浅析微生物标本培养前涂片革兰染色镜检的临床研究意义

胡品

贵航贵阳医院，贵州贵阳 550000

微生物培养、检验对患者临床治疗有着指导作用，近年来，随着细菌耐药性不断升高，微生物检测在临床中的应用率越来越高。微生物检测能够对患者疾病诊断、治疗进行指导，微生物检验结果直接影响患者用药合理性和治疗效果，而微生物标本培养前开展革兰染色镜检直接影响检验结果，同时能够降低资源浪费[1]。该次研究在2017年4月—2018年4月间以136份微生物标本为样本，调查微生物标本培养前涂片革兰染色镜检的意义，旨在为临床提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以该院送检的136份微生物标本为样本，包括门诊样本和住院部样本。其中痰液标本32份、尿液标本53份、分泌物标本41份，其他标本10份。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌来自我省检验中心。

1.2 方法

涂片染色镜检：于载玻片中心滴一滴生理盐水，用无菌棉签蘸取少许标本混入生理盐水中，而后采用无菌针将标本与生理盐水混匀，放在通风处自然风干。标本风干后放在酒精灯上加热干燥，而后进行革兰染色、镜检。

培养与鉴定：将标本接种在不同的平板上，包括血平板、巧克力板等，将接种后的平板放在5.0%二氧化碳、33～37℃环境中培养24～48 h。而后观察培养菌、优先致病菌，并提取上述菌落进行涂片、染色、镜检。

1.3 判定标准

合格标准：痰液标本为脓性、粘稠性或血性样，低倍镜视野中白细胞数量不低于25个，鳞状上皮细胞数量不高于10个视为合格标本。部分标本白细胞数量会低于25。如若发现形态明显的致病菌或致病菌的染色形态要立刻进行培养并回报结果[2]。

尿液标本在油视镜观察下平均每个视野有一个以上细菌则证明感染可能性非常高，需要进行进一步筛查。若油视镜下视野达到平均每个视野有一个以上的细菌标准则视为合格标本。

涂片、培养结果符合性：涂片中疑似致病菌形态、性质与培养结果基本相同视为符合。

1.4 统计方法

文中数据采用SPSS 18.0统计学软件处理，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 标本合格率以及菌种

136份标本中合格标本125份，不合格的标本9份。有4份为痰液标本，有3份为尿液标本，有2份为其他标本。痰液标本中肺炎克雷伯菌检测数量最多，13个；尿液标本中屎肠球菌检测数量最多，6个；分泌物标本中大肠埃希菌检测数量最多，8个；其他标本中大肠埃希菌检测数量最多，4个。见表1。

表1 菌落培养状况

2.2 合格涂片与培养结果符合率

痰液标本镜检结果与培养结果的符合率为66.7%、尿液标本符合率为77.8%、分泌物标本符合率为 85.0%、其他标本符合率为 100.0%（χ2=1.25、1.17、1.09、1.00，P＜0.05），详见表 2。

表2 涂片与培养结果符合率

3 讨论

涂片镜检是将微生物标本制成涂片进行革兰染色而后在显微镜下观察微生物形态确定是否存在致病菌以及致病菌种类[3-4]。涂片镜检能够对细菌种类进行鉴别，了解细菌耐药类型以及耐药程度，对患者疾病进行诊断，对需要补充的检查进行提示，判断标本合格率，更有利于细菌的鉴定[5-6]。

结果可见，136份标本中合格标本125份，不合格的标本9份。有4份为痰液标本，有3份为尿液标本，有2份为其他标本。不合格的涂片均符合上述标准，因此，在开展培养前需要对涂片进行镜检，针对不合格的标本进行筛除。筛除不合格的标本不仅能够提升检验准确率，有利于患者疾病诊断，同时能够指导临床合理用药，同时也能够降低患者经济损失，也能够减少医疗资源浪费[7-9]。

在表2中可见，痰液标本镜检结果与培养结果的符合率为66.7%、尿液标本符合率为77.8%、分泌物标本符合率为85.0%、其他标本符合率为100.0%，两者差异有统计学意义。针对不符合的标本进行分析后我们认为，导致结果误差的因素与以下原因有关。①涂片过薄或标本取材部位不当；②细菌在镜下呈现的状态不同，容易混淆；③接种过程中标本被污染或标本保存不当受到污染。

在张国英等[10]的研究中可见，365份送检标本中不合格标本17份，348份合格标本中培养阳性93份，痰液标本、尿液标本、分泌物标本和其他标本的涂片与培养结果符合率分别为76.6%、62.5%、87.1%、80.0%。与该院的结果基本相同，证明了该院获得的研究数据和结果可靠。也证明了在标本培养前开展涂片镜检会直接影响微生物检验结果，为临床提供感染信息，对疾病用药、预防进行指导。

综上所述，在微生物标本培养前开展革兰染色镜检能够有效保证结果的准确性，具有非常重要的应用价值。