蓝冰柏挥发油的化学组分及其抑菌活性分析

智亚楠 陈月华 陈平 陈利军 史洪中

摘要：【目的】明确蓝冰柏挥发油的组分及其对植物病原真菌的熏蒸抑制活性，为蓝冰柏在农林业上的应用提供参考依据。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取蓝冰柏挥发油，利用气相色谱—质谱联用技术（GC-MS）分析其化学组分，并测定分析蓝冰柏挥发油对草莓灰霉病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和苹果炭疽病菌等4种植物病原真菌菌丝生长的熏蒸抑制作用。【结果】从蓝冰柏挥发油中共分离到44种组分，鉴定出其中30种组分，占挥发油总量的91.241%，其主要组分为伞形酮（16.416%）、顺式—依兰油-4，5-二烯（14.765%）、4-萜烯醇（12.111%）和右旋柠檬烯（7.044%）等。蓝冰柏挥发油对供试草莓灰霉病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和苹果炭疽病菌均有一定的熏蒸抑制作用，有效中浓度（EC50）分别为0.91、2.27、0.84和4.12 μL/皿。【结论】蓝冰柏挥发油对植物病原真菌菌丝生长有一定的熏蒸抑制作用，其活性成分可作为先导化合物用于开发新型农药或直接作为杀菌剂应用于植物病害防控。

关键词： 蓝冰柏；熏蒸抑菌活性；挥发油；化学组分

中图分类号： S476 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018）08-1555-06

0 引言

【研究意义】植物挥发油是从植物中提取获得的一类具有特征性香气物质（徐汉虹，2001），其成分复杂，安全性较高（李燕君等，2016），已广泛应用于医疗和食品（Paul et al.，2007；周晓薇等，2010；钟曼茜等，2017）等行业，因具有农用活性（张兴等，2015），在农业领域也有应用，如辣薄荷挥发油对四纹豆象（Raja et al.，2001）和家蝇（Sinthusiri and Soonwera，2014）具有杀虫活性；土荆芥（陈利军等，2014）、小鱼仙草（陈利军等，2016）和黄花蒿（智亚楠等，2016）等植物挥发油对多种植物病原真菌菌丝生长具有抑制作用。挥发油中的天然活性成分如4-萜烯醇、丁香酚、香芹酮、1，8-桉叶素和麝香草酚对镰刀菌属、曲霉菌属和青霉菌属等真菌的生长均具有抑制作用（Morcia et al.，2012）。蓝冰柏（Cupressus glabra ‘Blue Ice）为柏科柏木属，是欧美传统的圣诞树首选树种，目前已在我国批量生产和推广。蓝冰柏株形垂直整洁且紧凑，常年不落叶，叶片呈霜蓝色，是常用的观赏类彩叶植物。因其树姿优美，移植成活率高，已成为我国广泛种植的园林树种之一（邵红琼，2013）。蓝冰柏很少受病虫侵染，是否与自身产生的抗菌活性物质有关值得深入研究和探讨。【前人研究进展】蓝冰柏和大多数柏科植物一样具有浓郁的芳香气味，含有丰富的挥发油，但目前未见蓝冰柏挥发油活性成分的研究报道。已有学者对多种柏科植物的挥发油组分及活性进行了研究。王淳凯等（2008）通过气相色谱—质谱联用技术（GC-MS）分析地中海柏挥发油的组分，共鉴定出38种化合物，其主要成分为罗汉柏烯、α-柏木烯和α-雪松醇，并通过试验发现地中海柏挥发油对活性氧自由基具有显著的清除作用，对肝组织质脂过氧化物的形成有很好的抑制作用，在体外能有效抑制鼻咽癌细胞增殖。黄传奇等（2013）采用水蒸氣蒸馏法提取北美圆柏和侧柏的挥发油，并测定了两种挥发油对金黄色葡萄球菌、黑曲霉、酿酒酵母菌、大肠杆菌和沙门氏菌等常见细菌的抑制活性，结果发现两种挥发油对供试细菌均表现较强的抑制活性，与对照药剂四环素相比有明显的优势。吴彦等（2015）报道，侧柏叶挥发油的主要成分为α-蒎烯、雪松醇、3-蒈烯和石竹烯等，通过硅胶柱层析分离挥发油，共得到3种单体化合物，分别为α-蒎烯、β-水芹烯和4-萜烯醇，并发现挥发油及其活性单体对烟草甲和赤拟谷盗有良好的触杀和熏蒸活性。张育光等（2015）采用亚临界流体萃取技术提取崖柏挥发油，并对萃取条件进行优化，用GC-MS对所得的崖柏挥发油进行了组分分析，主要组分是罗汉柏烯和α-柏木脑。【本研究切入点】蓝冰柏资源丰富，已在我国多地成功引种，但尚未见其挥发油化学组分分析及其抗菌活性的报道。【拟解决的关键问题】通过水蒸气蒸馏法提取蓝冰柏的挥发油，利用GC-MS分析其化学组分及其含量，并以草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）、油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）和苹果炭疽病菌（Colletotrichum gloeosparioides）4种植物病原真菌为目标菌，采用生长速率法测定蓝冰柏挥发油对4种病原菌菌丝生长的熏蒸抑制作用，以期为蓝冰柏在农林业上的应用提供参考依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

供试蓝冰柏于2016年6月采自河南省信阳市百花园，采其健康、新鲜枝叶备用，提取挥发油。供试植物病原真菌：草莓灰霉病菌、油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌和苹果炭疽病菌均由信阳农林学院植物保护实验室分离保存。马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基：马铃薯200 g、葡萄糖18 g、琼脂17 g、水1000 mL。

主要仪器设备：Agilent 6850/5975气质联用仪（美国安捷伦公司）、NIST14谱库、HP-250S生化培养箱（武汉瑞华仪器设备有限责任公司）和水蒸气蒸馏装置（金坛市恒丰仪器制造有限公司）等。

1. 2 蓝冰柏挥发油的提取

采用水蒸气蒸馏法提取蓝冰柏挥发油（李植飞等，2015）。将蓝冰柏新鲜枝叶剪成0.5 cm的小段，称取200 g装入5 L的圆底烧瓶中，加入3000 mL蒸馏水浸泡3 h，连续蒸馏提取2 h后，收集挥发油（浅黄色具浓郁气味的油状液体），4 ℃密封保存备用。试验重复3次。

油含率（%）= 挥发油体积/样品质量×100

1. 3 蓝冰柏挥发油熏蒸抑菌活性测定

采用菌丝生长速率法测定蓝冰柏挥发油的熏蒸抑菌作用（陈利军等，2014）。在90 mm培养皿中加入融化的PDA培养基，制成厚薄均匀的平板，平板中央接种直径为5 mm的植物病原真菌菌饼。在皿盖上放置1张灭菌的圆形滤纸片，滤纸片上滴加一定剂量的挥发油。皿底皿盖对扣后，用Parafilm封口膜密封，倒置培养，72 h后观察真菌的生长情况，并采用十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率。不同病原真菌使用的挥发油剂量根据预试验结果设置，以仅放置1张滤纸片不滴加挥发油为对照。各试验设3次重复。

利用SPSS 17.0对试验数据进行统计分析，建立毒力回归方程，并求得相关系数和有效中浓度（EC50）。

1. 4 蓝冰柏挥发油化学组分测定

色谱条件：色谱柱为HP-5MS毛细管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度260 ℃；程序升温，初始柱温为60 ℃，保持2 min，以10 ℃/min升温至230 ℃，保持1 min；载气为高纯氦气，流速为1.0 mL/min，不分流进样，进样量为1.0 μL，进样前蓝冰柏挥发油用乙醚稀释800倍。

质谱条件：电离方式为EI，电离能量70 eV，离子源温度220 ℃，扫描范围33～350 amu。

2 结果与分析

2. 1 蓝冰柏中挥发油的油含率

经计算，采用水蒸气蒸馏法提取蓝冰柏挥发油的油含率为0.53%。

2. 2 蓝冰柏挥发油的化学组分分析结果

GC-MS分析蓝冰柏挥发油化学组分的总离子流，结果见图1。利用色谱峰面积归一法测得各组分的相对含量，所得质谱图经NIST14质谱数据库检索，与标准图谱核对，并结合CAS号分析鉴定各组分。结果从蓝冰柏挥发油中共分离出44种组分，鉴定出30种组分（表1），占挥发油总量的91.241%。

从表1可看出，蓝冰柏挥发油中相对含量最高的组分为伞形酮（16.416%），其次为顺式—依兰油-4，5-二烯（14.765%）、4-萜烯醇（12.111%）和右旋柠檬烯（7.044%）等，在已鉴定的化合物中，单萜类及其含氧衍生物18种，占挥发油总量的48.896%；倍半萜类及其含氧衍生物8种，占挥发油总量的35.655%。

2. 3 蓝冰柏挥发油对植物病原真菌的熏蒸抑制作用

从表2可看出，蓝冰柏挥发油对供试4种植物病原真菌菌丝生长均具有一定的熏蒸抑制作用，抑制作用随挥发油剂量的增加而增强。本研究选用的最小浓度为0.50 μL/皿，最大浓度为10.00 μL/皿，当浓度为1.00 μL/皿时，蓝冰柏挥发油对草莓灰霉病菌和小麦赤霉病菌的抑菌率均超过50.00%；当浓度为4.00 μL/皿时，蓝冰柏挥发油对草莓灰霉病菌的抑菌作用最明显，抑菌率达90.03%，对油菜菌核病菌和小麦赤霉病菌的抑菌率均超过70.00%，对苹果炭疽病菌的抑菌率最低，为32.08%；当浓度为7.00 μL/皿时，蓝冰柏挥发油对油菜菌核病菌和小麦赤霉病菌的抑菌率均超过90.00%；当浓度为10.00 μL/皿时，蓝冰柏挥发油对苹果炭疽病菌的抑菌率为82.08%。

蓝冰柏挥发油对4种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用毒力测定结果（表3）表明，蓝冰柏挥发油对草莓灰霉病菌和小麦赤霉病菌的抑制效果良好，EC50均小于1.00 ?L/皿，分别为0.91和0.84 ?L/皿；蓝冰柏挥发油对油菜菌核病菌的EC50为2.27 ?L/皿；蓝冰柏挥发油对苹果炭疽病菌的抑制效果较弱，EC50为4.12 ?L/皿。

3 讨论

本研究通过水蒸气蒸馏法提取蓝冰柏的挥发油，其主要组分为伞形酮（16.416%）、顺式—依兰油-4，5-二烯（14.765%）、4-萜烯醇（12.111%）和右旋柠檬烯（7.044%）等，与已报道的柏科植物挥发油组分差异明显。吴颖等（2015）报道扁柏挥发油主要成分为5-蒈醇、榄香醇和大根香叶烯等；姚莉等（2005）报道的岷江柏叶挥发油、雷华平等（2016）报道的侧柏挥发油中含有伞形酮，但含量较低；雷华平等（2016）报道侧柏挥发油的主要成分为α-蒎烯、3-蒈烯和雪松醇等。这些差异可能是由于柏科植物种类多，不同的属亲缘关系较远、生境不同所造成。

柏科植物挥发油具有多方面的活性。Krauze-Baranowska等（2002）发现小侧柏挥发油对镰刀菌有一定的抑制作用。蒋继宏等（2006）测定了刺柏、圆柏、龙柏、日本扁柏和绒柏5种柏属植物挥发油的组分，发现几种挥发油对肺癌细胞均有抑制效果。园柏和龙柏挥发油（崔艳秋等，2006）、日本花柏心材挥发油（刘志明等，2011）对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌等多种细菌均有抑制作用。Wedge等（2009）发现两种刺柏属植物方枝柏和高山柏挥发油对尖孢炭疽菌（C. acutatum）、草莓炭疽菌（C. fragariae）和胶胞炭疽菌（C. gloeosporioides）均有抑制作用，但抑制效果不如苯菌灵和克菌丹；而在杀虫活性测定中两种挥发油在低剂量条件下对杜鹃网蝽的致死率高于马拉硫磷。蓝冰柏挥发油中所含组分4-萜烯醇（Morcia et al.，2012）和右旋柠檬烯（DAlessio et al.，2013）已被证实具有抑菌活性，同时是许多种植物挥发油成分的重要组成部分。伞形酮属于香豆素类化合物，广泛存在于苦竹属和牡竹属等植物的叶片中，香豆素类化合物具有多方面的药理活性，有很高的药用价值，也可作为香料使用（魏琦等，2014）。而另外一种含量较高的组分顺式—依兰油-4，5-二烯的理化性质和生物活性未见相关报道，有待得到单体之后进一步研究。

本研究发现，藍冰柏挥发油对供试4种植物病原真菌均有强烈的熏蒸抑制作用，对4种真菌菌丝生长的熏蒸抑制作用EC50介于0.84～4.12 μL/皿，其中挥发油对草莓灰霉病菌和小麦赤霉病菌的抑制效果良好，EC50小于1.00 ?L/皿。可见，蓝冰柏挥发油具有作为熏蒸型杀菌剂的潜力和开发前景。蓝冰柏挥发油化学组分复杂，其抑菌作用是基于4-萜烯醇和右旋柠檬烯等的活性，或是几种其他组分参与抑菌，哪种组分活性高等均有待进一步探究。

4 结论

本研究采用GC-MS从蓝冰柏提取的挥发油中分离出44种组分，鉴定了30种组分，主要组分为伞形酮、顺式—依兰油-4，5-二烯、4-萜烯醇和右旋柠檬烯等。蓝冰柏挥发油对植物病原真菌菌丝的生长具有熏蒸抑制作用，其活性成分可作为先导化合物用于开发新型农药或直接作为杀菌剂应用于植物病害防控。

参考文献：

陈利军， 陈月华， 周巍， 尹健， 胡孔峰， 杨俊杰. 2016. 河南鸡公山小鱼仙草挥发油的抑菌作用及组分分析[J]. 南方农业学报，47（11）：1875-1879. [Chen L J， Chen Y H， Zhou W， Yin J， Hu K F， Yang J J. 2016. Antifungal effect and chemical constituents of essential oil from Mosla dian-thera in Jigong Mountain of Henan[J]. Journal of Sou-thern Agriculture，47（11）：1875-1879.]

陈利军， 智亚楠， 王国君， 史洪中. 2014. 土荆芥花序和叶挥发油的抑菌作用及组分分析[J]. 植物保护， 40（5）： 40-43. [Chen L J， Zhi Y N， Wang G J， Shi H Z. 2014. The antifungal activity and chemical constituent analysis of essential oils from flowers and leaves of Chenopodium ambrosioides[J]. Plant Protection， 40（5）： 40-43.]

崔艳秋， 南蓬， 林满红， 段佳， 崔心红. 2006. 园柏和龙柏主要挥发物及其抑菌和杀菌作用[J]. 环境与健康杂志， 23（1）： 63-65. [Cui Y Q， Nan P， Lin M H， Duan J， Cui X H. 2006. Main volatile components in the leaves of Sabina chinensis L. Ant. and Sabina chinensis L. Ant. cv. Kaizuca and their effects on bacteria[J]. Journal of En-vironment and Health， 23（1）： 63-65.]

黄传奇， 张林碧， 章习哲， 雷咪， 严何. 2013. 北美圆柏与侧柏挥发性成分体外抑菌活性的比较[J]. 湖北中医药大学学报， 15（2）：42-44. [Huang C Q， Zhang L B， Zhang X Z， Lei M， Yan H. 2013. Vitro antibacterial activity comparasion of volatile components between Sabina virginiana and Platycladus orientalis[J]. Journal of Hubei University of Chinese Medicine， 15（2）：42-44.]

蒋继宏， 李晓储， 高甜惠， 何冬宁， 陈凤美， 张艳平， 黄利斌. 2006. 几种柏科植物挥发物质及抗肿瘤活性初步研究[J]. 福建林业科技， 33（2）： 52-57. [Jiang J H， Li X C， Gao T H， He D N， Chen F M， Zhang Y P， Huang L B. 2006. Volatile constituents from the cupressaceae plants and their antitumor activities[J]. Journal of Fujian Forestry Science and Technology， 33（2）： 52-57.]

雷华平， 张辉， 叶掌文. 2016. 侧柏和千头柏挥发油化学成分分析[J]. 中国野生植物资源，35（4）： 26-29. [Lei H P， Zhang H， Ye Z W. 2016. Chemical constituents of e-ssential oil from P. orientalis and P. orientalis cv. sieboldii[J]. Chinese Wild Plant Resources， 35（4）： 26-29.]

李燕君， 孔维军， 李梦华， 杨世海， 杨美华. 2016. 植物精油抑制真菌及真菌毒素的研究进展[J]. 中草藥， 47 （11）： 2011-2018. [Li Y J， Kong W J， Li M H， Yang S H， Yang M H. 2016. Advance in study on plant essential oils for their inhibitory effects on fungal growth and mycotoxin synthesis[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs， 47（11）： 2011-2018.]

李植飞， 李堪， 李芳耀， 陈行， 赵怀翰， 杜园园， 李秋萍. 2015. 容县乌榄叶挥发油化学成分及抗氧化活性分析[J]. 南方农业学报， 46（2）： 317-321. [Li Z F， Li K， Li F Y， Chen H， Zhao H H， Du Y Y， Li Q P. 2015. GC-MS analysis and antioxidant activity of volatile oil from leaves of Canarium pimela Leenh. in Rongxian County[J]. Journal of Southern Agriculture， 46（2）： 317-321.]

刘志明， 王海英， 王芳， 潘晓星， 田补. 2011. 日本花柏心材精油的抑菌活性分析[J]. 生物质化学工程， 45（4）：27-31. [Liu Z M， Wang H Y， Wang F， Pan X X， Tian B. 2011. Antibacterial activity analysis of essential oil from Chamaecyparis pisifera Heartwood[J]. Biomass Chemical Engineering， 45（4）：27-31.]

邵红琼. 2013. 蓝冰柏大棚营养钵繁殖及露地育苗技术要点[J]. 南方园艺， 24（2）： 39-40. [Shao H Q. 2013. The technical points of culturing pan breeding in greenhouse and seedling in open field of Cupressusglabra‘Blue Ice [J]. Southern Horticulture， 24（2）： 39-40.]

王淳凱， 瞿伟菁， 孙伟， 李玉菊. 2008. 地中海柏挥发油抗氧化、抑肿瘤及其化学表征[J]. 天然产物研究与开发， 20（4）： 223-228. [Wang C K， Qu W J， Sun W， Li Y J. 2008. The antioxidation antitum activity and chemical characterization of essential oil from Cupressus sempervirens L.[J].Natural Product Research and Development， 20（4）： 223-228.]

魏琦， 王进， 喻谨， 孙嘏， 岳永德， 汤锋. 2014. 10种苦竹属竹叶中香豆素类化合物的比较研究[J]. 中国药科大学学报， 45（3）：297-300. [Wei Q， Wang J， Yu J， Sun J， Yue Y D， Tang F. 2014. Coumarins in bamboo leaves of 10 species of Pleioblastus Nakai[J]. Journal of China Pharmaceutical University， 45（3）：297-300.]

吴彦， 张文娟， 李志华， 郑历史， 王萍娟， 韦建玉， 黄东业， 田兆福， 李小兰， 杜树山. 2015. 侧柏叶对烟草仓储害虫烟草甲和赤拟谷盗的毒杀作用[J]. 烟草科技， 48（10）：31-35. [Wu Y， Zhang W J， Li Z H， Zheng L S， Wang P J， Wei J Y， Huang D Y， Tian Z F， Li X L， Du S S. 2015. Toxic activities of Platycladus orientalis against Lasioderma serricorne and Tribolium castaneum in stored tobacco[J]. Tobacco Science and Technology， 48（10）：31-35.]

吴颖， 季红斌， 张泓， 范逸君， 唐文， 李晶晶. 2015. 扁柏精油提取工艺的优化及成分分析[J]. 上海应用技术学院学报（自然科学版）， 15（1）： 55-58. [Wu Y， Ji H B， Zhang H， Fan Y J， Tang W， Li J J. 2015. Extraction optimization and chemical component analysis of essential oils from cypress trees[J]. Journal of Shanghai Institute of Technology（Natural Science）， 15（1）： 55-58.]

徐汉虹. 2001. 杀虫植物与植物性杀虫剂[M]. 北京： 中国农业出版社： 107. [Xu H H. 2001. Insecticidal Plant and Vegetable Pesticides[M]. Beijing：China Agriculture Press： 107.]

姚莉， 刘侠， 魏泱， 潘明. 2005. 四个不同居群岷江柏叶精油组分比较研究[J]. 天然产物研究与开发， 17（5）： 610-613. [Yao L，Liu X，Wei Y，Pan M. 2005. Essential oil from four populations of Cupressus chenegiana[J]. Natural Product Research and Development，17（5）： 610-613.]

张兴， 马志卿， 冯俊涛， 吴华， 韩立荣. 2015. 植物源农药研究进展[J]. 中国生物防治学报，31（5）：685-698. [Zhang X， Ma Z Q， Feng J T， Wu H， Han L R. 2015. Review on research and development of botanical pesticides[J]. Chinese Journal of Biological Control， 31（5）： 685-698.]

张育光， 侯春， 吴新星， 姜兴涛， 余汉谋， 李剑政. 2015. 亚临界流体萃取崖柏挥发油及其成分分析[J]. 食品工业科技， 36（21）：210-213. [Zhang Y G， Hou C， Wu X X， Jiang X T， Yu H M， Li J Z. 2015. Extraction of the Thuja sutchuenensis essential oil by sub-critical fluid extraction technology and its component analysis[J]. Scien-ce and Technology of Food Industry， 36（21）：210-213.]

智亚楠，陈月华，马宇明，尹健，陈利军. 2016. 河南省黄花蒿挥发油的组分分析及抑菌作用测定[J]. 河南农业科学，45（12）：105-109. [Zhi Y N，Chen Y H，Ma Y M，Yin J，Chen L J. 2016. The chemical constituents and antifungal activity of essential oil from Artemisia annua Linn in Henan Province[J]. Journal of Henan Agricultural Scien-ces，45（12）：105-109.]

钟曼茜，张史青，黄绵佳，王龙蓓，陈翠，从心黎. 2017. 黄皮精油熏蒸对常温贮藏番木瓜的保鲜效果[J]. 江苏农业学报，33（3）：667-673. [Zhong M X，Zhang S Q，Huang M J，Wang L B，Chen C，Cong X L. 2017. Fresh-keeping of papaya fruits stored at room temperature by Clausena lansium oil fumigation[J]. Jiangsu Journal of Agricultu-ral Sciences，33（3）：667-673.]

周晓薇， 王静， 顾镍， 郑永华. 2010. 植物精油对果蔬防腐保鲜作用研究进展[J]. 食品科学， 31（21）： 427-430. [Zhou X W， Wang J，Gu N， Zheng Y H. 2010. Research progress in preservative effect of plant essential oil on fruits and vegetables[J]. Food Science， 31（21）： 427-430.]

DAlessio P A，Ostan R，Bisson J F，Schulzke J D，Ursini M V. 2013. Oral administration of d-limonene controls inflammation in rat colitis and displays anti-inflammatory properties as diet supplementation in humans[J]. Life Sciences， 92（24）： 1151-1156.

Krauze-Baranowska M， Mardarowicz M， Wiwart M. 2002. The chemical composition of Microbiota decussata[J]. Zeitschrift fur Naturforschung. C， A Journal of Bioscien-ces， 57（11-12）：998-1003.

Morcia C， Malnati M， Terzi V. 2012. In vitro antifungal activity of terpinen-4-ol， eugenol， carvone， 1，8-cineole（eucalyptol） and thymol against mycotoxigenic plant pathogens[J]. Food Additives & Contaminants， 29（3）： 415-422.

Paul S， Christine K， Jürgen R. 2007. Susceptibility of drug-resistance clinical herpes simplex virus type 1 strains to essential oils of ginger， thyme， hyssop，and sandalwood[J]. Antimicrobial Agent and Chemotherapy，51（5）： 1859-1862.

Raja N， Albert S， Ignacimuthu S， Dorn S. 2001. Effect of plant volatile oils in protecting stored cowpea Vigna unguiculata（L.）Walpers against Callosobruchus maculatus（F.）（Coleoptera：Bruchidae） infestation[J]. Journal of Stored Products Research， 37（2）： 127-132.

Sinthusiri J， Soonwera M. 2014. Oviposition deterrent and ovicidal activities of seven herbal essential oils against female adults of housefly， Muscadomestica L.[J]. Parasitology Research， 113（8）： 3015-3022.

Wedge D E，Tabanca N，Sampson B J，Werle C，Demirci B，Baser K H C，Nan P，Duan J，Liu Z J. 2009. Antifungal and insecticidal activity of two Juniperus essential oils[J]. Natural Product Communications， 4（1）：123-127.

（責任编辑 麻小燕）