怀柔区新生儿耳聋易感基因携带情况调查与分析

于艳岚 于 洋 费秀珍

首都医科大学附属北京妇产医院怀柔妇幼保健院，北京 101400

听力损失是世界上最常见的感音神经疾病，是由多种环境和/或遗传因素共同作用导致，与90多个基因中的1000多个突变有关，遗传因素占先天性听力障碍的60%左右[1-3]。分子生物诊断技术可及时发现迟发性、药物性耳聋，对新生儿听力筛查起到重要作用[4]。对于许多民族群体来说，遗传性耳聋的最普遍形式是由基因间隙连接蛋白β2（GJB2）的隐性突变引起的[5-6]。相关研究表明，核基因GJB2、SLC26A4、GJB3和线粒体基因12SrRNA是我国常见的4个致聋基因，但不同地区、民族人群可能存在差异[7-10]。北京市2012年即开展新生儿耳聋基因筛查惠民工作，为了解怀柔区人群耳聋基因突变情况，本研究分析了2013年1月～2017年12月在怀柔区助产机构出生的新生儿GJB2、SLC26A4、GJB3和线粒体12rRNA基因的9个热点突变位点资料，旨在探讨怀柔地区新生儿耳聋易感基因携带情况，为临床遗传性耳聋早发现、早诊断、早治疗提供理论依据，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年1月～2017年12月在怀柔区助产机构出生的活产新生儿17290例为本次研究对象，进行耳聋基因筛查。耳聋基因筛查数据信息下载自“新生儿耳聋基因筛查数据库”，该数据库为北京市耳聋基因筛查官方信息管理系统。所有研究对象均自愿接受耳聋基因筛查者作，筛查前由家长签署知情同意书。

1.2 耳聋基因筛查方法

耳聋基因筛查采用晶芯®九项遗传性耳聋基因检测试剂盒（微阵列芯片法），进行常见4个耳聋基因9个热点突变位点的检测，即GJB2基因的35del G、176 del 16、235 del C 和299 del AT 4个位点，GJB3 基因的538 C＞T位点，SLC26A4基因的2168 A＞G和IVS7-2 A＞G，线粒体12s rRNA 基因的1494 C＞T和1555 A＞G。新生儿于生后3d（与遗传代谢病采血时间同时）采集足跟血，在特制带信息页的滤纸卡上制成2个10mm直径圆形血斑，送至指定6家儿童听力障碍诊治机构的耳聋基因筛查实验室完成检测。初检结果经复核后向家长短信发布，并建立网络信息查询平台。对耳聋基因筛查结果显示“未通过”者，家长可通过查询获知咨询就诊方式，接受后续咨询服务。6家儿童听力障碍诊治机构在接诊时，会同时依据该儿童的耳聋基因筛查和新生儿听力筛查结果，给出后续咨询诊断的合理建议。其中耳聋基因筛查“未通过”指4个基因的9个位点出现任一位点的杂合突变，反之则为“通过”。

表1 805例新生儿耳聋基因突变位点情况

1.3 统计学方法

采用SPSS19.0统计软件进行统计分析，基因频数及百分比采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 耳聋基因筛查率

2013年1月～2017年12月在怀柔区助产机构出生的活产新生儿共有17429例，其中17290例进行耳聋基因筛查，筛查率99.20%。

2.2 耳聋基因筛查结果

17290例中，耳聋基因筛查阳性805例，阳性率4.66%。检出GJB2基因突变410例（包括1例235del C杂合突变复合299del AT 杂合突变），检出率为2.37%；检出GJB3基因突变56例，检出率为0.32%；检出SLC26A4基因突变286例（包括1例2168A＞G杂合突变复合IVS7-2 A＞G杂合突变），检出率为1.65%；检出线粒体12SrRNA基因突变47例，检出率为0.27%；同时具有两个基因携带者6例，检出率为0.03%，检出率由高到低依次为GJB2基因、SLC26A4基因、GJB3基因、线粒体12SrRNA基因，见表1。

2.3 耳聋基因突变位点分布

通过对805例耳聋基因阳性个案的分析，发现突变频率最高的位点为235delC（311例），占总突变例数的38.63%；其次为IVS7-2 A＞G（229例），占 28.45%；299 del AT（82例），占 10.19%，538 C＞T和2168 A＞G各56例，各占6.96%；1555 A＞G（47例），占5.84%；176 del 16（14例），占1.74%；235 del C复合538 C＞T（3例），占0.37%；35 del G和235 del C复合2168 A＞G各2例，各占0.25%；2168 A＞G复合IVS7-2 A＞ G、235 del C复合299 del AT和538 C＞T复合2168 A＞G各1例，各占0.12%；未检测出1494 C＞T杂合突变。突变位点前五位分别是235delC、IVS7-2 A＞G、299 del AT、538 C＞T、2168 A＞ G。

2.4 不同年份突变阳性率及突变基因分布情况

2013～2017年不同年份的突变阳性率基本相同，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。而不同年份间各突变基因分布情况不同（χ2=0.000，P=0.000），见表 3。

3 讨论

先天性耳聋是人类严重和不可逆转的状态，据估计，我国每年约有30000名新生儿被诊断为先天性听力障碍，严重影响受影响个人的生活质量和社会适应能[11]。新生儿耳聋基因筛查可将确诊时间提早到7～14d之内，真正做到早发现，早干预，患儿大大收益2012年4月怀柔区积极执行北京市政府决策，努力推进新生儿听力和耳聋基因联合筛查工作。无论是听力筛查还是耳聋基因筛查，任何一项未通过的儿童均需转诊至北京定点诊断机构，进行后期诊断、干预、咨询和指导。

表2 不同年份突变阳性率情况表

表3 不同年份突变基因分布情况表

本研究检测了怀柔区2013～2017年17290例新生儿的常见耳聋基因GJB2、SLC26A4、GBJ3和12SrRNA，结果显示，新生儿耳聋基因筛查率99.20%，其中耳聋基因阳性率为4.66%，与张晚霞等[12]研究结果（4.73%）接近，且不同年份耳聋基因突变阳性率基本相同，差异无统计学意义。相关研究[13]显示，GJB2 235位点突变是东亚人群GJB2基因突变的主要形式，本研究中235delC位点突变检出率最高（1.80%），占GJB2基因突变总例数的75.85%。研究报告[14]说明，携带GJB2基因突变的儿童并非均能通过新生儿传统的筛查方法来鉴定，这可能与诊断耳聋标准有关，也可能由于耳聋确实为迟发性的。本研究检出GJB2基因突变410例，弥补了传统新生儿听力筛查可能漏诊的迟发性或进行性听力下降患儿。除GJB2基因引起的迟发性或进行性听力下降外，线粒体12SrRNA基因1555G位点突变和SLC26A4基因突变患者出生时可不表现为听力损失，而是在接触药物或头部震荡外伤后才出现听力损失。Zhu等[15]综述了河北省9个城市聋校和特殊需要学校318名常染色体隐性非综合征性听力损失学生GJB2、SLC26A4、12SrRNA和GJB3基因突变及其患病情况，结果显示，GJB2基因纯合突变16例（5.03%），杂合突变38例（11.95%），SLC26A4基因纯合突变22例（6.92%），杂合突变59例（18.55%），杂合突变1例。线粒体12SrRNA基因检出率为2（0.63%）。此外，有15个家庭的学生家长有正常的听力。GJB2基因复合杂合突变有3个家系（20%），SLC26A4基因突变9例（60%）。本研究中检出SLC26A4基因突变286例，检出率为1.65%，其中IVS7-2 A＞G杂合突变检出率为1.32%，略高于周怡等[16]在北京地区检出结果（1.00%），占SLC26A4基因突变总例数的80.07%，是SLC26A4基因的主要突变位点；检出线粒体12SrRNA基因均/异质突变共47例，检出率为0.27%，与张晚霞等[12]研究报道（30835中发现74例12SrRNA基因突变）无统计学差异（χ2=0.448，P=0.503）。药物致聋基因的检出，给耳聋患者提前预警，使得他们可以有效避免耳毒性药物的伤害，减少致残率。

综上所述，耳聋基因检测可以从分子水平明确致聋病因，不仅可以发现先天性遗传性聋患者，更重要的是发现药物敏感性聋基因携带者和迟发性聋基因携带者。