75 mg/d)。

1.2.3 生化分析 CAG术前当天清晨取血化验获取基线资料，盐酸小檗碱治疗3个月后再次取血化验。采血当天使用酶促方法测定血样中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和三酰甘油(TG)水平。己糖激酶法快速测定空腹血糖(FPG)水平。通过实验室常规生化方法检测血浆天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、IL-6、IL-8、C反应蛋白和TNF-α水平。所有检测均采用盲法完成。

1.2.4 LDLR水平的测定 CAG术前当天早晨取血化验，盐酸小檗碱治疗3个月后再次取血化验。血样室温下1 600 g离心15 min获取上清，储存在-80 ℃冰箱备用。采用ELISA法测定治疗前后患者血浆低密度脂蛋白受体(LDLR)水平。LDLR水平检测按照LDLR ELISA试剂盒(SEB008Hu 96T，Cloud-Clone Corp. Houston，TX，USA)说明进行。

2 结果

2.1 两组患者一般资料比较 两组患者人口学特征、基线血浆LDLR水平、血脂、炎症因子水平和肝肾功能比较差异无统计学意义。见表1。

表1 患者基线特征(例，%)

2.2 两组治疗前后LDLR水平比较 治疗3个月后，观察组LDLR水平显著高于治疗前和对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；对照组治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两组治疗前后血浆LDLR水平比较(mg/L)

2.3 两组治疗前后血脂水平比较 治疗后，两组患者血浆TC、TG和LDL-C水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；观察组HDL-C水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.4 两组治疗前后血浆炎症标志物水平比较 治疗后，观察组患者血浆IL-8和TNF-α水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组hsCRP、IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

2.5 LDLR与炎症标志物水平相关性分析 Pearson相关分析结果表明，LDLR与hsCRP、TNF-α均呈负相关。见图1。

图1 LDLR与炎症标志物水平相关性分析

2.6 安全性分析 与治疗前比较，观察组治疗后BUN和Cr显著降低(P<0.05)；ALT、AST水平略有增加，但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者无不适主诉。见表5。

3 讨论

盐酸小檗碱是中药黄莲的主要成分，广泛应用于各种疾病的治疗。近年研究发现，小檗碱在心血管系统疾病治疗中有多种药理作用。现代药理学证实，传统中药小檗碱具有温和降血脂作用，其作用机制独特，毒副作用小，临床不良反应少，且价低易得，具有现有降脂类药物不可比拟的优势[5-6]。盐酸小檗碱降脂作用最初是在实验性治疗2型糖尿病模型中发现的，其不仅能够降低血糖，还能明显降低血清TG、TC、LDL-C水平。其作用机制与目前使用的HMG-CoA还原酶抑制剂—他汀类药物完全不同。小檗碱上调肝细胞LDLR的表达与胆固醇调控元件结合蛋白无关，而是依赖于ERK活性，通过稳定LDLR mRNA的基因转录后水平实现的，进一步实验证实，其作用部位是LDLR mRNA的3′UTR区域[7]。

近年来，一些基础试验研究和临床研究发现，小檗碱具有抗炎、抗氧化、抗血栓形成及调脂等多种功效，柴美静等[8]研究表明，小檗碱具有稳定及缩小颈动脉粥样硬化斑块、降血脂、降低血清氧化低密度脂蛋白及基质蛋白酶-9，改善神经功能的作用。刘鹏等[9]研究发现，在常规治疗基础上，瑞舒伐他汀联合盐酸小檗碱能有效降低急性缺血性脑梗死患者的血脂水平，稳定或逆转动脉粥样斑块，减轻患者氧化应激与炎症反应,安全性亦较好。李峥等[10]研究表明，小檗碱通过激活胞外信号调节激酶途径上调肝脏LDLR mRNA表达，从而发挥降低血清胆固醇(CHO)的作用。李春利等[11]总结了小檗碱在高脂血症患者中的临床应用以及相关的药理学研究，发现小檗碱治疗高脂血症药效明确，毒副作用小，在高脂血症及相关疾病的治疗中前景广阔。

细胞表面的LDLR是调节机体降脂作用的一个重要因素，目前正成为降低血脂的一个新的靶分子[11]。在动脉粥样硬化相关的研究中显示，小檗碱具有良好的抗动脉粥样硬化作用，并有基础试验研究指出，小檗碱抗动脉粥样硬化作用的途径是上调血浆LDLR的表达，并调节机体的炎症介质水平，但相关的临床研究报道不多[12]。本研究结果表明，治疗3个月后，患者的LDLR水平显著升高，证实小檗碱具有调节脂代谢的重要作用，对临床推广应用具有重要参考价值。

表3 两组治疗前后血脂水平比较(mmol/L)

表4 两组治疗前后血浆炎症标志物水平比较

表5 两组治疗前后血浆炎症标志物水平比较

对于小檗碱升高血浆LDLR作用及其与调脂作用之间相关性的机制，有研究指出，LDL通过受体介导的内吞作用，增加肝LDLR的表达，从而促进LDL-C的清除，这有助于降低心血管病的发病风险。而LDLR表达的水平主要是在转录水平通过细胞内胆固醇池的负反馈机制进行调节[13-14]。据报道，盐酸小檗碱可增加仓鼠LDLR的表达水平，且其调节机制是通过盐酸小檗碱激活ERK途径实现上调LDLR的转录水平[15]。本研究发现，在瑞舒伐他汀治疗的基础上，小檗碱能进一步增加患者血浆LDLR水平，且LDLR浓度与hsCRP、TNF-α呈负相关。这与国内外其他学者发现的小檗碱抗炎作用结果相一致，诸多研究指出，小檗碱可以降低TNF-α、IL-6、CRP等的表达，增加IL-10等抗炎因子的表达，达到减少炎症介质对组织损伤的作用[16]。

综上所述，盐酸小檗碱可以升高冠心病患者血浆LDLR水平，进而发挥调节血脂的作用；同时还可抑制炎症因子的表达，起到抗炎作用。这两种作用之间可能存在一定的相关性，有待进一步研究。总之，盐酸小檗碱是治疗冠心病的潜力药物，具有很好的应用前景，值得深入研究。