密花角蒿化学成分的研究

王明明， 曹 芳， 李海涛

（延安大学附属医院药剂科， 陕西 延安716000）

角蒿属植物大部分分布在喜马拉雅山区和我国西南地区， 有一些品种在中亚、 东亚和内蒙古地区也有分布［1-2］， 被用于治疗各种疾病， 如角蒿中药名为透骨草， 被长期用于治疗风湿病和全身疼痛［3-4］。

密花角蒿Incarvillea compacta Maxim. 又称密生波罗花， 为角蒿属多年生草本植物， 分布于我国甘肃、 青海、 云南、 西藏地区海拔2 600 ～4 100 m之间的砾石山坡和灌木草丛中［5］， 是藏药红“欧曲”的来源植物之一， 作为一种治疗黄疸、 胃疼、 中耳炎及化脓性中耳炎的植物在民间被广泛应用［6］，但鲜有其化学成分报道。 本实验通过现代分离技术和波谱解析方法对密花角蒿化学成分进行初步研究， 从而为该植物的进一步开发应用提供理论依据。

1 材料

AVⅢ600 MHz 核磁共振波谱仪 （TMS 为内标）、 Bruker micro-Q-Tof 高分辨质谱仪 （瑞士Bruker 公司）； 柱层层析硅胶、 高效硅胶GF254薄层板（青岛海洋化工厂）； Agilent 1260 HPLC （美国Agilent 公司）； 半制备色谱柱（江苏汉邦科技有限公司）； 反相Xcharge-C18色谱柱（250 mm×20 mm、250 mm×4.6 mm， 北京华谱新创科技有限责任公司）。 甲醇为色谱纯（美国Tedia 公司）； 其他试剂均为分析纯。

密花角蒿购于青海省西宁市康乐药材市场， 经中国科学院西北高原生物研究所卢学锋研究员鉴定为正品。

2 提取分离

10.0 kg 干燥密花角蒿用95% 乙醇提取3 次，每次5 h， 料液比为1 ∶8， 合并提取液， 减压浓缩， 得浸膏610.0 g， 取400.0 g 加适量水混悬分散， 依次用石油醚、 乙酸乙酯、 正丁醇萃取， 减压回收萃取剂， 分别得石油醚萃取物90.0 g、 乙酸乙酯萃取物102.0 g、 正丁醇萃取物105.0 g。 取100.0 g乙酸乙酯萃取物加硅胶适量拌样， 进行硅胶柱层析， 石油醚∶乙酸乙酯（5 ∶1 ～1 ∶1） 梯度洗脱， 得7 个组分Fr.E1 ～E7， E3 经硅胶柱用氯仿∶丙酮（20 ∶1～9 ∶1） 梯度洗脱， 得化合物1 （3.5 mg）、 2 （4.3 mg）、 5 （6.2 mg）、 10 （5.4 mg）；E4 经硅胶柱用氯仿∶丙酮（15 ∶1 ～3 ∶1） 梯度洗脱， 得化合物6 （2.2 mg）、 9 （4.1 mg）； E5 经高效半制备液相色谱反复纯化， 得化合物3 （5.6 mg）、 4（5.1 mg）、 7（3.5 mg）、 8（7.2 mg）。

3 结构鉴定

化合 物1： 无 色 油 状 液 体。 ESI-MS m／z：293.332 1 ［M ＋H］＋。1H-NMR （600 MHz， CDCl3）δ： 5.37 （6H， m， H-9 ～10， 12 ～13， 15 ～16），3.68 （3H， s， -OCH3）， 2.06 （4H， t， J ＝5.4 Hz， H-8， H-17）， 1.8 （2H， m， H-3）， 1.28 ～1.34 （8H， brs， H-4 ～7）， 0.99 （3H， t， J ＝7.5 Hz， H-18）；13C-NMR （ 150 MHz， CDCl3） δ：174.7 （ C-1）， 132.5 （ C-16）， 130.7 （ C-9），128.7 （C-11）， 128.6 （C-12）， 127.8 （C-14），127.5 （ C-10）， 51.7 （-OCH3）， 34.8 （ C-2），29.8 （C-7）， 29.6 （C-6）， 29.5 （C-5）， 29.5（C-4）， 27.6 （C-8）， 25.6 （C-11）， 25.7 （C-14）， 24.9 （C-3）， 20.9 （C-17）， 14.7 （C-18）。以上数据与文献［7］ 基本一致， 故鉴定为亚麻酸甲酯。

化合物2： 黄色粉末， ESI-MS m／z： 333.230 7［M＋H］＋。1H-NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 3.82（6H， s， 3′， 5′-OCH3）， 6.18 （1H， d， J ＝1.2 Hz，H-6）， 6.57 （1H， d， J ＝1.2 Hz， H-8）， 6.93 （1H，s， H-3）， 7.34 （1H， m， H-2′， 6′）， 12.96 （1H， s，5-OH）；13C-NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 181.9（C-4）， 164.3 （C-2）， 164.3 （C-4′）， 163.5 （C-7）， 161.7 （C-9）， 157.7 （C-5）， 148.3 （C-3′，5′）， 139.8 （C-1′）， 120.6 （C-10）， 104.6 （C-2′，6′）， 103.8 （C-3）， 98.7 （C-6）， 94.3 （C-8）， 56.6（3′， 5′-OCH3）. 以上数据与文献［8］ 基本一致，故鉴定为苜蓿素。

化合物3： 白色无定型粉末（甲醇）。 ESI-MS m／z： 243.225 0 ［M ＋H］＋。1H-NMR （600 MHz，CD3OD） δ： 7.17 （1H， d， J ＝15.6 Hz， H-7）， 6.18（1H， d， J ＝15.6 Hz， H-8）， 3.77 （1H， m， H-3），2.35 （1H， dd， J ＝14.4， 5.2 Hz， H-4a）， 2.28（3H， s， H-10）， 1.68 （1H， dd， J ＝14.4， 9.2 Hz，H-4b）， 1.59 （1H， dd， J ＝12.8 Hz， 3.6 Hz， H-2a）， 1.27 （1H， dd， J ＝12.8， 10.8 Hz， H-2b），1.18 （3H， s， H-12）， 1.19 （3H， s， H-13）， 0.98（3H， s， H-11）；13C-NMR （150 MHz， CD3OD） δ：200.8 （C-9）， 145.9 （C-7）， 133.8 （C-8）， 70.7（C-6）， 68.9 （C-5）， 64.4 （C-3）， 47.6 （C-2），41.6 （C-4）， 36.5 （C-1）， 29.8 （C-12）， 27.6 （C-10），25.7 （C-11），20.5 （C-13）。 以上数据与文献［9］ 基本一致， 故鉴定为（3S， 5R， 6S， 7E） -3，5， 6-三羟基-7-香波龙大柱烯-9-酮。

化合物4： 黄色结晶。 ESI-MS m／z： 419.223 5［M ＋H］-。1H-NMR （600 MHz， CD3OD） δ： 6.61（4H， s， H-2′， 6′， 2″， 6″）， 4.66 （2H， d， J ＝4.2 Hz， H-2， 6）， 4.21 （2H， dd， J ＝6.6， 9.0 Hz， H-4a， 8a）， 3.84 （2H， dd， J ＝3.0， 9.0 Hz， H-4b， 8b）， 3.77 （12H， s， -OCH3× 4），3.09 （2H， m， H-1， 5）；13C-NMR （150 MHz，CD3OD） δ： 149.5 （ C-3′， 5′， 3″， 5″）， 136.4（C-4′， 4″）， 133.3 （C-1′， 1″）， 104.6 （ C-2′，6′， 2″， 6″）， 87.7 （C-2， 6）， 72.7 （C-4， 8），56.9 （-OCH3×4）， 55.4 （C-1， 5）。 以上数据与文献［10］ 基本一致， 故鉴定为（-） -丁香酯素。

化合物5： 黄色粉末。 ESI-MS m／z： 549.321 6［M ＋Na］＋。1H-NMR （DMSO-d6） δ： 12.85 （1H， s，5-OH），7.27 （2H， s， H-2′，6′），6.97 （1H， d， J ＝1.6 Hz， H-2″）， 6.96 （1H， s， H-3）， 6.83 （1H，dd， J ＝8.2， 1.6 Hz， H-6″）， 6.68 （1H， d， J ＝8.2 Hz， H-5″）， 6.46 （1H， brs， H-8）， 6.17 （1H， brs，H-6）， 4.86 （1H， d， J ＝5.0 Hz， H-7″）， 4.27（1H， m， H-8″），3.87 （6H， s，3′，5′-OCH3），3.75（3H， s， 3″-OCH3）， 3.65 （1H， dd， J ＝11.5， 4.7 Hz，9″-CH2），3.26 （1H， dd， J ＝11.5，4.8 Hz，9″-CH2）；13C-NMR （DMSO-d6） δ：181.7 （C-4），166.1（C-7）， 162.7 （C-2）， 161.5 （C-5）， 157.6 （C-9），153.1 （C-3′， 5′）， 147.1 （C-3″）， 145.5 （C-4″），139.9 （C-4′），133.1 （C-1″），125.6 （C-1′），119.3（C-6″）， 114.6 （C-5″）， 111.3 （C-2″）， 104.6 （C-3），104.5 （C-2′，6′），103.4 （C-10），99.5 （C-6），94.6 （C-8）， 86.8 （C-8″）， 71.7 （C-7″）， 60.5 （C-9″）， 56.5 （3′， 5′-OCH3）， 55.7 （3″-OCH3）。 以上数据与文献［11］ 基本一致， 故鉴定为salcolin A。

化合物6： 黄色针晶。 ESI-MS m／z： 331.221 0［M＋H］＋。1H-NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 7.79（1H， d， J ＝2.0 Hz， H-2′）， 7.75 （1H， dd， J ＝2.0， 8.5 Hz， H-6′）， 6.95 （1H， d， J ＝8.5 Hz， H-5′）， 6.77 （1H， d， J ＝2.0 Hz， H-8）， 6.35 （1H，d， J ＝2.0 Hz， H-6）， 3.87 （3H， s， 3′-OCH3），3.87 （3H， s，7-OCH3）；13C-NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 149.1 （C-2）， 136.1 （C-3）， 178.1 （C-4）， 162.4 （C-5），97.4 （C-6），165.9 （C-7），92.5（C-8）， 156.7 （C-9）， 105.4 （C-10）， 123.0 （C-1′）， 113.6 （C-2′）， 147.4 （C-3′）， 149.0 （C-4′），115.6 （C-5′），124.0 （C-6′），56.0 （-OCH3），55.9（-OCH3）。 以上数据与文献［12］ 基本一致， 故鉴定为鼠李秦素。

化合 物7： 无 色 油 状 液 体。 ESI-MS m／z：287.231 2 ［M-H］-。1H-NMR （600 MHz， CDCl3）δ： 7.76 （1H， m）， 7.64 （1H， m）， 4.28 （2H，m）， 1.46 （2H， m）， 1.76 （ 2H， m）， 0.99（3H， m）；13C-NMR （150 MHz， CDCl3） δ： 169.6（C-7）， 133.8 （ C-1， 6）， 129.8 （ C-2， 5），132.5 （C-3， 4）， 66.9 （C-1′， 1″）， 31.8 （C-2′，2″）， 20.5 （C-3′， 3″）， 14.4 （C-4′， 4″）。 以上数据与文献［13］ 基本一致， 故鉴定为邻苯二甲酸二丁酯。

化合物8： 淡黄色粉末。 ESI-MS m／z：345.120 2［M＋H］＋。1H-NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 7.57（1H， s）， 7.67 （1H， s）， 4.05 （3H， s）， 4.07（3H， s）， 4.09 （3H， s）；13C-NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ： 111.24 （C-1）， 140.98 （C-2）， 140.23（C-3）， 152.66 （C-4）， 111.67 （C-5）， 112.57 （C-6）， 158.36 （C-7）， 111.98 （C-1′）， 141.48 （C-2′）， 140.86 （C-3′）， 153.84 （C-4′）， 107.48 （C-5′）， 113.38 （C-6′）， 158.55 （C-7′）， 56.76 （4′-OCH3）， 61.34 （3′-OCH3）， 61.05 （3-OCH3）。 以上数据与文献［14］ 基本一致， 故鉴定为3， 3′，4′-三-O-甲基鞣花酸。

化合物9： 黄色粉末， ESI-MS m／z： 431.125 4［M-H］-。1H-NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 7.75（d， 2H， J ＝8.7 Hz， H-2′， 6′）， 6.91 （d， 2H， J ＝8.7 Hz， H-3′， 5′）， 6.41 （d， 1H， J ＝1.6 Hz， H-8）， 6.21 （d，1H，J ＝1.6 Hz，H-6），5.28 （d，1H，J ＝1.3 Hz， Rha-H-1）， 0.78 （d， 3H， J ＝5.7 Hz，Rha-H-6）；13C-NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ：177.7（C-4），164.5 （C-7），161.3 （C-5），159.8 （C-4′），157.2 （C-2）， 156.6 （C-9）， 134.2 （C-3）， 130.6（C-2′， 6′）， 120.6 （C-1′）， 115.5 （C-3′， 5′），104.1 （C-10）， 98.8 （C-6）， 93.8 （C-8）， 101.9（Rha-C-1）， 70.7 （Rha-C-2）， 70.4 （Rha-C-3），71.2 （Rha-C-4）， 70.1 （Rha-C-5）， 17.5 （Rha-C-6）。 以上数据与文献［15］ 基本一致， 故鉴定为阿福豆苷。

化合物10： 黄色粉末， ESI-MS m／z： 493.320 1［M ＋H］＋。1H-NMR （600 MHz， DMSO-d6） δ： 12.97（1H， s， 5-OH）， 9.42 （1H， s， 4′-OH）， 6.47（1H， d， J ＝1.9 Hz， H-6）， 6.95 （1H， d， J ＝1.9 Hz， H-8）；13C-NMR （150 MHz， DMSO-d6） δ：182.5 （C-4）， 164.6 （C-2）， 163.4 （C-7）， 161.5（C-5），157.3 （C-9），148.7 （C-3′，5′），140.5 （C-4′）， 120.7 （C-1′）， 105.8 （C-10）， 104.9 （C-2′，6′），104.3 （C-3），99.7 （C-6），95.6 （C-8）。 以上数据与文献［10］ 基本一致， 故鉴定为苜蓿素。剩余的13C-NMR 谱信号中100.5 （C-1″）， 77.7 （C-5″）， 73.5 （C-2″）， 76.8 （C-3″）， 69.8 （C-4″），60.8 （C-6″） 为葡萄糖基的信号， 与文献［16］ 基本一致， 故鉴定为苜蓿素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

4 讨论

角蒿和四川波罗花是紫葳科角蒿属植物中化合物研究较多的2 个品种， 生物碱、 萜类、 甾体、 黄酮及其苷类为其主要成分［17-18］。 密花角蒿中黄酮及其苷类亦为其主要成分， 研究表明［19］它们具有明显的抗氧化应激、 抗炎等多种药理活性， 可能是该植物治疗黄疸、 胃痛、 中耳炎等病症的物质， 可为进一步相关研究奠定理论基础。