饮料中维生素C含量的测定
2018-12-10周宁菱景德镇市市场和质量监督管理综合检验检测中心
□ 周宁菱 景德镇市市场和质量监督管理综合检验检测中心
维生素C（VC）又称抗坏血酸，是人体生长发育及维持健康不可缺少的营养物质，但是人体内不能贮存VC，同时自身也无法合成VC，且人体若严重缺乏VC易引起坏血病[1]。中国营养学会推荐的成人每日VC摄入量为100mg，最高为1000mg，摄入过多或过少都会引起身体的病变，故了解日常饮食，如各种饮料中的VC含量十分必要。
目前，定量VC的方法有2,6-二氯靛酚钠法[2]、碘量法[3]、分光光度法[4]和高效液相色谱法（HPLC）[5]等。本文选择高效液相色谱-二极管阵列检测器法（HPLCPDA）[6]测定常见饮料中VC的含量，此法根据不同物质有不同光谱的特性来定性，通过峰面积来定量。本实验以8种不同品牌的饮料为检测样本，对其VC含量进行测定，并讨论开盖后环境温度和放置时间对VC含量的影响，以期为人们科学补充VC提供参考建议。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
高效液相色谱仪：Waters e2695型（配置Waters 2998型二极管阵列检测器）、超纯水机（Millipore EXPRESS40）、紫外分光光度计（岛津UV 2550型）、VC标准品（中国食品药品检定研究院）。
1.2 方法
1.2.1 样品中VC的测定方法
采用HPLC-PDA法测定饮料中的VC含量[6]，色谱条件分别是：色谱柱为ODS C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为0.1%醋酸溶液，流速为1.0mL/min，柱温为28℃。
1.2.2 标准曲线的绘制
精密称取25.00mg VC标准品，用超纯水定容于100mL棕色容量瓶中，配制成250mg/L标准溶液，分别精密量取不同体积的250mg/L VC标准溶液，配制成200mg/L、150mg/L、100mg/L、50mg/L、10mg/L 的VC标准系列溶液。
1.2.3 样品中VC含量的测定
在超市购买不同品牌的不同种饮料，分别有绿茶（编号1、2）、红茶（编号3）、功能饮料（编号4）、茉莉茶（编号5）、橙汁（编号6、7）、果蔬汁（编号8）。吸取适量经不同处理后的样品，经0.45μm针头过滤，待测。
2 结果与讨论
2.1 检测波长的选择
在200～400nm范围内测定VC标准溶液的紫外吸收光谱图（见图1），由图1可知，VC在243nm处有最大吸收，故选择243nm作为检测波长。
图1 VC光谱图
2.2 标准曲线及线性范围
在1.2.1的色谱条件下，吸取不同浓度的VC标准溶液进样分析。VC标准溶液的高效液相色谱图（见图2），再以标准溶液浓度（mg/L）为横坐标，峰面积（微伏×秒）为纵坐标，绘制标准曲线。从图3可知，VC线性回归方程为y=53278x-263819，R2=0.999，线性关系良好。
2.3 常温下8种饮料中VC含量的比较
在1.2.1的色谱条件下测定8种饮料中的VC含量（见图1和表1）。从表1可知，被测定的8种饮料中，VC含量最高的是茉莉花茶，为494.6±0.5mg/L（N=3）；最低的是功能性饮料，为52.3±1.3mg/L（N=3），前者是后者的9倍。不同饮料中含有的VC含量差值较大，李仪等[7]也有类似结果。同一品种饮料之间VC含量也相差较大，如编号1的绿茶是编号2的2.0倍，编号7的橙汁是编号6的4.7倍。
另外，编号8的果蔬汁VC检测含量为0，在色谱图中未出现目标峰，利用二极管也排除了其他峰为目标峰的可能性。同时，经不同后续处理的果蔬汁中也未检测出VC，但果蔬汁的配料表中显示为添加了VC，这可能是因为果蔬汁内还有较多的果肉，样品前处理方法不能简单的过滤处理，具体原因还有待于深入研究。
图2 VC标准品（A）和样品（B）高效液相谱图
图3 VC标准工作曲线图
2.4 开盖后放置时间对VC含量的影响
将8种饮料开盖取样后，拧紧瓶盖，置于常温下，分别于12h和24h后各取样一次，各饮料中VC含量变化结果见表1。从表1可知，开盖12h后，VC含量降低了16.2%～52.2%，而茉莉花茶只降低了6.1%；开盖24h后，VC含量降低了30.8%～66.4%，茉莉花茶为16.3%，因此建议饮料开盖后尽快饮用。
2.5 开盖后温度对VC含量的影响
将8种饮料开盖后，分别于0℃冷冻12h、常温放置12h、45℃水浴12h、65℃水浴12h，经不同处理后的饮料中VC含量见表2。从表2可知，经0℃、常温、45℃和65℃放置12h，各饮料中VC含量变化分别是8.5%～24.6%、16.2%～52.2%、44.0%～79.7%和47.4%～81.6%，但茉莉花茶中VC含量变化不大。可见，随着温度升高，饮料中VC含量大幅下降，因此不建议将饮料加热饮用，若有剩余，可放于冰箱中冷冻。
3 结论
目前，市场上销售的饮料品种繁多，VC也已被添加在各类饮料中，测定饮料中VC的含量可为人们的每日VC摄入量提供参考。本文通过HPLC-PDA法对8种饮料中VC的含量进行测定，同时探究了开盖后环境温度和放置时间对各饮料中VC含量的影响。结果表明，开盖后随着环境温度的升高或放置时间的延长，饮料中的VC含量均出现了显著的降低。因此，饮料开盖后建议尽快饮用完，若有剩余，可置于0℃冷冻；高温更易加快VC的流失，尽量不要加热饮用。
表1 存放时间对饮料中VC含量的影响
表2 温度对饮料中VC含量的影响
