兽用疫苗生产中动物细胞悬浮培养的优化与应用简介

高习文 胡燕玲

摘要：最近这些年来，随着养殖业的不断壮大，饲养者对于动物疾病的防治意识也逐渐加强，兽用疫苗的发展趋势也呈上升的状态，其中在兽用疫苗生产的过程中对于动物细胞悬浮培养技术也更加受到业内人士的关注，目前在各类生物制品以及兽用疫苗的研究和生产过程中加以融入了动物细胞悬浮培养技术。目前以生物反应器技术作为基础的细胞悬浮培养技术平台正在逐步的被建立起来，而且在研究过程中呈现明显的成熟发展的趋势，能够在很大程度上对于兽用疫苗的生产发挥有力的推动效果。现主要介绍兽用疫苗生产中应用细胞悬浮培养技术。

关键词：动物细胞；悬浮培养；兽用疫苗；生物反应器

中图分类号：S858

文献标识码：B

文章编号：2095-9737（2018）06-0137-01

细胞悬浮培养技术主要是基于人工条件之下，在生物的反应器中大规模并且高效率的培养动物细胞，以广泛的应用于生物制品生产中。此外，细胞悬浮培养技术目前已经在蛋白质相关药物研发、疫苗生产、干细胞移植等各领域得到了比较广泛的应用。

1 细胞悬浮培养的优化

疫苗生产工艺的研发过程中，以提高产率和保证产物质量的可靠性为最重要的生产目的。实际研究过程中以悬浮细胞的选择、最适生长培养基的选择、生物反应器和生产工艺的选择等几个方面作为悬浮培养技术的组成因素。1. 1 选择及悬浮驯化动物细胞系

兽用疫苗的生产过程中，疫苗的安全性、有效性及成本控制是重要的优先考虑因素，在细胞系的选择及悬浮驯化两个方面加以重点研究可以有效的优化以上三点。同种细胞与准备扩增的病毒会发生相互的作用，采取大规模的形式对某种细胞系进行疫苗生产之前，应该与準备增殖的病毒通过相互适应的方式进行选择。细胞不同的生长特点会对扩大培养和扩大培养工艺具有决定性作用。处于不同状态的同一种细胞在培养的时候，对于病毒表现出的敏感性自然存在很大的差异。保证稳定性是在细胞驯化过程中最重要的任务，生产中主要就是通过逐渐降低培养基中的血清浓度实现稳定性的维持目标。如果在培养过程中导致细胞受损后则很难再让其恢复，所以在驯化过程中应该一直保证细胞活力高于90%。

1.2 选择最适生长培养基

细胞悬浮培养技术的研究过程中，对于适宜培养基的选择是最重要的内容。通常动物细胞生长必需的营养成分就是血清，但是因为血清具有比较复杂的成分组成，所以自然会给疫苗的生产和研发造成一定的困难。如今，在动物细胞悬浮培养过程中，以往使用的常规培养基已经逐步的被无血清培养基替代，这样就在很大程度上将血清培养基被污染的几率相应的降低，并且相应的降低了生产的成本。根据相关细胞悬浮培养技术的相关报道可知，无血清微载体细胞培养技术在多种疫苗的生产及组织T程细胞的扩大培养中已经广泛的采纳应用，市场发展前景非常可观。但是在实际的研究过程中，采用仍然存在着需要解决的问题，即无血清培养而诱发的细胞凋亡问题。日后的相关研究中应该加以重视。

1.3 选择适宜的生物反应器

生物反应器在细胞悬浮培养过程中是关键的设备。而生物反应器在研究中所具备的最重要的特点即逐级放大，因为实际疫苗生产的成本会直接的被细胞规模影响。目前，细胞悬浮培养技术进行扩大培养主要是通过增加反应器数量或加大反应器体积两种方式，增加小的反应器的数量在实际的研究中操作起来相对会更简化，但是却有很高的生产成本，所以研究中一般都是会通过增大反应器的体积而实现的。实际的生产研究中在选择反应器时应该经过综合的考量之后对生物反应器加以选择。

1.4 选择生产工艺

细胞悬浮培养工艺按照培养方式主要分为分批式操作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作。

2 细胞悬浮培养在猪用疫苗生产中的应用

我国猪饲养逐渐呈现集约化、规模化的趋势发展，传染性疾病在猪群中流行会给饲养者带来比较大的影响。我国对于一些传染病的主要控制措施是接种疫苗，这样如果随着悬浮细胞培养技术的不断发展且趋于成熟，已经有很多种疫苗在大规模的生产。

3 小结

生物反应器悬浮培养技术在国外已经在兽用疫苗的生产领域得到了非常广泛的应用。但是目前在我国，细胞悬浮技术起步较晚，但是目前已经得到了快速的发展。伴随细胞悬浮培养技术的不断进步，所以生物反应器进行细胞高密度的培养以生产兽用和人用疫苗是发展的目标。随着深入的研究，细胞悬浮培养的生产工艺进一步完善，生物反应器也在很大程度上得以更加合理的设计，这样悬浮细胞培养技术的应用会相对容易些。如果在实际的应用生产中可以通过不断的对动物细胞培养技术展开大规模的生产，这即将在今后兽用疫苗规模化生产的发展道路上具有一定的推动作用。