孟河医派苍术特色炮制品与其他炮制品中β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量差异的研究

曹 琰 刘产明 张 琪 朱月琴 黄 玮

（常州市中医医院，江苏常州 213003）

苍术始载于《神农本草经》，列为上品，称其“主风寒湿痹，死肌痉疸……作煎饵，久服，轻身延年不饥”，其生品、炮制品均在临床上应用广泛。传统认为苍术苦温燥烈，因此阴虚内热、气虚多汗者忌用。但经炮制后可缓和燥烈之性，降低辛烈温燥的不良反应。孟河医学为我国著名地域性医学流派之一，在临床上之所以有独到而确切的疗效，除了脉理精细，用药精当外，其独特的中药炮制技术也是重要原因[1]。其中苍术的炮制方法多样，所用辅料颇具特色。“泔浸麻油拌炒”“黑芝麻拌蒸”等制法在现有的炮制规范中未见有收载。本研究以苍术及其现代主要炮制品、孟河医学特色炮制品为研究对象，采用GC-MS分析苍术挥发油中主要成分β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量，为苍术及其不同炮制品的质量评价、炮制机制的阐释提供科学依据。

1 材料

1.1 仪器 PerkinElmer Clarus气相色谱仪串联AXION-iQT质谱检测器（美国PerkinElmer公司）；NIST标准质谱图库（2011版，美国国家标准技术研究院）；WILEY标准质谱图库（美国John Wiley&Sons公司）；电子天平（上海梅特勒托利多仪器有限公司）；KH-500型超声波清洗仪器（昆山禾创声波仪器有限公司）。

1.2 药材与试剂 苍术药材购自苏州市天灵中药饮片有限公司（批号：170627），经南京中医药大学刘产明教授鉴定为菊科植物北苍术Atractylodes chinensis（DC.）Koidz.的干燥根茎。对照品苍术酮（批号：H4520005，纯度≥90%）、苍术素（批号：H4510010，纯度≥98%）购自上海安谱实验科技股份有限公司；β-桉叶醇（批号：BCBR5666V，纯度≥90%）购自Sigma公司；正己烷为分析纯，购自南京化学试剂有限公司。

2 方法

2.1 苍术不同炮制品的制备

2.1.1 麸炒苍术 取麸皮撒入热锅内，用中火加热，俟冒烟时，加入苍术片，拌炒至表面呈深黄色，取出，筛去焦麸皮，放凉。100kg苍术片，用麸皮10kg。

2.1.2 米泔水制苍术 取苍术片，用米泔水浸泡片刻，取出，用文火炒干。100kg苍术片，用米泔水20kg。

2.1.3 焦苍术 取苍术片，用中火炒至外表焦黄色，取出放凉。

2.1.4 泔浸麻油拌炒苍术 取苍术片，用米泔水浸一夜，取出，焙干。取焙后苍术片，加麻油拌透，置热锅中，用文火不断翻炒至焦黄色，取出，晒干。100kg苍术片，用麻油20kg。

2.1.5 黑芝麻拌蒸苍术 取苍术片，加黑芝麻，拌匀，置锅内，隔水加热，上气后蒸1h，停止加热，闷透，取出，晒干。100kg苍术片，用黑芝麻20kg。

2.2 色谱条件 Agilent HP-5MS石英毛细管色谱柱（0.25mm×30m，0.25µm）。载气：氦气；分流比20∶1，流速1mL/min；进样口温度200℃，检测口温度250℃，进样量1µL。程序升温：初始温度90℃保持2min，以15℃ /min升至130℃，保持1min；以3℃ /min升至180℃，保持1min；以5℃/min升至280℃，保持2min。

2.3 质谱条件 电子轰击离子源（EI），离子源温度230℃，电子能量70eV，气相色谱-质谱接口温度230℃，扫描范围m/z 40～400。对照品、供试品的总离子流图见图1。确定各目标化合物的保留时间和特征离子，再采用选择离子监测模式进行定量，选择监测离子m/z 149（β-桉叶醇），216（苍术酮），182（苍术素）。

图1 混合对照品（A）和苍术样品（B）的GC-MS图谱

2.4 对照品溶液的制备 精密称取β-桉叶醇、苍术酮和苍术素对照品9.10、15.30、41.55mg置于50mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至刻度，摇匀，分别得到浓度为0.182、0.306、0.831g/L的 混 合 对照品溶液。

2.5 供试品溶液的制备 将苍术及其不同炮制品粉碎过40目筛，精密称取苍术生品及各炮制品粉末0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入正己烷15mL，称重，超声处理（功率400W，频率40kHz）30min，取出放冷，再称重，以正己烷补足失重，摇匀，13000r/min离心10min，取上清液，以0.22µm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液[2]。

2.6 方法学考察

2.6.1 标准曲线的绘制 精密量取2.4项下混合对照品溶液0.25、0.50、1.00、2.50、5.00mL，分别置于10mL量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，得到系列标准溶液。分别取1µL，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件进行GC-MS/SIM分析。以对照品溶液质量浓度（X，µg/mL）为横坐标，对照品峰面积为纵坐标（Y），进行回归分析，绘制标准曲线，结果见表1。

表1 线性关系结果

2.6.2 精密度试验 取同一份对照品混合溶液，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件连续进样6次，计算峰面积，结果β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的精密度RSD（n=6）分别为0.91%、2.2%、2.3%，表明仪器的精密度良好。

2.6.3 稳定性试验 取同一生苍术供试品溶液，分别在制备后0、2、4、8、12、24h按2.2项下色谱条件和

2.3 项下质谱条件进样分析，结果β-桉叶醇、苍术酮和苍术素峰面积的RSD分别为0.61%、0.49%、1.6%，表明供试品溶液在24h内稳定。

2.6.4 重复性试验 精密称取生苍术粉末6份，按2.5项下方法制备供试品溶液后，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件测定峰面积，结果β-桉叶醇、苍术酮和苍术素含量的RSD分别为1.5%、1.7%、2.9%，表明方法重复性良好。

2.6.5 加样回收率试验 精密称取已知含量的生苍术样品0.25g，共6份，每份加入相同浓度的混合对照品溶液，按2.5项下方法制备溶液后，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件测定，计算加样回收率，结果β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的平均加样回收率分别为97.1%、98.5%、103.9%，RSD分别为2.7%、1.8%、1.5%。

2.7 样品含量测定 称取苍术及其不同炮制品粉末约0.5g，按2.5项下方法制备供试品溶液，按2.2项下色谱条件和2.3项下质谱条件进行测定，计算β-桉叶醇、苍术酮和苍术素的含量，结果见表2。

表2 样品含量测定结果 mg/g

3 讨论

孟河医家认为，“苍术与白术，功用相似，补中逊之，燥性过之”，须炮制抑其燥之偏性[3]1308。苍术的炮制方法颇多，由于炮制方法不同，其作用亦各有偏重。关于麸炒法，《本草蒙筌》[4]认为“麦麸皮制抑酷性勿伤上膈”；关于米泔水制，《本草纲目》[5]载有“苍术性燥，故以糯米泔浸，去其油，切片焙干用”；关于炒焦法，《中药炮制经验集成》[6]认为“炒焦，能温脾祛湿，止泻”；关于泔浸麻油拌炒苍术，《青囊秘传》中将其与大黄等配伍用于治疗痢疾[3]899；关于黑芝麻拌蒸法，《本草通玄》[7]载有“米泔浸三日，去粗皮研，芝麻拌蒸三次，以制其燥”。

现代研究表明，苍术的燥性与其中的挥发油有关。挥发油既是苍术的有效成分，又是其产生毒副作用的主要物质基础[8]。β-桉叶醇、苍术酮和苍术素为苍术挥发油的主要成分。本研究结果表明，苍术炮制后，β-桉叶醇的含量均有不同程度的降低，其降低程度大小依次为泔浸麻油拌炒苍术＞米泔水制苍术＞焦苍术＞麸炒苍术＞黑芝麻拌蒸苍术；苍术酮含量也有不同程度的降低，其降低程度大小依次为泔浸麻油拌炒苍术＞米泔水制苍术＞麸炒苍术＞焦苍术＞黑芝麻拌蒸苍术；苍术素含量降低程度大小依次为焦苍术＞米泔水制苍术＞麸炒苍术＞泔浸麻油拌炒苍术＞黑芝麻拌蒸苍术。炮制引发这些成分含量降低可能与脱水、脱氢反应、辅料吸附等原因有关[9]。

β-桉叶醇具有中枢神经抑制作用[10]；苍术酮具有明显的抑制家兔唾液腺分泌以及增加小鼠饮水量的作用[11]；苍术素可使胃泌素分泌量上升，增强胃平滑肌收缩[12]。经炮制后，挥发油中的这些主要成分含量降低，可降低过量挥发油引起的副作用。本研究结果将为苍术不同炮制品的临床合理应用提供理论支撑，同时也为进一步阐述苍术的炮制机制提供实验依据。