气相色谱-质谱联用法对5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22定性定量分析

崔明伟 吴 波 曹 煜

（南京市公安局禁毒支队 江苏 南京 210012）

1 引言

新精神活性物质（NPS）[1]因其合成方法简单，结构更新速度快，且具有类似列管毒品的麻醉、兴奋或致幻作用，其生产、贩卖和滥用形势日益严峻，已成为全球流行的第三代毒品。截至2015年，UNODC预警系统发现644种NPS，国际禁毒公约管制的已达251种。截至目前，我国管制的新精神活性物质已达138种，然而无论在中国乃至世界范围内实际的NPS种类和数量远不止于此[2]。

5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22均属合成大麻素类，其中5F-AMB和PX-2属吲唑甲酰胺类，FUBPB-22属甲酸喹啉酯类。相关研究文献显示，由于国内各禁毒实验室建设尚处于起步阶段，面临检测设备单一、检测人员少，查获NPS种类不断增加，工作人员对一些新精神活性物质的认识不够深入，数据库不完备，相关法律法规尚不完善等问题，导致对查获未知的新精神活性物质成分和含量的鉴定工作难度增大，检出率低[3]。目前对NPS的检测技术主要有气相色谱质谱联用（GC-MS）分析技术、液相色谱质谱联用（LC-MS）分析技术[4]、高分辨液相色谱质谱联用（LC-Q/TOF）技术和石墨印刷电极技术等分析技术[5-6]，但针对上述3种合成大麻素类新精神活性物质同时进行检测的方法未见报道。本研究采用传统的气相色谱-质谱联用分析技术和气相色谱法对上述3种新精神活性物质进行定性定量分析，通过实验验证，该检测方法检测时间短，结果准确可靠，能够满足公安基层禁毒部门实战需求。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

2.1.1 仪器设备

配有自动进样器的安捷伦Agilent 5977A/7890B气相色谱-质谱联用仪；安捷伦Agilent 7890B气相色谱仪（配有自动进样器和FID检测器）；超微量电子天平（METTLER TOLEDO XS3DU）；涡旋振荡器（SCILOGEX MX-S）。

2.1.2 试剂

3种新精神活性物质标准品：5F-AMB、PX-2和FUB-PB-22均来源于公安部禁毒局国家毒品实验室；实际案件查获样品；甲醇（色谱纯）；内标物溶液：称取SKF525A10mg于100mL容量瓶中定容，配制成0.1mg/mLSKF525A内标物溶液（置于冰箱中保存，保存时间2个月）备用。

2.2 标准品溶液的配制

2.2.1 标准品母液的配制

分别称取5F-AMB、PX-2和FUB-PB-22标准品5mg于5mL容量瓶中，用0.1mg/mLSKF525A溶液定容，配制成1mg/mL的标准品母液，供GC/MS法定性和GC法定量绘制标准工作曲线用。

2.2.2 混合标准品的制备

分别取上述配置好的标准品母液各200µL于同一进样瓶中，涡旋振荡混匀，供GC/MS定性分析用。

2.3 色谱质谱条件

2.3.1 GC/MS色谱条件

色谱柱DB-5MS，30m×0.25mm×0.25µm；进样口温度280℃；柱温初温200℃，升温程序：以20℃/min的速率由200℃升至300℃后，保持20min；载气为高纯氦气，流速1mL/min；进样量1µL，分流比为50∶1；溶剂延迟3min。

2.3.2 GC/MS质谱条件

电离源EI，电离电压70eV，离子源温度为230℃，接口温度为250℃，四级杆温度为150℃，扫描范围50～500amu，全扫描方式，其他条件为调谐值。

2.3.3 GC色谱条件

色谱柱HP-5，30m×0.32mm×0.25µm；载气为高纯氮气，流速1mL/min；分流比为20∶1；其他条件同GC/MS色谱条件。

2.4 查获样品的制备

2.4.1 定性分析样品预处理

取待测样品用玛瑙研钵研磨均匀后，称取适量，装入15mL离心管中，加入5mL甲醇溶解，超声2min，待样品溶解后取1.5mL装入进样瓶中，供GC/MS分析。

2.4.2 定量分析样品制备

根据定性分析结果，分别对定性结果为5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22的3种检材进行取样，用玛瑙研钵充分研磨均匀后，称取检材约5mg于5mL容量瓶中（同一份检材平行称取两份），用0.1mg/mL内标溶液定容，充分振荡混合，过滤后取适量于进样瓶中，供GC/FID分析。

3 结果与讨论

3.1 方法条件的选择

本实验选用甲醇作为提取溶剂，经振荡混均，超声溶解、过滤等方式进行前处理。本实验定性方法选用的色谱柱为DB-5MS柱（30m×0.25mm×0.25µm）。在保证分析时间尽可能短的前提下，考察了不同升温速率和初始温度对各物质出峰时间的影响。

结合图1～3和表1可知，在方法1中3种物质只检出1种（5F-AMB），其他2种未检出，不能满足检验需求；虽然方法2、3均能将3种物质同时检出，但方法2所需时间较长，因此，本文采用方法3。笔者认为，由于3种新精神活性物质分子质量均较大，出峰所需时间较长，考虑到只检测上述3种物质且满足时间紧任务重的实战需求，可以将初始温度提高至200℃，并以20℃/min的速率升至300℃，保持20min。

图1 3种混合标准品分析方法1

图2 3种混合标准品分析方法2

图3 3种混合标准品分析方法3

3.2 方法的特异性

运用以上确定的气质分析方法，从图3可以看出3种新精神活性物质在此条件下均能得到较好的分离，且空白试验无干扰。结合标准品的保留时间和特征离子峰，可对各物质进行准确定性。各物质的保留时间及特征离子峰如表2所示。

表1 3种分析方法考查表

3.3 方法的检测限

将1mg/mL的3种物质标准品溶液分别逐级稀释至100µg/mL、50µg/mL、10µg/mL、5µg/mL、1µg/mL，并按照上述条件进行检测分析，以最低的检出浓度确定为该物质的最低检出限，如表3所示。

从表3中可以看出，5F-AMB的最低检出限为5µg/mL，PX-2的最低检出限为5µg/mL，FUBPB-22的最低检出限为10µg/mL。

表3 3种新精神活性物质的最低检出限

3.4 方法的重现性

在选定的仪器分析条件下，将浓度1mg/mL的混合标准溶液连续进样10次分析，分别计算3种组份的10次保留时间的平均值及相对标准偏差，保留时间均值及相对标准偏差（RSD）如表4所示。

表4 3种物质保留时间平均值及相对标准偏差

从表4中可以看出，5F-AMB、PX-2、FUBPB-22的10次分析保留时间平均值的相对标准偏差分别为0.008%、0.02%、0.005%，可见该方法重现性良好。

3.5 定量方法结果评价

3.5.1 标准工作曲线绘制及监测

用2.3中GC色谱条件，采用1.0mg/mL、0.5mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.02mg/mL、0.01mg/mL这6个浓度梯度的标准系列溶液绘制成线性范围为0.01～1.0mg/mL的5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22 的3种标准工作曲线，标准工作曲线随内标储备液的更换而重新绘制。

采用浓度为0.05mg/mL和1.0mg/mL的标准物质溶液作为监测样品，建立标准工作曲线时，每个监测样品各分析10次，计算5F-AMB（或PX-2或FUB-PB-22）与SKF525A峰面积比值的平均值及标准偏差（SD），并计算平均值±3SD值。3种分析物的线性回归方程如表5所示。

表5 3种分析物的线性回归方程

由表5可知，建立的3条标准工作曲线线性回归方程的相关系数均在0.999～0.99999之间，线性范围为0.01～1.0mg/mL；每次检验样品前先分析高浓度和低浓度的两项监测样品，若监测样品的结果均在平均值±3SD之间，则标准工作曲线有效，否则应重新绘制。

4 案例应用

2016年8月，江苏省南京市公安机关破获了一起特大制售新精神活性物质案，捣毁制售毒窝点1个，查获新精神活性物质及原料67桶1463包，重量达1444.7公斤。技术人员通过本研究建立的新方法对该案件中1463份检材进行检验，检出含有5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22 这3种新列管高毒性毒品共计96.615公斤，折合海洛因重达147.5公斤，分析结果如表6所示。

表6 案件查获物中3种新型毒品的分析结果

5 结论

当前新型精神活性物质的定性定量分析方法并不多见，建立涉及NPS的检测方法显得尤为重要。本研究建立了一种新精神活性物质的GC/MS定性方法和GC/FID定量方法，且同时能够对5F-AMB、PX-2、FUB-PB-22这3种新精神活性物质进行高效快速的定性、定量检验，方法稳定、快捷、易于操作，且成功应用于实际案例的分析检验。