反相高效液相色谱法测定“K粉”检材法及其应用

2018-12-17黄泓杰黄叙金

四川警察学院学报 2018年5期

龚冶，黄泓杰，黄叙金，代勇

（四川警察学院四川泸州 646000）

“K粉”是通过化学合成的新型毒品，是氯胺酮的俗称。氯胺酮是苯环己哌啶(FCP)的衍生物，为白色结晶性粉末，无臭。在水中易溶，在热乙醇中溶解，在乙醚或苯中不溶[1]。氯胺酮属N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂，是一种非巴比妥类麻醉剂，作用于人的中枢神经系统，会对神经系统造成损伤，吸毒者存在幻觉、躁动不安、恶梦及谵语等精神症状，起初作为冰毒和“摇头丸”“伴侣”用品，用以缓和前者的“冲劲”和延长作用时间，增强使用效果。其有导致中枢兴奋、迷幻的作用和后果，因此成为许多人，尤其是年轻人增加精力、追求新奇、寻找刺激的手段，目前已成为吸食新型毒品的主流[2]。因此，本研究探索的是一种准确、快速测定“K粉”纯度方法及其在司法实践中应用。

一、材料与方法

（一）仪器与试剂

高效液相色谱仪1200系列（安捷伦公司）：G1329A自动进样器，G1311A四元泵；G1315D二极管阵列检测器；XBridgeTMC18色谱柱，4.6×250mm，5μm；分析天平（Sartorius GPA224S）；超声仪（KH3200E型）；PH计（雷磁PHS-25型）；移液枪（德国Eppendorf公司）。

盐酸氯胺酮标准品（为甲醇液，浓度为1.00mg.mL-1）由泸州市公安局提供。甲醇、乙腈均为色谱纯，乙酸铵等其余试剂均为分析纯，水为纯化水。

（二）色谱条件

色谱柱为XBridgeTMC18，流动相为乙腈：0.03mol.L-1乙酸铵溶液（70：30，v/v），用磷酸调PH至3.0，流速0.8ml/min，检测波长220nm，柱温为30℃，进样量5μL。

（三）溶液制备

1.对照品溶液制备精密量取1ml盐酸氯胺酮标准母液（1.00mg.mL-1），置于5ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得到盐酸氯胺酮储备液，置4℃冰箱中保存。

2.供试品溶液制备精密称取适量“K粉”，用甲醇溶解并稀释制成每1ml含1mg“K粉”的溶液，摇匀，即得。

二、实验与结果

（一）系统适用性

在前文所述色谱条件下检测，盐酸氯胺酮的保留时间为6.34min，分离度为8.2，大于1.5，达到基线分离。盐酸氯胺酮的理论塔板数大于10000。空白样品（甲醇）和盐酸氯胺酮的色谱图见图1。

图1 空白样品和盐酸氯胺酮的色谱图

（二）线性关系和检测限

取盐酸氯胺酮母液和标准储备溶液，配制成质量浓度分别为0.04mg.mL-1、0.10mg.mL-1、0.20mg.mL-1、0.60mg.mL-1、0.80mg.mL-1的系列盐酸氯胺酮标准液，分别取不同浓度标准液10μL进样，记录相应的峰面积，并对色谱峰面积作纵坐标Y，质量浓度X作横坐标，进行线性回归（见图2），得盐酸氯胺酮的回归方程为：Y=9908X+42.62，R2=1，线性范围为0.04～0.80mg.mL-1。

图2 盐酸氯胺酮的标准曲线

以色谱峰高为噪声高3倍（S/N≥3）相对应的浓度为检出限，盐酸氯胺酮的检出限为0.005mg.mL-1。

（三）精密度试验

分别取盐酸氯胺酮母液和标准储备液，用甲醇稀释成0.8、0.38、0.04 mg.mL-1的盐酸氯胺酮，每种浓度样品各制备5份，在1d内重复进样5次和连续进样3d；计算盐酸氯胺酮的日内精密度RSD为1.88%，1.95%，1.81%，日间精密度RSD为2.61%，2.47%，2.53%。

（四）回收率试验

精确称取“K粉”0.01g，置于25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。准确测定其含量后取9份各0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，平均分为3组，每组各加入0.4mg.mL-1盐酸氯胺酮对照品溶液0.4、0.5、0.6mL（相当于测定值的80%、100%和120%），用溶剂定容后测定，计算回收率。低、中、高浓度水平的回收率（n=3）分别为99.3%、101.1%和99.7%，RSD分别为1.17%、1.42%和1.29%。

三、讨论

（一）流动相的优化

查阅相关文献[3-4]，对甲醇与水的多种比例、庚烷磺酸钠与乙腈、乙腈与磷酸盐缓冲液、乙腈/甲醇与乙酸铵等，结果发现甲醇与水的流动相体系分析时间较长且有干扰峰；庚烷磺酸钠是离子对试剂，对色谱柱伤害较大，对于十八烷基硅胶键合的色谱柱来说，离子对试剂会影响色谱柱键合，从而达到分析样品的作用，但离子对试剂很难从色谱柱上冲洗干净，对色谱柱造成不可逆的伤害，大大缩短色谱柱的使用寿命；用乙腈与磷酸盐缓冲液对多种流动相进行了筛选，发现峰形不好，拖尾严重。最后选择乙腈与乙酸铵（70：30）作为流动相，氯胺酮的分离度、峰型都较好。

（二）检测波长的筛选

对氯胺酮进行DAD全波长扫描，发现其在276nm、269nm、264nm、220nm、215nm处均有吸收峰，比较其各个吸收值发现，276nm、269nm、264nm的吸收值较低，当检测波长为220nm和215nm时，氯胺酮的检测灵敏度显著提高，但215nm更接近末端吸收，为了降低溶剂末端吸收对检测结果的干扰，故最终选择220nm作为检测波长。