石家庄地区蛋鸡新城疫、禽流感H9抗体检测及免疫程序初探

曹立辉 刘学彬 胡建建 王春肖 张晓云 高国权 冯国瑞

摘要：为了掌握蛋雏鸡和青年鸡的新城疫（ND）和禽流感H9抗体消长规律，形成雏鸡、青年鸡推荐免疫程序，在1、3、6、10、14、20、28、42、54、65、94、114日龄随机抽取24只鸡采血进行抗体监测。结果可知雏鸡1～6日龄ND抗体水平先升高再降低，6日龄即达到71092;7日龄免疫后没有产生足够的抗体，至20日龄达到41092;20日龄免疫后ND抗体在一直上升，至54日龄开始下降，此后开始上升，但至114日龄抗体又开始下降;禽流感H9抗体在7日龄、20日龄免疫后，直至42日龄后才上升，并于55日龄第三次免疫后高于101092，此后至114日龄一直高于101092。综上，根据本试验结果制定了适合石家庄地区的免疫程序。

关键词：ND;禽流感H9;抗体消长规律;推荐免疫程序

H9亚型禽流感与新城疫（ND）仍然是危害养禽业的严重疫病，鸡群一旦感染，传播迅速，数天内波及全群，发病率和死亡率甚至超过90%，给养殖业带来巨大的经济损失。焦凤超等^[1]对产蛋异常的蛋鸡群进行新城疫带毒检测，阳性率为45.00%;张恒^[2]监测鄱阳湖地区活禽市场、家禽散养户、养殖场，2015、2016年度禽流感H9阳性率分别为11.53%和1.03%。虽然疫控中心有免疫程序指导养殖场，但是个别鸡场可能由于防控不当，死鸡、淘鸡现象普遍，制定出适合石家庄地区实际情况的免疫程序已经刻不容缓。只有在整个养殖周期中至少要保证禽流感H9抗体和ND抗体在8log2以上方可达到保护作用。

1材料与方法

1.1试验材料

禽流感病毒H9亚型血凝抑制试验抗原和禽流感病毒H9亚型阳性血清由哈尔滨维科生物技术开发公司生产，鸡新城疫病毒血凝抑制试验（ HI）抗原、鸡新城疫病毒血凝抑制试验（ HI）阳性血清购自青岛易邦生物工程有限公司。

1.2试验动物

1日龄海兰灰产蛋鸡，存栏2，000羽，正定县某养殖场饲养。按常规饲养方法饲养。其免疫接种程序见表1，所有疫苗均购自正规生产厂家。

1.3试验方法

在1、3、6、1 0、1 4、20、28、42、54、65、94、1 14日龄随机抽取24只鸡采血进行ND、禽流感H9抗体检测。为避免出现试剂、人为操作对试验结果的影响，在每次采血完毕分离血清后冷冻，试验结束后解冻由一名试验人员一次性进行检测。

1.4试验方法及标准

ND抗体检测方法按HA-HI，标准为GB/T16550-2008;禽流感H9抗体按HA-HI方法，标准为GB/T18936-2003。

1.5试验数据统计分析

在检测结果中去掉一个最大值和一个最小值，要求最大值和最小值差≥3时方可进行最大差异化处理。试验数据采用EXCEL进行分析，结果用平均值±标准差表示。

2结果与分析

2.1雏鸡（1—28日龄）抗体监测结果

2.2青年鸡（29—114日龄）抗体监测结果

雏鸡ND抗体监测结果（表2）表明，新城疫抗体1日龄为8.141092、3日龄为9.431092、6日龄为7.67log92、此后至20日为4.63log2，均为下降趋势，说明7日龄免疫后至20日龄没有产生足够抗体，分析原因一方面是黏膜免疫起作用而检测的是体液免疫（即循环抗体），另一方面油苗有较长时间的免疫空白期;20日龄免疫7d后（28日龄）抗体随即上升，得益于7日龄免疫细胞记忆作用。新城疫7日龄免疫后，一直下降，20日龄免疫以后抗体提升较快，所以20日龄加强免疫是必须的。

雏鸡禽流感H9抗体监测结果表明，禽流感H9抗体在雏鸡阶段一直处于下降趋势。

青年鸡ND抗体监测结果（表3）表明，42日龄抗体升高，54日龄下降，50日龄第三次免疫后至94日龄抗体一直升高，94日龄最高为10.53log2;随后开始下降，114日龄降为8.91log2。

青年鸡禽流感H9抗体监测结果表明，42～114日龄抗体一直保持高位，免疫3次联苗效果不错。

3讨论和小结

3.1免疫程序制定依据

由以上试验可知，雏鸡1—6日龄ND抗体水平先升高再降低，6日龄即达到7log2;7日龄免疫后没有产生足够的抗体，至20日龄达到4log2; 20日龄免疫后ND抗体在一直上升，至54日龄开始下降，所以ND疫苗在55日龄第三次免疫为佳。此后开始上升，但至114日龄，抗体又开始下降，所以115日龄第四次加强免疫较好。ND疫苗有活疫苗和灭活疫苗，而且ND病毒只有一个血清型，两种疫苗互相促进抗体的生长，7、20、55、1 1 0日龄免疫足可以达到抵御外界病毒的作用。

禽流感H9抗体在7日龄、20日龄免疫后，直至42日龄后才上升，并于55日龄第三次免疫后高于10log2，此后至114日龄一直高于10log2。

3.2由试验结果推荐适合当地的免疫程序

另外，为充分考虑雏鸡免疫系统不健全、免疫应答系统还没有充分建立，7日龄免疫新一支一法一流油苗对机体刺激性大，同时又有点眼的活疫苗，建议使用免疫增强剂促进抗体的生成、减轻免疫應激反应。

建议使用优势流行毒株、针对性更强、免疫副反应小的疫苗，能够提前2～3天产生抗体，缩短免疫空白期，并且免疫持续期长，保护率更高，保证抗体水平均一稳定。

疫苗接种免疫还应该充分考虑鸡场的生物安全措施是否完善，只要环境中没有野毒存在或者很少，不会消耗机体抗体，细胞免疫会维持很长时间^[3]。临床监测抗体是确定免疫时间最可靠的、最直接的依据。

冬季春季是禽病多发季节，防控压力较大，而且日龄越小，感染率越高^[4];应该严格做好免疫工作，加强鸡群的饲养管理和鸡舍环境卫生的管理，严格执行卫生防疫措施，虽然抗体水平普遍较高，但仍出现病毒感染、产蛋率下降、死亡等问题，可能是因为免疫不到位或者毒株发生变异。因此应根据实际情况制定合适的免疫程序，做好免疫，保证抗体水平均一，提高保护率。

参考文献

[1]焦凤超，李迎晓，张敏，等信阳地区商品蛋鸡新城疫血清流行病学调查[J]黑龙江畜牧兽医，2017（02下）：126- 128

[2]张恒2015-2016年鄱阳湖地区禽流感病毒分子流行病学研究[D]北京中国疾控中心病毒病所201 7

[3]祁兴运蛋鸡场疫苗的使用策略[J]当代畜禽养殖业，2017（05）：46-47

[4]汪招雄，欧阳金旭，杨玉莹，杨丰利，江涛，陈雪娇规模化蛋鸡场H9N2亚型禽流感疫苗免疫效果调查[J]中国动物传染病学报，2016，24（01）：15-21