鸡新城疫与禽流感免疫程序效果分析

林福忠 林秋娟 蔡鹤鸣

（福建省福州市农业科学研究所 350018）

鸡新城疫是由新城疫病毒引起的急性、高度接触性传染病，禽流感是由A型流感病毒的禽类传染病。两者均能引起禽类呼吸道和消化道疾病，造成禽类生产重大损失。目前，针对鸡新城疫和禽流感主要采取接种疫苗的方法进行防控，而疫苗免疫效果影响因素很多，免疫程序就是其中之一。因此，通过生产实践制定一个在临床上有效的鸡新城疫和禽流感免疫程序。为了客观评判其免疫效果，采用血凝抑制试验来监测其免疫抗体水平，为各养殖场做好鸡新城疫和禽流感的预防工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验6批次桂凤鸡均来自福州市农业科学研究所畜禽养殖场。鸡新城疫与禽流感免疫程序为：7日龄，新城疫--禽流感（H9N2）二联灭活苗，肌注，1头份/只；15日龄，禽流感（H5N1）灭活苗，肌注，1头份/只；20日龄，新城疫Ⅳ系，滴鼻，2头份/只；33日龄，新城疫--禽流感 （H9N2）二联灭活苗，肌注，1头份/只；60日龄，新城疫Ⅰ系，肌注，1头份/只；新城疫--禽流感 （H9N2）二联灭活苗，肌注，1头份/只。

1.2 血清样本采集

1.2.1 采集时间与数量

鸡采血时间为40日龄与81日龄。样本采集数为每批次60只，共计720份。

1.2.2 血样采集与处理

翅下静脉采血，每只鸡采血2ml，分别标记密封，静置30min，待血清析出后，用低温离心机4000转进行血清分离，-18℃冰箱贮藏。

1.3 检测方法

新城疫和禽流感的免疫抗体检测方法均采用血凝抑制试验（HI）方法。新城疫采用GB/T16550-2008《新城疫诊断技术》进行操作，禽流感采用GB/T18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》进行操作。

1.4 实验试剂

新城疫、禽流感抗原和标准血清来自哈尔滨维科生物技术开发公司，柠檬酸钠抗凝剂和1%红细胞液自制。

1.5 结果判定

以100%抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的抗体滴度。新城疫抗体滴度≧5㏒2判定为合格，禽流感抗体滴度≧5㏒2判定为合格。

2 结果与分析

2.1 新城疫抗体检测

新城疫抗体检测结果见表1。由表1可知，6批次鸡群40日龄平均免疫合格率为93.6%、平均抗体滴度为8.5；81日龄平均免疫合格率为94.2%、平均抗体滴度为8.6。40日龄和81日龄HI抗体效价均大于70%，平均抗体滴度均大于8.0；40日龄和81日龄的95%滴度7.9～9.1。说明该新城疫免疫程序合理，抗体效价和平均抗体滴度较高，能够形成有效保护力。

2.2 H5N1/Re-5禽流感抗体检测

H5N1/Re-5禽流感抗体检测结果见表2。由表2可知，6批次鸡群40日龄平均免疫合格率为89.2%、平均抗体滴度为7.4；81日龄平均免疫合格率为86.7%、平均抗体滴度为7.1。40日龄和81日龄HI抗体效价均大于70%，平均抗体滴度均大于7.0，95%滴度范围6.6～8.0。说明该H5N1禽流感免疫抗体有保护力，但保护力较弱。

2.3 H9N2禽流感抗体检测

H9N2禽流感抗体检测结果见表3。由表3可知：6批次鸡群40日龄平均免疫合格率为91.4%、平均抗体滴度为8.3；81日龄平均免疫合格率为89.7%、平均抗体滴度为8.0；40日龄和81日龄HI抗体效价均大于70%；除了3、4批次81日龄的平均抗体滴度为7.8和7.9，其他40日龄和81日龄的抗体平均滴度均大于8.0；95%滴度为7.4～8.8。说明该H9N2禽流感免疫程序合理，抗体效价和平均抗体滴度较高，能够形成较强保护力。

3 讨论

（1）本免疫程序生产实践中应用于禽类养殖场比较密集、新城疫疫情较重的区域，鸡新城疫、禽流感免疫合格率均大于70%，可形成有效的免疫保护力，说明免疫程序合理。但免疫效果具有动态性，容易受到鸡群免疫应答能力、疫苗种类、地域、疾病流行状况、鸡舍环境卫生、应激等因素影响[1]。为了鸡群的生物安全，有条件的养殖场要制定定期的常规检测和不定期的抽检监测制度，可有效判定抗体效力，控制和减少疫病发生。

表1 40日龄和81日龄各批次新城疫抗体检测结果 （S±X）

表2 40日龄和81日龄各批次H5N1/Re-5禽流感抗体检测结果 （S±X）

表3 40日龄和81日龄各批次H9N2禽流感抗体检测结果 （S±X）

（2）本试验新城疫免疫程序密度较大，活苗和灭活苗同时配合使用，全程活苗免疫3次、灭活苗免疫2次，这样既可快速建立局部免疫屏障，又能使机体产生高滴度的免疫抗体。另外，不同时间段采用滴鼻、肌注等不同免疫方法可形成全方位有效的保护力。因此，在禽类养殖场比较密集、新城疫疫情较重的区域可参考使用本免疫程序。

（3）本试验H5N1禽流感疫苗免疫1次，H9N2禽流感疫苗免疫3次。从抗体监测分析H5N1抗体保护效力不如H9N2，H9N2抗体效价和平均抗体滴度较高能够形成较强保护力，而H5N1保护力较弱。对禽流感免疫程序如此设计是因为在我国H9N2亚型禽流感是当前禽流感流行的主型，持续变异，可协同致病，还可以为H7N9提供重配的基因库，造成丰富的新型基因型，因此，控制H9病毒污染势在必行[2]；高致性H5N1亚型禽流感人畜共患。虽然全球关于H5N1亚型疫情报道逐年递减，但疫情逐渐呈现地方流行态势，每年均有发生[3]。因此，不能忽视，当国家H5N1禽流感疫情监测有暴发时应加强免疫。