楸叶泡桐种子的苯乙醇苷类化学成分研究

薛 景 ，王英爱 ，贾献慧，杜成林，唐文照*

（1. 济南大学 山东省医学科学院 医学与生命科学学院，山东 济南 250200；2. 山东省医学科学院 药物研究所国家卫生部生物技术药物重点实验室 山东省罕少见病重点实验室，山东 济南 250062）

玄参科泡桐属植物楸叶泡桐（P. catalpifolia Gong Tong）为多年生落叶乔木，广泛分布于中国各地。其花、叶、树皮与果实作为中草药在民间用于治疗肠炎、扁桃体炎、桃体炎、支气管炎和痢疾等[1]。泡桐属植物含苯丙素、黄酮类、萜类、苯乙醇苷类化合物，后者具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等作用，尤以抗菌活性最为显著[2]。目前，国内外对该属植物中的白花泡桐、兰考泡桐、毛泡桐有较多的研究，而学术界对楸叶泡桐的研究较少。我们实验室前期对楸叶泡桐果皮的化学成分进行了研究，从中分离得到一些碳取代香叶基黄酮、三萜与生物碱类化合物[3-5]。经HPLC-DAD-MS/MS检测，发现种子与果皮中的主要成分存在很大差异，在此基础上，我们继续对楸叶泡桐种子的化学成分进行研究，从其70 %乙醇提取物中分离纯化得到7个苯乙醇苷类化合物，分别鉴定为ilicifolioside A 和isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。其中, 化合物3，4，5为首次从泡桐属中分离得到, 化合物1，2，6，7为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

1.1 仪器

Bruker AVANCE 600 MHz 核磁共振波谱仪（TMS为内标）；Agilent Trap VL 型质谱仪；U-3000型紫外光谱测定仪（日本 Hitachi 公司）；Agilent 1200 series 高效液相分析仪（美国安捷伦）；高效液相色谱仪（LC-20AB型泵，SPD-20A型紫外检测器，LC Solution液相色谱数据工作站，日本岛津公司）；制备色谱柱 ODS-A（250 mm×20 mm，5 μm，YMC）；分析色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）； 柱层析硅胶，薄层色谱硅胶 GF254（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20（Amersham Biosciences 公司）；ODS 柱色谱填料（50～75 μm，YMC 公司）；制备HPLC所用甲醇（色谱纯，美国TEDIA公司）；其他试剂均为分析纯。

1.2 材料

实验用楸叶泡桐种子采自临沂市费县山区，原植物经山东省医学科学院药物研究所孙敏耀副主任药师鉴定为玄参科泡桐属植物楸叶泡桐（P.catalpifoliaGong Tong），样本（No. 20121018）保存在山东省医学科学院药物研究所标本室。

2 提取与分离

取干燥的楸叶泡桐种子4.0 kg，用70 %乙醇连续加热回流提取3次，每次2 h，合并提取液后减压浓缩得到乙醇提取物，经水混悬的乙醇提取物用乙酸乙酯与正丁醇萃取，得到萃取物。将正丁醇萃取物经硅胶柱层析，以二氯甲烷-甲醇溶剂系统梯度洗脱，薄层色谱检测，合并Rf值相同组分。其中， 二氯甲烷-甲醇 （90:10） 洗脱部分经反复硅胶柱层析、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱、HPLC制备得7个苯乙醇苷类化合物ilicifolioside A和 isoilicifolioside A混合物（1），isoacteoside（2），plantalloside（3），orobsnchosid（4），darendoside B（5），acteoside（6），tomentoside（7）。

3 结果

3.1 结构鉴定

图1 部分代表性化合物的结构式

分离得到的7个化合物都均为无定型粉末，用10 % HCl进行酸水解，薄层色谱显示葡萄糖与鼠李糖的存在。它们具有相似的核磁共振图谱，均含苯乙醇苷元、咖啡酰基（化合物5除外）、葡萄糖基与鼠李糖基，经结构解析，均为苯乙醇苷类化合物，部分代表性化合物的结构式见图1。

化合物1：淡黄色无定形粉末，分子式为C31H40O16，mp124～128 ℃，该化合物的TLC用1%FeCl3乙醇溶液喷洒，显黑绿色。ESI-MSm/z：691.0[M+Na]+, 相对分子质量为668；IR（KBr）vmax（cm-1）：3400, 1705, 1695, 1620, 1605 cm-1;UV λmax（MeOH）（nm）：220, 234, 290, 327；核磁数据（见表1与表2）与文献[6]报道基本一致，故鉴定化合物1为isoilicifolioside A。

化合物2：黄色粉末，分子式为C29H36O15，mp 132～135 ℃，FeCl3检测呈黑褐色。ESI-MSm/z：647.1[M+Na]+, 相对分子质量624；核磁数据（见表1与表2）与文献[7]报道基本一致，故鉴定化合物2为isoacteoside。

化合物3：黄色粉末，分子式为C29H34O15，酸水解检出葡萄糖和鼠李糖；ESI-MSm/z：645.1[M+Na]+，相对分子质量为622；核磁数据（见表1与表2）与文献[8]报道基本一致，故鉴定化合物3为plantalloside。

化合物4：黄色粉末，分子式为C29H34O15。ESI-MSm/z：645.0[M+Na]+, 相对分子质量为622；核磁数据（见表1与表2）与文献[8]报道基本一致，故鉴定化合物4为orobanchoside。

表1 化合物1～7的1H-NMR 数据（600 MHz，氘代甲醇）

表2 化合物1-7的13C-NMR 数据（150 MHz，氘代甲醇）

化合物5：白色粉末，分子式为C21H32O12。ESI-MS：m/z477.1[M+H]+；相对分子质量为476。核磁数据（见表1与表2）与文献[9]报道基本一致，故鉴定化合物5为darendoside B.

化合物6：黄色粉末，分子式为C29H36O15，mp 135～138 ℃。ESI-MS：m/z625.0 [M+H]+，647.1[M+Na]+，相对分子质量为624。UV（MeOH）：λmax326, 289 nm。IR（KBr）vmax（cm-1）：3384, 2855, 2925, 1717, 1635, 1521, 1385;核磁数据（见表1与表2）与文献[7]报道基本一致，故鉴定化合物6为acteoside.

化合物7：黄色粉末，分子式为C30H38O16，mp 144-148℃。ESI-MSm/z: 655.2 [M+H]+, 相对分子质量为654；UV λmax: 208, 220, 290, 330 nm；IRvmaxcm-1: 3400, 1700,1610, 1520, 1450, 1280, 1160,1040; 核磁数据（见表1与表2）与文献[10]报道对照基本一致, 故鉴定化合物7为tomentoside。

4 讨论

泡桐属植物所含的化学成分包括三萜类、苯乙醇苷类、碳取代香叶基二氢黄酮类化合物等，课题组前期研究发现楸叶泡桐果中含有大量的黄酮类化合物，继续研究得到了前两种成分，但种类较少，远低于黄酮类化合物。楸叶泡桐的种子包含在果皮中，其所含有的化学成分未见研究报道。文献报道苯乙醇苷类化合物在泡桐属植物中多存在于木材与树皮中，本项研究丰富了该类化合物的植物来源，也为该植物资源的开发利用提供了科研依据。