支原体肺炎患儿血清白细胞介素-4，白细胞介素-17，干扰素-γ，白细胞介素-36的表达及临床意义

潘莉，朱敏，邰建飞

支原体(MP)是引起儿童社区获得性肺炎最常见的病原体之一[1]，有报道显示儿童支原体肺炎(MPP)可引起高达40%的社区获得性肺炎[2]。支原体感染主要引起呼吸道感染，少数也可引起严重的肺外表现，如脑炎[3]，心肌炎[4]，肾炎[5]等。MPP大多数症状较轻，是良性、自限性的过程，使用大环内酯类抗生素临床症状及体征可得到缓解。病原菌的直接作用及机体的免疫反应均在MPP中起重要作用。既往有研究报道，血清中某些细胞因子如白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(INF-γ)在MPP的发生及发展中起重要作用。其水平变化对判断MPP病情及预后有重要的临床价值[6-10]。白细胞介素-36(IL-36)是细胞因子白细胞介素-1(IL-1)家族中的成员，主要在皮肤、肺及肠等脏器的上皮细胞及免疫细胞中，诱导细胞的活动及细胞因子的分泌[11]，但目前国内尚无其与MPP相关性的临床报道。本文通过对MPP患儿IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ测定，旨在为临床诊疗提供理论基础。

1 资料与方法

1.1一般资料本资料选取2011年11月1日至2015年11月1日在常州市金坛区人民医院住院的确诊为MPP的患儿45例为MMP组，以腹股沟疝修补术的19例患儿为对照组。本研究通过常州市金坛区人民医院伦理委员会批准，病人或近亲属对研究方案签署知情同意书。MMP组入选标准：①肺炎诊断符合《诸福棠实用儿科学》的诊断标准，即：具备发热、咳嗽、肺部啰音等呼吸道表现，伴胸部影像学单侧或双侧异常改变；②痰液MP荧光定量PCR阳性和血MP-IgM抗体阳性或双份血清第二份血清IgG抗体滴度上升4倍；③病史资料完整；④除外先天性心脏病、遗传代谢疾病、神经系统及支气管肺发育不良以及免疫抑制患儿。

1.2研究方法入院24 h内采集MPP组与对照组的外周静脉血行血常规、血生化、体液免疫、细胞免疫及血清细胞因子测定。行细胞因子测定时，外周血经3 000 r/min离心后，分离出血清并保存在温度为-80 ℃的冰箱中待检测。采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ的含量。MPP组在出院前再次抽外周静脉血行细胞因子测定。所有检测操作严格按照相关规程完成。

2 结果

2.1基本资料MPP患儿的临床及实验室资料见表1。两组性别及年龄均差异无统计学意义(P>0.05)。MPP组中3岁以下15例(33.3%)，3岁以上30例(66.6%)。MPP组中支气管肺炎占20例(44.4%)，大叶性肺炎占25例(55.6%)，其中5例伴有胸腔积液，均为大叶性肺炎。

表1 MPP患儿的临床及实验室资

2.2MPP组及对照组患儿血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平MPP患儿血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平在急性期为：[(723±263)、(398±218)、(413±291)、(3 144±1 932)] ng/L；而对照组为：[(481±198)、(212±39)、(302±87)、(1 632±917)] ng/L，可见较对照组均明显增高(均P<0.05)，见图1。

图1 MPP组与对照组血清IL-4，IL-36，IL-17及INF-γ水平比较

图2 大叶性肺炎与支气管肺炎患儿血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平比较

图3 MPP患儿治疗前后血清IL-4、IL-36、IL-17及INF-γ水平比较

2.3支气管肺炎及大叶性肺炎患儿血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平大叶性肺炎患儿血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平较支气管肺炎患儿增高，差异有统计学意义(均P<0.05)，结果见图2。

2.4MPP组患儿治疗前后血清IL-4、IL-17、IL-36及INF-γ水平患儿治疗前后血清IL-4、IL-36、IL-17及INF-γ水平均较前下降，差异有统计学意义(均P<0.05)，结果见图3。

2.5MPP组患儿治疗前不同年龄组中血清IL-4，IL-17，IL-36及INF-γ水平3岁以下MPP患儿这四种细胞因子血清水平分别为[(513.2±239.0)、(468.4±337.8)、(445.7±231.6)、(3 489.5±1 722.7)] ng/L。3岁以上患儿这四种细胞因子血清水平分别为[(782.0±325.3)、(321.6±187.5)、(303.5±180.9)、(2 335.9±1 457.9)]ng/L，均差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨论

近年来MP感染率呈逐年增高的趋势[12]。免疫反应一方面可保护机体免受病原菌侵害，但过度的炎症反应可加重疾病的进程。免疫炎症中产生的细胞因子相互影响、相互作用、相互关联，形成复杂的网络体系，在疾病的发展过程中起重要作用，同时对判断疾病的进程有指导意义。本研究我们通过对MPP患儿血清细胞因子测定，发现MPP患儿血清IL-4，IL-17，IL-36及INF-γ水平在急性期较对照组均明显增高，在恢复期下降，且大叶性肺炎，>3岁年龄组MPP患儿这四个细胞因子均明显增高。

刘贺临等[6]发现MPP患儿血清IL-4水平急性期明显高于恢复期和健康对照组，与我们结果相同，但血清INF-γ水平在急性期、恢复期及对照组间差异无统计学意义，MPP患儿急性期血清IL-4/INF-γ比值增高提示Th2细胞在MPP的免疫炎症中起主要作用。而左慧敏等[13]发现，IFN-γ质量水平急性期较恢复期和对照组明显升高，说明急性期血清IFN-γ水平对疾病的发展有重要提示作用。Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ增高激活NK细胞及CD8+T细胞，增加对病原体的杀伤能力。而IL-4通过B淋巴细胞分泌IgE，介导过敏反应，其水平增高在一定程度上可为机体的自我防御反应，以减轻MP所致的炎症反应，有利于机体增强抗炎效应、保护自身及清除病原，使机体的损害减少到最低。IFN-γ及IL-4的升高在一定程度上能反应Th1及Th2细胞的功能。但在MP感染免疫中，究竟哪类免疫反应起主导作用一直存在争论。IL-17在肺炎支原体中的作用早在2007年就被报道，是Th17细胞分泌的细胞因子。王冬梅[9]等发现MPP急性期IL-17水平明显高于恢复期和对照组，与我们结果相同，说明IL-17在急性期明显增加，参与MPP免疫应答反应。

大叶性肺炎患儿细胞因子较支气管肺炎患儿增高差异有统计学意义，一方面，与大叶性肺炎多见于大年龄组患儿，免疫功能相对发育完善，免疫应答反应较剧有关；另一方面，说明MP引起的大叶性肺炎本身炎性反应较剧，与大叶性肺炎患儿胸腔积液发生率高相符，同时也与本研究中>3岁患儿血清细胞因子相对增高相符合。

IL-36与MPP的相关性既往无类似报道。有研究表明，吸烟、TNF-α、IL-1β，IL-17等刺激下，支气管上皮细胞分泌IL-36增加[14-15]。IL-36可引起肺组织中的中性粒细胞及淋巴细胞数量增多，气道反应性增高及黏液分泌增加[10]，本研究中血清IL-36水平在急性期、大叶性肺炎、>3岁患儿中明显增高，可能与MPP患儿血清TNF-α水平增高及MP对支气管上皮细胞刺激有关，但其具体作用机制仍需进一步研究。

综上所述，在MPP急性期、大叶性肺炎、>3岁年龄组中IL-4，IL-17，IL-36及INF-γ明显增高，对病情评估有一定指导意义，有助于进一步指导MPP的临床治疗。