板蓝根颗粒的指纹图谱质量控制研究

董敬翠

摘 要：目的：通过指纹图谱这一质量研究方法，对颗粒状的板蓝根药品的实际质量进行检测，重点研究其质量的稳定程度。方法，结合HPLC检测技术，确定专属于本次实验的分析柱，完成梯度洗脱处理工作，缓冲液为酸碱度适宜的醋酸钠溶液。对于一定检测条件下的氨基酸指纹图谱进行查看，在移植距离系数以及角余弦系数的前提下，对不同批次的板蓝根样品的质量进行测定，并对其据具体的一致程度进行检测。结果：完成针对颗粒状板蓝根的质量鉴定工作后发现，选择应用的HPLC技术具有较高的稳定性、精密度，同时其重现性也被呈现出来。结论：本次测定板蓝根颗粒过程中，选择的质量检测方法具有极强的可控性，在实际的药物质量控制中可以被应用。

关键词：板蓝根颗粒；指纹图谱；质量控制

中图分类号：R927.11 文献标志码：A

板蓝根是一种中药药材，是菘监植物的根部，该植物属于十字花科，具有良好的清热解毒效果，同时还有利咽凉血的应用效果。在将板蓝根药材制成药品时，颗粒是比较常见的剂型，服用方便，在对病毒性感冒以及流行性感冒进行预防时，可以使用板蓝根颗粒。该药品的主要应用优势在于抗病毒活性比较强。为了提升该药品的实际药效，相关研究人员进行了筛选试验，对其具有的活性进行检测，其在抵抗病毒时，内部氨基酸起到的作用比较大。在控制该药品的而质量时，一般也需要对氨基酸成分进行控制，荧光反应方法是控制效果极好的方法，但是随着板蓝根颗粒出现变动，该种方法并不能对控制要求进行满足，板蓝根药材的实际用量也失去了控制，先对质量控制方法进行探究，探究过程如下：

1 材料与方法

1.1 一般材料

Agilentl l00系列高效液相色谱仪、Agilent自动进样器、Agilent DAD检测器、BDS C18 色谱柱；对照品L—缬氨酸、L—精氨酸、L—亮氨酸、L—氨基丁酸、L—脯氨酸、L—天冬氨酸、L—谷氨酸均购自可靠厂家；2，4—二硝基氟苯（DNFB） （批号D0835）；乙腈（色谱醇），实验用水为双蒸水。

1.2 方法

色谱条件：色谱柱：Agilent BDS C18柱（10μm，4.6mm

×250mm）；流动相：pH6.4的醋酸钠缓冲液（A）—乙腈（B）（95∶5），梯度洗脱，0min～5min，保持A∶B=（95∶5）；5min～60min，B线性上升至40%，流速均为1.0mL/min；检测波长360nm。柱温：室温。在上述条件下分别准确吸取混合氨基酸对照品供试液适量，以0.45μm微孔滤膜过滤，进样5μL，理论塔板数按精氨酸计，不低于3000。

精密度试验分析：首先制备混合型的氨基酸溶液，将其作为对照品使用，配置量为5μL，取样工作需要开展5次，根据已有的色谱条件进行检测，对保留氨基酸的时间进行控制，范围为0.1%～0.3%，各个对照品的峰值面积也确定为0.5%～1.2%，该仪器具有的精密度比较稳定，仪器方面并不会产生影响实验的问题。

制备供试液：在制备质量控制工作之中的供试液时，需要按照以下方法进行，将待检测的氨基酸对照品精准称取30mg，称取对照品放置在常用的量瓶之中，借助蒸馏水对溶液定容，将待测溶液摇晃均匀，静置状态放置一段时间之后，吸取0.5mL溶液，分别放在多个小量瓶之中，加入适量的乙腈溶液与醋酸钠溶液，将其进行水浴处理，温度为60℃，反应时间为30min，取出后，加以冷却处理，继续用蒸馏水进行定容。

制备样品供试液：采用精密称取的方法获得2g板蓝根颗粒药品，加入适量清水，溶解药品，吸取1mL药品同样放置于小量瓶之中，同样加入适量的乙腈溶液与醋酸钠溶液，水浴处理条件也保持一致，后续冷却定容处理方法均与制备对照品溶液的方法相同。

重现性研究实验，对6批次的板蓝根药品进行检测，并绘制相应的HPLC圖谱，在选定的板蓝根药品中，将实际共有峰的峰面积作为实验结果指标，进而明确变异系数数值比较小，低于0.5%，该图谱具有的重现性值得肯定。

2 结果

在进行质量评价活动时，首先需要根据绘制的图谱来对质量能否保持一致性进行判断，图谱分析是一种相对直观的分析方法，能够直接展现出最终测定结果，直接对共有峰信息进行确定，在有了量化判断指标之后，选择控制模式的工作也具有了可靠的参照依据，在确定最终的质量控制方法时，必须要以板蓝根药品的实际生产情况为准，无论是控制模式与质量评价都要既简单又有良好的效果。

通过与混合氨基酸对照品的色谱图对比（如图1所示），发现，板蓝根颗粒中以脯氨酸和精氨酸的含量最高，其次是缬氨酸。

3 讨论

中药药品的成分一般比较复杂，主要是因为其内部含有的活性成分比较多，这给药品质量检定工作带来困难，现有的质量测定技术并不能完全地将中药的质量信息反映出来，本次选用的指纹图谱技术也属于新型检定技术，尚存不确定因素，绘制出的指纹图谱并不能真实地对药品的药效有效反映，但是在对药品的质量进行控制时，应用指纹图谱却是可行的，尤其是在保障不同批次药品的质量的一致化程度时，该种方法具有的现实应用价值更高。

本文选择的研究方法比较成熟，能够使衍生化受到的来自于反应时间与反应温度的影响，如果水浴的温度没有达到60℃，需要比较长的反应时间，但是如果温度升高，超过了60℃，只需要0.5h的时间就能完成整个反应过程，在高于60℃，低于100℃的温度范围之中，即使出现了升高的现象，衍生化现象受到的影响也比较小。

在绘制指纹图谱的工作结束后，研究人员还需选出最为合适的控制模式以及标准化的指纹图谱，否则质量控制工作仍旧无法顺利进行。

总之，相关人员还需要继续调整制备板蓝根颗粒的方法，消除该颗粒状药品的缺陷，提升其药物应用价值，同时使其具有的更高的质量，在控制药物质量时，也需选出可靠的质量标准。

参考文献

[1]林琳.板蓝根颗粒质量控制、血清药理学及药物代谢学的初步研究[D].辽宁：中国医科大学，2011.

[2]戴平，韦汉燕，黄凤香，等.板蓝根颗粒HPLC指纹图谱研究[J].世界最新医学信息文摘，2016（a0）：193.

[3]梁丽丽，王志江，梁伟玲.板蓝根高效液相色谱指纹图谱的研究[J].中国化工贸易，2015，7（25）：253.